妊娠期女性HPV感染基因型及临床治疗

吴艳+郑定容

【摘要】 目的：調查分析笔者所在医院辖区范围内妊娠期女性人乳头瘤病毒（HPV）感染及基因型分布情况和特点，并探讨康复新液联合保妇康栓治疗妊娠期女性HPV的临床疗效。方法：随机选取2014年1月-2015年12月笔者所在医院门诊就诊的1456例妊娠期女性患者为观察组，观察组中372例HPV阳性者随机平均分为试验组和常规组（每组186），试验组康复新液联合保妇康栓治疗，常规组保妇康栓治疗；同期随机选取妇科门诊1077例非妊娠期女性为对照组。采用21种型HPV多重PCR荧光检测法对各组患者的子宫颈脱落细胞标本进行检测，并对各组患者的检测结果及治疗结果进行分析比较。结果：观察组中HPV阳性者25.5%（372/1456），其中HPV11 12.9%（188/1456），HPV16 4.1%（60/1456），HPV43 1.8%（26/1456），HPV33 1.4%（20/1456）和HPV58 1.3%（19/1456）；对照组中HPV阳性者16.4%（177/1077），其中HPV11 8.0%（86/1077），HPV16 2.6%（28/1077），HPV43 1.1%（12/1077），HPV33 0.9%（10/1077）和HPV58 0.8%（9/1077）；观察组总HPV感染阳性率及各高危HPV亚型均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗后，试验组治愈率及复发率均优于常规组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：笔者所在医院辖区范围内妊娠期女性高危HPV亚型感染率比较高，且以高危型为主，可能与妊娠期女性长期处于免疫功能抑制状态有关，康复新液联合保妇康栓对宫颈HPV感染的治疗效果优于常规治疗方法。

【关键词】 人乳头瘤病毒； 妊娠； 基因； 分析； 康复新液； 保妇康栓； 疗效

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.5.008 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2017）05-0015-03

Infected Genotype of HPV on Pregnant Women and Its Clinical Treatment/WU Yan，ZHENG Ding-rong.//Chinese and Foreign Medical Research，2017，15（5）：15-17

【Abstract】 Objective：To investigate pregnant female human papilloma virus（HPV） infection and genotype distribution and characteristics in the scope of the jurisdiction of our hospital，and to investigate the clinical efficacy of Kangfuxin combined with Baofu Kang in the treatment of pregnant women HPV.Method：From January 2014 to December 2015 in our hospital，1456 cases outpatient of pregnant women was randomly selected as the observation group，372 cases of HPV-positive in observation group were randomly divided into the experimental group（186 cases） and the conventional group（186 cases）。The experimental group used Kangfuxin combind with Baofu Kang suppository treatment，the conventional group used Baofu Kang suppository.In the same period，1077 cases of non-pregnant women in gynecology clinic were randomly selected as the control group.Cervical exfoliated cells samples were determined using 21 kinds of HPV type fluorescent multiplex PCR assay，and the test results and treatment results of patients in each group were analyzed and compared.Result：HPV-positive was 25.5%（372/1456） in the observation group，of which HPV11 12.9%（188/1456），HPV16 4.1%（60/1456），HPV43 1.8%（26/1456），HPV33 1.4%（20/1456） and HPV58 1.3%（19/1456）；in the control group，16.4%（177/1077） were positive for HPV，of which HPV11 8.0%（86/1077），HPV16 2.6%（28/1077），HPV43 1.1%（12/1077），HPV33 0.9%（10/1077） and HPV58 0.8%（9/1077）.In the observation group，the total positive rate of HPV infection and high-risk HPV subtypes were higher than those of control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.After treatment，the cure rate and recurrence rate of the experimental group was better than the conventional group，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Shenzhen pregnant women infected with high-risk HPV subtypes is relatively high，and mainly in high-risk，pregnant women may be related to long-term state of suppressed immune function，treatment of Kangfuxin combined with Baofu Kang is better than conventional treatment.

