灵芝固体液化菌种栽培初探*

汤倩倩，孙育红，邹丹蓉，章 超，史国平

（1.上海市农业技术推广服务中心，上海 201103；2.上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201399；3.上海市嘉定区农业技术推广服务中心，上海 201800；4.上海农益科技有限公司，上海 201700）

灵芝固体液化菌种栽培初探*

汤倩倩1，孙育红2，邹丹蓉3，章 超2，史国平4

（1.上海市农业技术推广服务中心，上海 201103；2.上海市浦东新区农业技术推广中心，上海 201399；3.上海市嘉定区农业技术推广服务中心，上海 201800；4.上海农益科技有限公司，上海 201700）

通过灵芝（Ganoderma lucidum）固体液化菌种的制作，以及不同浓度和不同接种量的灵芝固体液化菌种对栽培袋中发菌和出菇影响进行研究。结果表明，灵芝固体液化菌种菌丝量多、流动性好；将灵芝专用固体菌种稀释1 500倍，接种35 mL，需11 d即可长满，47 d即可采收子实体，平均单产42.8 g·袋-1（干品）。

灵芝；固体菌种；液化菌种

固体液化菌种是通过制作专用固体菌种后将其粉碎液化获得的菌种，能够有效解决固体菌种发菌慢、操作繁琐，而液体菌种投入大、难度高的问题。本试验对灵芝固体液化菌种的制作和栽培应用进行了初步研究[1]。

1 材料与方法

1.1 材料仪器

灵芝菌种由上海市崇明区嘉灵农业种植专业合作社提供。

快速接种器、原液贮存罐、增量罐为上海农益科技有限公司生产。

1.2 试验方法

1.2.1 专用固体菌种的制作

专用固体菌种的培养基原料为杂木屑，粉碎成300目的超微结构，调节含水量为80%，装入300 mL三角瓶中，灭菌冷却后接入PDA母种，24℃培养成专用固体菌种[2]。

1.2.2 菌种液化原液的制备

在无菌环境下，将灵芝专用固体菌种加入匀浆机中，添加无菌水1.8 L，搅拌匀浆后制得菌种液化原液，倒入原液罐中待用。

1.2.3 接种流水线消毒、灭菌

快速接种器内部使用高锰酸钾和甲醛混合液消毒。

连接管道系统使用75%酒精消毒。

增量罐灭菌：打开增量罐进料口加水50 L，而后密封。及时通入蒸汽，至压力表达1.5 kg·m-2、温度表指示121℃时，维持时间1.5 h可达到灭菌效果。

1.2.4 液化原液的二次稀释

在无菌条件下，将原液罐与50 L增量罐连接，通过增量罐内负压将原液罐中的原液吸入增量罐，经过滤的空气不断充入增量罐，使菌液在罐内上下翻滚稀释均匀，接种时防止沉淀。

1.2.5 接种

打开液化罐出液管阀门，利用快速接种器吸出稀释菌液，接种器置于工作状态时，即可开始接种。栽培袋规格为17 cm×33 cm，采用常规方式制作，培养基含水量为58%。

1.2.6 菌丝培养和出菇管理

进行菌丝培养和出菇管理。比较不同稀释倍数的固体液化种，以及不同接种量对栽培袋中发菌、出菇的影响，分别制作100袋进行菌丝和出菇观察。

2 试验结果与分析

2.1 固体液化菌种的制备

制作固体专用菌种的培养基是采用超微粉碎后的木屑，易破碎成细小颗粒。培养基基质紧实，培养30 d可长满待用，虽时间较长，但粉碎后菌丝量多，可见明显的细微悬浮颗粒，颗粒中伴有灵芝菌丝。专用固体菌种、固体液化菌种原液见图1、图2。

图1 专用固体菌种Fig.1 Special solid spawn

图2 固体液化菌种原液Fig.2 Liquefied solid spawn

2.2 不同稀释倍数的固体液化种对栽培袋中发菌和出菇的影响

分别取不同量的专用固体菌种制作原液并二次稀释，分别制成1 500倍、2 000倍、3 500倍、5 000倍的稀释菌液，将稀释菌液25 mL接入栽培袋中，每隔12 h观察菌丝萌发情况，5 d后观察菌丝生长情况，记录长满时间、原基形成时间、采收时间。不同浓度的固体液化菌种在栽培袋中发菌和出菇比较见表1。

