原发型干燥综合征继发间质性肺炎患者的血清IL-6 IL-10表达水平分析

韩晓伟 周建尧 侯韬 赵建治 朱俊岭 孙维栋

原发型干燥综合征继发间质性肺炎患者的血清IL-6 IL-10表达水平分析

韩晓伟 周建尧 侯韬 赵建治 朱俊岭 孙维栋

目的 检测原发型干燥综合征（pSS）继发间质性肺炎患者血清炎症因子的表达水平，探讨其与病程发生发展的关系。方法 选取2010年4月至2015年3月间61例pSS患者为观察对象，按照其是否继发间质性肺炎分为观察组和对照组，收集28例健康体检者为正常对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定患者血清中IL-6及IL-10水平，并行IL-6与IL-10水平的相关性分析。结果 观察组和对照组患者的血清IL-6水平显著高于正常对照组，IL-10水平显著低于正常对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者血清IL-6水平显著低于对照组（P＜0.05），血清IL-10水平虽高于对照组，但组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。观察组与对照组血清IL-6与IL-10表达水平呈负相关（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；正常对照组血清IL-6与IL-10表达水平无明显相关性（r=0.191，P＞0.05）。结论 pSS继发间质性肺炎患者血清中IL-6水平较对照组明显上调，IL-10有所下降，提示二者均参与患者继发间质性肺炎的病变病理过程，影响肺弥散功能，可以作为该病诊断和治疗的辅助指标。

原发型干燥综合征 间质性肺炎 炎症因子

原发性干燥综合征（Primary Sjogren's Syndrome，pSS）属于女性多发的慢性系统性自身免疫疾病，破坏患者唾液腺、泪腺等外分泌腺体的腺上皮细胞，是具有高度淋巴细胞浸润特征的上皮炎性疾病，临床除以口、眼干燥作为主要表现外，还存在其它系统器官受累等诸多表现［1］。据相关调查统计我国人群中患病率已经接近0.8%，老年人群中的发病率约为5%左右，其中肺间质病变（ILD）是原发性干燥综合征预后的重要临床指标之一，间质性肺炎的发病率更是接近75%［2］，临床致死率较高，应及早进行诊断治疗。本资料意在探究IL-6、IL-10在原发性干燥综合征继发间质性肺炎患者血清中的表达差异，及与病程发生发展的关系，现将结果报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 选取2010年4月至2015年3月间于本院新确诊且住院治疗的61例pSS患者为观察对象，其中男18例，女43例；年龄34～66岁。按照其是否继发间质性肺炎分为观察组（29例）和对照组（32例）。另纳入28例健康体检者为正常组，其中男13例，女15例，年龄35～62岁。所有患者符合2012年美国风湿病学会干燥综合征分类（诊断）标准［3］，并符合2002年美国胸科协会/欧洲呼吸协会（ATS/ERS）提出的间质性肺疾病（ILD）的诊断标准［4］，同时重叠有机化性肺炎的非特异性间质性肺炎按照间质性肺疾病分类［5］。主动排除有长期吸烟史，有严重肝肾疾病、各种内分泌代谢性疾病、其他呼吸道病史或自身免疫性疾病的患者。所有受试者在年龄、性别及其他相关因素方面差异无统计学意义（P＞0.05），并均对本次研究知情且同意，签订知情同意书，本研究经医院伦理委员会批准通过。

1.2 方法 血清IL-6与IL-10 ELISA检测试剂盒货号分别为E-EL-H0102c和E-EL-H0103c（美国 R&D公司），全自动生化分析仪（日本日立公司，766-020型），检测与操作步骤严格按照说明书进行。所有患者均在接受药物治疗前，清晨空腹采集外周静脉血4ml，室温静置2h或4℃过夜后于1000g离心20min，取血清分装于EP管中，冻存于-80℃样本库保存。同时收集健康志愿者的外周血血清按上述步骤执行。

1.3 统计学方法 采用SPSS 19.0统计软件。计量资料以（x±s）的形式表示，组间差异比较采用独立样本t检验，相关性分析采用Pearson相关分析方法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清IL-6、IL-10表达水平 见表1。

表1 三组血清IL-6、IL-10表达水平比较［μg/L，（x±s）］

2.2 三组血清IL-6与IL-10相关性分析 观察组与对照组血清IL-6与IL-10表达水平呈负相关（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；正常对照组血清IL-6与IL-10表达水平无明显相关性（r=0.191，P＞0.05）。

3 讨论

pSS属于弥散性结缔组织疾病中的一种，极易继发肺脏受累，如何对pSS合并间质性肺病进行有效的诊断和治疗仍是目前临床中较为棘手的问题，探究相关细胞因子在疾病发生发展中的作用，无疑是实现早期诊断和尽快治疗的必然选择。IL-6和IL-10是细胞因子中具有典型意义的促炎因子和抑炎因子，其中IL-6可以影响B细胞的增殖活化，是诱导其产生抗体的必需因子，对粒细胞的分化及杀伤细胞对肿瘤细胞的杀伤作用均有影响，又被称为前炎症细胞因子。IL-10则是通过诱导T 细胞由Th1向Th2转化，抑制抗原提呈细胞的功能，抑制血管细胞粘附分子1的表达，减少单核细胞向内皮细胞粘附，阻止淋巴细胞进入处于炎症状态的因子［6］。