【Key words】 Human papilloma virus； Pregnancy； Gene； Analysis； Kangfuxin； Baofu Kang； Efficacy

First-authors address：Shenzhen Baoan District Central Hospital Tiegang Community Health Service Centers，Shenzhen 518102，China

尖锐湿疣（CA）是由人乳头瘤病毒（HPV）感染所致，HPV的持续感染是宫颈癌的主要致病因素，尤其是高危HPV的感染，宫颈癌在全球女性最常见的癌症中居第二位[1-2]。近年来，宫颈癌的发病有年轻化趋势；由于妊娠期为女性区别于常态的特殊时期，机体免疫抵抗力下降，高危HPV感染机会增加，并通过垂直传播增加新生儿感染高危HPV的风险[3]。本研究对妊娠期女性的高危HPV感染情况进行了检测分析，探讨妊娠期女性HPV基因型分布特点，积极治疗妊娠期感染高危HPV亚型的重要意义，并采用康复新液联合保妇康栓联合治疗妊娠期感染高危HPV亚型，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2014年1月-2015年12月笔者所在医院门诊就诊的1456例妊娠期女性患者为观察组，年龄22～42岁，平均（31.1±7.7）岁，孕期6～30周，平均（12.5±5.8）周，无阴道感染，均长期居住于本市，所有受试者均无心、肝和肾等重要脏器严重性疾病，观察组中372例HPV阳性者随机平均分为试验组和常规组（每组186）；随机选取同期妇科门诊的1077例非妊娠期女性为对照组，年龄21～42岁，平均（30.8±7.6）岁；所有研究对象均同意参与试验，并签署知情同意书，经笔者所在医院伦理委员会批准。两组患者一般资料差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 标本采集

样本采集之前，所有患者停止阴道用药及冲洗等处理1周，采用阴道扩张器或窥阴器充分暴露子宫颈，首先用无菌棉拭子将宫颈口过多的分泌物轻拭干净，将宫颈刷伸人宫颈处，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转3～5圈，慢慢抽出宫颈刷，以便取得足够的宫颈上皮细胞标本，并将其放入装有专用细胞保存液的样本管中，旋紧试管盖，置于4 ℃专用医用冰箱送检，放于-20 ℃冰箱保存待测，避免细胞样本反复冻融。

1.3 HPV-DNA的提取及检测

（1）HPV-DNA的提取，将宫颈刷头充分漂洗后，把洗脱液全部转移至1.5 ml的离心管中，台式高速冷冻离心机（珠海黑马TGL-16R）13 000 r/min离心15 min后，弃去上清液，保留离心管底部的细胞。随后加入裂解液50 ml（裂解液购自德國QIAGEN公司），微孔板恒温振荡器（杭州奥盛仪器有限公司MB1O0-2A）充分振荡混匀，在恒温金属浴箱（杭州奥盛K-30B）中100 ℃加热10 min，台式高速冷冻离心机立即13000 r/min离心15 min后，取中间层DNA溶液待用。（2）HPV-DNA的检测采用基因扩增技术及导流杂交原理，仪器为PCR扩增仪（PE Applied Bio systems Genome PCR System 9600）和HybriMax核酸分子快速杂交仪，HPV-DNA扩增分型检测试剂盒（广东潮州凯普公司），其主要检测的15种高危HPV型：HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66和HPV68，6种低危HPV型：HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44和HPV CP8304（81）；步骤均严格按照HPV-DNA分型检测试剂盒说明书操作。

1.4 治疗

常规组病例均用保妇康栓（海南碧凯药业有限公司，国药准字Z46020058）洗净外阴部，将栓剂塞入阴道深部，或在医生指导下用药，用药期间避免性生活，每晚1粒，重症每天用2粒治疗，1个疗程7 d，治疗2个疗程；试验组病例均在常规组病例治疗的基础上，加用康复新液（四川好医生攀西药业有限责任公司，国药准字Z51021834）对阴道清洗后，再将药液浸湿医用纱布塞进阴道深部，每天换药1次，用药期间避免性生活，1个疗程7 d，治疗2个疗程。