表1 不同浓度固体液化菌种在栽培袋中发菌和出菇比较Tab.1 Comparison of mycelial growth and fruiting condition withspawn in different concentration

从表1可以看出，接种稀释1 500倍和2 000倍菌液的菌袋48 h即可萌发，接种稀释3 500倍菌液的菌袋60 h萌发，接种稀释5 000倍菌液的菌袋72 h萌发。稀释1 500倍、2 000倍、3 500倍的菌液接种后菌丝生长情况均较好，稀释5 000倍的菌液接种后菌丝相对较弱。稀释1 500倍的菌液接种后21 d即可长满，与更低浓度菌液发菌速度相比相对较快。

2.3 不同接种量对栽培袋中发菌和出菇的影响

制作1 500倍的固体液化菌种，分别在栽培袋中接入15 mL、25 mL、35 mL的稀释菌液，比较发菌和出菇情况，结果见表2、图3、图4。

表2 不同接种量对发菌、出菇的影响Tab.2 Effect of different inoculum size on mycelial growth and fruiting condition

接种量为15 mL、25 mL、35 mL的情况下均易萌发，48 h可见明显萌发，15 mL的接种量菌丝长势略弱。35 mL的接种量生长周期较15 mL、25 mL的缩短，11 d即可长满，17 d可见原基，47 d即可采收灵芝子实体，平均单产41.8 g·袋-1；而15 mL的接种量生长周期最长，需28 d长满全袋，34 d出现原基，63 d子实体成熟采收。

图3 接种量为35 mL的第4天、第6天、第8天、第10天菌丝生长情况Fig.3 Mycelium growth condition with 35mL spawn on the 4th,6th,8th and 10th day

图4 接种量为35 mL的第37天、第44天出菇情况Fig.4 Fruiting condition of Ganoderma lucidum with 35mL spawn on the 37th and 44th day

3 结论

固体液化菌种在接种栽培时，更易达到菌液流动性好，扩散范围大且均匀的效果，固体液化原液用无菌水稀释后，无需培养，营养成分少，能够减少污染。利用稀释1 500倍的灵芝固体液化菌种，接种35 mL仅需11 d即可长满，17 d可见原基，47 d即可采收灵芝子实体，平均单产42.8 g·袋-1（干品）。

专用固体菌种的培养基为300目的细小颗粒，加水灭菌后较为紧实，培养时间较长，可能需要继续研究调整培养基的原材料选择以及制作方式等，缩短专用固体菌种培养时间。在固体液化菌种的制作、稀释过程中需严格控制无菌环境，稀释后的固体液化菌种应确定无污染后才能使用。

[1]胡晓艳.食用菌菌种的最新技术革命还原型液体菌种[J].北京农业，2010（12）：19-20.

[2]余维良，郑明海，方国平，等.秀珍菇固体专用菌种液化生产自动接种技术与固液两态菌种的出菇比较[J].食药用菌，2015，23（2）：102-105.

Test on Production and Cultivation of Ganoderma lucidum Liquefied Solid Spawn

TANG Qian-qian1,SUN Yu-hong2,ZOU Dan-rong3,ZHANG Chao2,SHI Guo-ping4
(1.Shanghai Agricultural Technology Extention and Service Center,Shanghai 201103,China;2.Pudong Agricultural Technology ExtentionCenter,Shanghai 201399,China;3.Jiading Agricultural Technology Extention and Service Center,Shanghai 201800, China;4.Shanghai Nongyi Technology Company,Shanghai 201700,China)

Ganoderma lucidumliquefied solid spawn was tried to be produced.The cultivation ofG.lucidumliquefied solid spawn under different concentration and different inoculum size was studied.The result showed that liquefied solid spawn had advantage of high hyphae amount and good fluidity.With 35 mL liquefied solid spawn which is diluted 1 500 times,the mycelium could grow full of the bags in 11 days,andG.lucidumcan be harvest in 47 days with 42.8 g per bag.

Ganoderma lucidum;solid spawn;liquefied spawn

S646.9

A

1003-8310（2017）02-0024-03

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.02.007

上海市科技兴农攻关项目（沪农攻字（2015）第3-6号）。

汤倩倩（1987-），女，硕士，农艺师，主要从事食用菌技术推广。E-mail:qqtang71@yeah.net

2017-01-17