本资料结果显示，相对于正常人群观察组和对照组患者的血清IL-6水平显著升高，且观察组血清IL-6水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），由此可以看出，IL-6在pSS合并间质性肺炎病变中存在异常表达，且与疾病的发生发展密切相关。分析原因应该与IL-6分化为炎症性Th17 细胞，影响Th17 / Treg 的平衡密切相关。此外观察组和对照组患者血清IL-10水平显著低于正常对照组，且观察组血清IL-10水平显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），提示其与疾病的发生发展密切相关，这与刘健等［7］的研究结果相一致，分析原因应该与患者B细胞活化因子水平下降密切相关。

相关性分析显示，观察组与对照组血清IL-6与IL-10表达水平呈负相关（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；正常对照组血清IL-6与IL-10表达水平无明显相关性（r=0.191，P＞0.05）。由此可以看出血清IL-6水平的上升和IL-10水平的下降是干燥综合征继发间质性肺炎患者出现进一步自身免疫紊乱的主要因素，且二者之间有着密切的相关性。当炎症因子的水平出现变化时，患者的自身免疫耐受被打破，继而出现小气道及周围支气管上皮的淋巴细胞浸润致肺组织损害，最终导致肺功能的降低［8］。

综上所述，IL-6和IL-10参与了干燥综合征继发间质性肺炎的发生与发展，可以作为该病重要生物标志物，通过检测其变化，达到协助临床诊断和尽早治疗的作用。值得注意的是，由于实验条件的限制，目前对于这两种炎症因子发挥生物效应及具体的中间环节了解尚不清楚，未来应该加以深入的探究和案例分析。

［1］ 卢冬梅, 于碧磬, 杨晓红. 原发型干燥综合征并间质性肺疾病临床分析. 新疆医科大学学报, 2015, 38(8):984-990.

［2］ 于杰, 王晓东, 慈春增, 等. BAFF, IL-10在干燥综合征患者血清中的表达及其意义. 潍坊医学院学报, 2015, 37(3):217-219.

［3］ Ruffilli I. Sjogren's syndrome and chemokines. Clin Ter, 2014, 165(6) : e464-e469.

［4］ Zhang R, Sun T, Song L, et al. Increased levels of serum galectin-3 in patients with primary Sjogren's syndrome: associated with interstitial lung disease. Cytokine, 2014, 69(2):289-293.

［5］ 韩丹, 史丽璞, 刘志队. IL-6和IL-17在干燥综合征患者外周血中的表达及临床意义. 中国伤残学, 2014, 22(2):37-38.

［6］ 许满秀,钱先.干燥综合征相关性细胞因子.细胞与分子免疫学杂志, 2014, 30(2):206-208.

［7］ 刘健,万磊,章平衡,等.干燥综合征患者肺功能变化及其辅助性T细胞失衡的相关性.中国临床保健杂志, 2015, 18(2):187-190.

［8］ 金莉, 厉小梅. 趋化因子及其受体在干燥综合征中的作用. 中华临床免疫和变态反应杂志, 2012, 6(2):131-134.

Objective To investigate the serum inflammatory cytokines expression level，and explore its relationship with the occurrence and development of course of the disease，in patients with the Primary Sjogren's Syndrome（pSS）secondary to the interstitial pneumonia. Methods 61 patientsbetween April 2010 to March 2015 were enrolled，with pSS as observation object，they were divided into control group and observation group according to whether they are secondary to the interstitial pneumonia，28 cases from health physical examination were collected for the normal control group. By using enzyme-linked immunosorbent（ELISA）in patients with serum level of IL-6 and IL-10，parallel IL-6 and IL-10 level of correlation analysis. Results The observation group and control group in patients with significantly higher than that of normal control group，serum levels of IL-6，IL-10 level was significantly lower than normal control group，the difference was statistically significant（P＜0.05）；Observation group of patients serum IL-6 were significantly lower than the control group（P＜0.05），serum IL-10 level is higher than the control group，but there was no statistically significant difference compare between groups（P＞0.05）.Observation group and control group of serum IL-6 and IL-10 expression levels showed a negative correlation（r=-0.492，-0.623，P＜0.05）；Normal control group of serum IL-6 and IL-10 expression level no obvious correlation（r=0.191，P＞ 0.05）. Conclusions The serum level of IL-6 rises obviously while IL-10 declines，in PSS secondary interstitial pneumonia patients，showing that both participate in patients with secondary lesions pathologic process of interstitial pneumonia andaffect pulmonary diffusion function，thus can be used as auxiliary indexes in diagnosis and treatment of the disease.

Primary Sjogren's Syndrome Interstitial pneumonia Inflammatory cytokines

312030 浙江省绍兴市中心医院风湿血液科