2013～2016年兰州市三种奶牛口蹄疫灭活疫苗A型抗体效价比较

张新兰，于清磊

（1.兰州市动物疫病预防控制中心，兰州 730050；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，兰州 730046）

2013～2016年兰州市三种奶牛口蹄疫灭活疫苗A型抗体效价比较

张新兰1，于清磊2

（1.兰州市动物疫病预防控制中心，兰州 730050；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，兰州 730046）

为掌握近年来兰州市奶牛强制免疫使用的A型口蹄疫灭活疫苗、O型-A型-亚洲I型三价口蹄疫灭活疫苗、O型-A型二价口蹄疫灭活疫苗的免疫效果，科学评价免疫质量和合理制定口蹄疫免疫程序，本研究应用液相阻断ELISA方法对2013～2016年兰州市三种奶牛口蹄疫灭活疫苗的A型抗体效价进行了血清学监测与对比分析。结果表明，三种口蹄疫疫苗接种奶牛21d后，均能很好地诱导奶牛机体产生A型抗体，免疫效果差异不显著。

奶牛；A型口蹄疫；血清学监测；免疫效果；比较分析

口蹄疫（foot and mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（foot and mouth disease virus，FMDV）引起偶蹄动物感染的一种急性、热性、高度接触性传染病，以口腔黏膜、鼻镜、蹄部和乳房皮肤发生水疱和溃烂为特征。该病传播迅速，感染率和发病率都很高，对公共卫生及国际贸易危害严重，是世界动物卫生组织（0IE）规定的必须报告的动物传染病之一，我国将其列为一类动物疫病。目前，预防和控制口蹄疫的主要方法是疫苗免疫接种，我国采取强制免疫措施进行口蹄疫防控。目前广泛使用的奶牛口蹄疫疫苗有灭活疫苗、基因工程疫苗、合成肽疫苗等，以灭活疫苗使用最为广泛。国内有多家兽用生物制品企业生产口蹄疫灭活疫苗，但产品质量良莠不齐，免疫效果差异较大[1～3]。曹世帧等[4]曾于2012年对兰州市使用的国内4个疫苗生产企业的4种O型-亚洲Ⅰ型口蹄疫灭活疫苗进行了免疫效果对比试验，证实4种口蹄疫灭活疫苗对奶牛机体保护性抗体诱导能力参差不齐。本研究对2013～2016年兰州市强制免疫使用的三种奶牛口蹄疫灭活疫苗的A型抗体效价进行比较分析，为今后有效防控奶牛口蹄疫提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 疫苗

政府招标采购的国内两个主要口蹄疫疫苗生产企业生产的A型口蹄疫灭活疫苗（批号：C131210J）、O型-A型-亚洲I型三价口蹄疫灭活疫苗（批号：20140824）、O型-A型二价口蹄疫灭活疫苗（批号：E160310J）；按照规定保存，按照使用说明进行书免疫接种。

1.2 血清样品

全市所属6区3县2013～2016年春秋两季强制免疫21d后，随机采集免疫奶牛的血清样品，共计2 923份，其中商品代奶牛场2 691份，奶牛养殖户232份。

1.3 诊断试剂

口蹄疫A型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒（批号：2013091103、20131028、2014052003、20150422103-4、20150821103-2、20160518103-1），均由中国农业科学院兰州兽医研究所生产。

1.4 试验设计

1.4.1 疫苗接种

按照国家口蹄疫免疫方案及口蹄疫免疫接种技术规范（NY/T 1955-2010）[5]进行疫苗免疫。

1.4.2 血清学检测

按照口蹄疫诊断技术（GB/T 18935-2003）[6]进行操作与判定，免疫接种21d后采血，分离血清，进行免疫抗体水平抽样检测。液相阻断ELISA检测抗体效价≥1∶128为免疫合格。

2 结果与分析

2.1 A型口蹄疫抗体效价检测

在全市157个奶牛养殖场点随机抽取2 923份免疫过口蹄疫灭活疫苗的血清样品，进行A型口蹄疫抗体效价检测，免疫合格份数为2 533份，平均合格率86.66%。结果见表1。

表1 2013～2016年兰州市奶牛A型口蹄疫抗体效价检测结果

在117个商品代奶牛场随机抽取2 691份免疫血清样品进行A型口蹄疫抗体效价检测，免疫合格份数为2 346份，平均合格率87.18%；在40个散养户随机抽取232份免疫样品进行抗体效果检测，免疫合格份数为187份，平均合格率80.60%。结果见表2。

表2 不同养殖场点奶牛A型口蹄疫免疫抗体检测结果

A型口蹄疫灭活疫苗在73个场点随机抽取1 197份免疫血清样品进行抗体效价检测，免疫合格份数为1 006份，平均合格率84.04%；O型-A型-亚洲I型口蹄疫三价灭活疫苗在49个场点随机抽取956份免疫血清样品进行A型抗体效价检测，免疫合格份数为869份，平均合格率90.90%；O型-A型口蹄疫二价灭活疫苗在35个场点随机抽取770份免疫血清样品进行A型抗体效价检测，免疫合格份数为658份，平均合格率85.45%。结果见表3。