1.5 疗效评定标准

（1）治愈：3个月内高危HPV亚型阴性；（2）复发：3个月内高危HPV亚型阳性。

1.6 统计学处理

数据采用SPSS 18.0进行分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV阳性情况

观察组中HPV阳性者25.5%（372/1456），其中HPV11 12.9%（188/1456），HPV16 4.1%（60/1456），HPV43 1.8%（26/1456），HPV33 1.4%（20/1456）和HPV58 1.3%（19/1456），其他高危HPV亚型4.1%；对照组中HPV阳性者16.4%（177/1077），其中HPV11 8.0%（86/1077），HPV16 2.6%（28/1077），HPV43 1.1%（12/1077），HPV33 0.9%（10/1077）和HPV58 0.8%（9/1077），其他高危HPV亚型3.0%，观察组总HPV感染阳性率及各高危HPV亚型均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 妊娠期感染HPV疗效比较

治疗后，试验组治愈率及复发率均优于常规组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

CA发生率近年来迅速增加，目前已成为仅次于淋病的性传播疾病（STD）[4]。CA是感染HPV而引起生殖器及附近皮肤黏膜鳞状上皮的增殖性损伤[5]。HPV是一种对人黏膜和皮肤均有高度亲嗜性的小分子双链DNA病毒，机体的复层鳞状上皮和黏膜鳞状上皮均是HPV的宿主，现已发现HPV有200多个亚型，其中侵犯泌尿生殖系统的有40型以上，60%以上女性在一生的不同阶段都曾经感染过HPV，HPV感染是宫颈癌的主要致病因素之一，99%的子宫颈癌都与生殖器官感染高危型HPV有关[6-7]。HPV的主要传播途径是性传播、垂直传播及环境污染等传播模式[8]。文献[9]报道，妊娠期妇女感染性病检出率增高。

本研究表明，妊娠期的患者总HPV感染阳性率及各高危HPV亚型均高于非妊娠期的患者，这可能与妊娠期激素的影响使阴道内环境改变，阴道pH值下降，以上改变更适合微生物寄居，阴道菌群变化使许多阴道菌群成员可作为条件致病菌引起内源性感染和分泌物增多有关，妊娠期女性免疫功能低下，特别是细胞介导的免疫功能受抑制，妊娠期盆腔的血供丰富，类固醇激素上升，体内雌孕激素水平增加，机体的免疫力下降，阴道黏膜较孕前容易损伤，导致病毒和细菌的易感性上升[10]。HPV感染率最高的4种型别均为高危型的HPV11、HPV16、HPV43和HPV33，本研究发现这与北京、香港和台湾地区的文献报道不尽相同[11-12]。HPV感染具有明显的异质性，其分布也存在种族和地域差异性[13]。HPV亚型的分布在不同人群和不同地域之间存在一定差异性。另外，不健康的性生活及性行为过早发生可能会进一步增加HPV感染率[14]。对妊娠期的女性和男性行HPV检测，对HPV阳性的女性和男性进行及时管理和治疗，并在性事时采用安全套等措施，这样可降低妊娠期的HPV感染率。

此次研究中，经过康复新液联合保妇康栓治疗后，试验组治愈率及复发率均优于常规组。康复新液是由美洲大镰干燥虫体经过乙醇提取的药品制剂，其有效成分为多元醇类、黏糖氨酸及肽类活性物质，能通过刺激免疫活性细胞（ICC），包括：淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞、辅佐细胞和多形核白细胞等，抗感染和释放自由基杀灭HPV病毒，具有通利血脉，调节炎症和组织再生，养阴生肌的作用，激活处于惰性的免疫细胞，改善机体的免疫状态，恢复机体免疫功能，使宫颈所处的阴道环境不适合HPV病毒复制，能从根本上消除HPV病毒感染的内在因素[15-16]。保妇康栓主要是由莪术油与冰片组成的一种纯中药的制剂，具有抑菌消炎、生肌排脓、防腐生肌、清热止痛和清热解毒的作用，保妇康栓水溶性较好[17]。康复新液联合保妇康栓阴道外用方法进行治疗，使康复新液及保妇康栓在阴道内被缓慢释放，使有效成分充满整个阴道并渗入至黏膜皱褶部，深入到褶皱之中，药物充分被黏膜吸收，将药效达到最大程度，协同发挥药物治疗作用，使HPV病毒失去了生存的环境，抑制局部炎症反应，控制HPV病毒感染，加强了局部组织修复与愈合能力，治疗效果明显提高，HPV病毒复发率明显下降。