2.2 结果分析

2.2.1 三种口蹄疫疫苗的A型免疫抗体效价

国内两个主要口蹄疫疫苗生产企业生产的三种口蹄疫灭活疫苗的A型口蹄疫免疫抗体效价合格率均达到农业部≥70%的规定要求（图1），说明三种疫苗均能很好地诱导机体产生A型抗体，免疫效果符合国家规定。

图1 2013～2016年三种口蹄疫灭活疫苗A型免疫抗体效价合格率

表3 三种口蹄疫灭活疫苗A型抗体效价检测结果

2.2.2 不同养殖场A型口蹄疫免疫抗体效价检测结果

从2013～2016年兰州市奶牛A型口蹄疫免疫抗体效价检测结果看，规模奶牛场和散养户免疫抗体合格率差异不显著（图2）。此结果与马长宾等[7]监测结果相符，说明规模养殖场或散养户只要按照正确的操作方法和科学的免疫程序操作，使用合格的疫苗产品，并做好疫苗的贮存工作，就能保障良好的免疫效果。

图2 不同养殖场点A型口蹄疫免疫抗体效价合格率

2.2.3 三种口蹄疫疫苗的免疫合格率比较

理想的口蹄疫疫苗应该是在一次免疫接种后就能刺激机体产生有效、持久的免疫应答。图1和图3显示，三种口蹄疫疫苗免疫合格率均很高，而O型-A型-亚洲I型三价口蹄疫灭活疫苗一免多效，操作省工省时，可缩短防疫周期，大大减轻防疫员的劳动强度。

图3 A型口蹄疫免疫抗体效价检测合格率

3 建议

3.1 进一步加快奶牛口蹄疫的防控与净化工作

口蹄疫的强制免疫事关我国口蹄疫的防控与净化工作，也事关公共卫生安全，各级政府和兽医行政管理部门应高度重视，不断加大免疫效果监测力度，不断扩大监测覆盖面，通过科学检测，达到净化目标。

3.2 进一步加强奶牛口蹄疫免疫效果监测工作

疫苗免疫效果受多种因素的影响，不仅要针对奶牛场的实际情况制定科学的免疫程序，更要注意牛群中口蹄疫免疫抗体的变化情况，应认真做好免疫抗体监测工作，及时补免，确保牛群保持较高的免疫抗体水平。

3.3 进一步加大口蹄疫疫苗质量跟踪监测力度

根据大量的国内文献资料报道，国内生产的口蹄疫疫苗存在质量参差不齐的现象，国家有关部门应加大疫苗生产企业产品质量监管和实时跟踪监测工作，从源头上杜绝不合格疫苗流入市场。

3.4 严格按照口蹄疫免疫程序进行口蹄疫免疫

贾泽颖等[8]对奶牛A型口蹄疫免疫抗体消长规律监测结果表明，A型口蹄疫在免疫后4个月抗体水平下降到临界值；郭日东等[9]对奶牛口蹄疫免疫程序监测结果表明，口蹄疫最佳的免疫程序是1年免疫3次。犊牛应在首免后1个月进行二免，以后每4个月加强免疫一次，成年母牛首免后，每4个月加强一次。

3.5 在秋末入冬前对奶牛进行一次全面的强制免疫

从三种口蹄疫灭活疫苗A型免疫抗体效价检测结果看， O型-A型-亚洲I型三价口蹄疫灭活疫苗抗体水平较好，该疫苗抗原含量为6个PD50，是入冬前免疫首选疫苗。冬春季节特别是1～2月份为口蹄疫高发季节，应在入冬前开展一次免疫接种工作。

[1] 裴洁,田峰,金鑫,等.四种猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫效果的比较[J].畜牧兽医科技信息,2013,9:14-15.

[2] 黄志坚.两种猪口蹄疫O型疫苗应用效果对比试验[J].福建畜牧兽医,2013,5(5):17-18.

[3] 文崇利,兰家暖,陈田娇,等.三种猪O型口蹄疫商品灭活疫苗免疫效果比较[J].广西畜牧兽医,2014,30(5):251-254.

[4] 曹世帧,汪占弟,魏素红,等.奶牛口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫效果对比试验[J]. 中国奶牛,2012,13:44-46.

[5] 农业部.NY/T 1955-2010口蹄疫免疫接种技术规范[S].北京:中国标准出版社,2010-09-21.

[6] 农业部.GB/T 18935-2003口蹄疫诊断技术[S].北京:中国标准出版社,2003-01-10.

[7] 马长宾,刘向鹏,陈文武,等.不同养殖模式下牛群口蹄疫免疫抗体监测情况分析[J].中国草食动物科学,2015,35(4):57-58.

[8] 贾泽颖,刘邓,郭又春,等.奶牛O型、亚洲Ⅰ型、A型口蹄疫免疫抗体变化规律观察[J]. 中国奶牛,2013,4:36-38.

[9] 郭日东,宋丽华,韩吉雨,等.奶牛口蹄疫免疫程序的研究[J]. 中国畜牧兽医文摘,2014,30(5):100-102.

S858.23

A

1004-4264（2017）03-0030-03

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.03.009

2016-09-12

张新兰（1962-），女，高级兽医师，主要从事动物疫病防控技术的研究和动物疫病实验室检测工作推广应用。

于清磊。