综上所述，笔者所在医院辖区妊娠期女性高危HPV亚型感染率比较高，可能与妊娠期女性长期处于免疫功能抑制状态有关，康复新液联合保妇康栓对宫颈HPV感染的治疗效果优于常规的治疗方法。

参考文献

[1]李丹，张霞，曾碧冰.203例女性外阴尖锐湿疣患者宫颈HPV基因型检测及分析[J].中国性科学，2012，21（3）：26-29.

[2] Alvarez-Salas L M，Benitez-Hess M L，DiPaolo J A.Advances in the development of ribozymes and antisense oligodeoxynu-cleotides as antiviral agents for human papillomaviruses[J].Antivir Ther，2003，8（4）：265-278.

[3]胡雪濤，雷亚平.北京市房山地区妊娠期女性人乳头瘤病毒感染状况及基因型分析[J].国际检验医学杂志，2015，36（11）：1630-1631.

[4]李安信，尹锐，钟白玉，等.人乳头瘤病毒感染检测及其临床意义[J].中华试验和临床病毒学杂志，2006，20（2）：49-51.

[5] Matsha T，Erasmus R，Kafuko A B，et al.Human papillomavims associated with oesophageal cancer[J].J Clin Pathol，2002，55（8）：587-590.

[6]朱晓珏，耿建祥.308例宫颈瘤组织中HPV感染基因型分布的对比研究[J].国际检验医学杂志，2014，35（23）：3180-3182.

[7]王玉丰，林玲，刘春雨，等.三亚地区妇女人乳头瘤病毒感染的分子流行病学调查[J].检验医学，2012，27（8）：628-630.

[8] Leyb ovich M，Bissada N F，Teich S，et al.Treatment of noncarious cervical lesions by a subepithelial connective tissue graft versus a composite resin restoration[J].Int J Periodontics Restorative Dent，2014，34（5）：649-654.

[9]王凤英，周齐，张海珍，等.1946例妊娠期与产后宫颈细胞学检查异常的分析[J].中国康复理论与实践，2005，11（8）：649-650.

[10]訾聃，杨英捷，任念.妇科门诊妊娠期妇女下生殖道人乳头状瘤病毒感染状况调查[J].贵州医药，2011，35（9）：832-834.

[11] Lin H，Ma Y Y，Moh J S，et al.High prevalence of genital human papillomavirus type 52 and 58 infection in women attending gynecologic practitioners in South Taiwan[J].Gynecol Oncol，2006，101（1）：40-45.

[12]韩品，王培昌，张蕴秀，等.北京地区妊娠期女性HPV感染调查及基因型分析[J].国际检验医学杂志，2013，34（20）：2763-2764.

[13]李晓娇，卢晓佳，张群峰.上海市奉贤区人乳头瘤病毒感染状况及型别分布特征[J].国际检验医学杂志，2014，35（20）：2792-2793.

[14]汪明，李雯，袁乐永，等.湖北地区宫颈疾病患者HPV基因型及其年龄分布[J].微循环学杂志，2014，24（4）：49-53.

[15]周伟，王兴远，龙翔宇，等.康复新联合自制漱口液治疗口腔黏膜急性放射性损伤的效果观察[J].临床合理用药，2015，8（7A）：67-68.

[16]代文洁，郑丽丽，王馨宇.康复新液联合西药保留灌肠治疗溃疡性结肠炎40例[1].中国中西医结合消化杂志，2011，19（1）：52-53.

[17]霍顺璞.保妇康栓联合碱性成纤维细胞生长因子治疗宫颈柱状上皮异位的疗效观察[J].河北医药，2014，18（3）：2772-2774.

（收稿日期：2016-10-18）