全血法流式细胞术检测血小板抗体分析

韩博文

（天津旷博协和生物技术有限公司，天津 300384）

全血法流式细胞术检测血小板抗体分析

韩博文

（天津旷博协和生物技术有限公司，天津 300384）

目的 本文针对全血法流式细胞术在检测血小板抗体中的诊断作用进行研究分析。方法选取我院2015年6月～2017年5月收治的进行质量的特发性血小板减少性紫癜患者77例。将使用传统方法和全血法流式细胞术的患者进行对比测试，将结果进行比较。结果使用全血法流式细胞术进行检测的患者有56例（72.7%），PALgG阳性的为39例，血浆抗血小板抗体阳性，总阳性率为91.6%；使用传统的方法进行检测的是46例（59.7%），PALgG阳性的为25例，主要体现为血浆之中的抗血小板抗体为阳性，总阳性率为75.1%，在使用全血法流式细胞数进行检测的时候，在血小板降低的情况下，血小板之中的LgG和PALgM的荧光度随之增加，所以使用次方法能够比传统方法更为准确。结论全血法流式细胞术在检测血小板抗体的问题上非常有优势，需要的血量比较少，检测结果也比较准确、检测比较灵敏可以重复进行检测，检测结果对医生进行治疗有很大的帮助，可以广泛应用在临床的检测上面。

血小板；抗体；诊断

特发性血小板而造成的较少性紫癜，主要是因为血小板抗原抗血小板和血小板的抗原相结合的过程之中，由于血小板的减少而造成的免疫类疾病，如果想要对于此类疾病进行质量，就需要对于血小板抗体检测的分类的过程进行全面了解，检测得到有价值的信息。检测手段有很多种，传统的检测手段对患者来说非常痛苦，因为对血小板的需求很大的，需要不断地增加采血量，患者和患者家属都很难接受，这极大的影响了治疗效果，还非常容易引起医疗纠纷。所以在进行检测血小板抗体中减少血量的采取和保证检测结果的准确十分重要。全血法流式细胞术在检测血小板抗体的问题上非常有优势，需要的血量比较少，检测结果也比较准确、检测比较灵敏可以重复进行检测，检测结果对医生进行治疗有很大的帮助，可以广泛应用在临床的检测上面。近几年，这一临床检测手段对检测血小板抗体中有了理想效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料

BD公司生产的流式细胞仪FACSCantoII。磷酸缓冲液选择PBS；抗凝剂选择109 mmol/L柠檬酸钠；固定液选择2%的多聚甲醛。CD41-PE选择北京旷博生物技术股份有限公司。

1.2 检测方法

1.2.1 全血法流式细胞术检测将血小板进行分离洗涤

离心时候的洗涤，是需要控制好最后的浓度的，最后血小板浓度尽量在5*106左右，具体操作如下：将2 mL周血600转离心，得1 mL上清，加入1 mL多聚甲醛混匀，2000转离心，弃上清，加入2 mLPBS洗涤，2000转离心，弃上清，加入2 mLPBS重悬备用，取100 uL重悬液与20 uL CD41-PE抗体混匀，孵育20分钟后上机检测。

1.2.2 传统的检测方法

传统检测方法（荧光免疫标记）是将血小板进行分离，然后洗涤，将数量进行计算、溶解、离心。加上96孔酶标板，再加入HRP-lgG，进行均匀的混合，保存环境保证在37摄氏度。60 min之后将酶版取出，使用洗涤液进行清洗四次，加上底物，温度依然控制在37摄氏度，十分钟之后加上终止剂，在使用酶标仪，然后在492 nm下进行检测将颜色度数和计算含量进行比较。

2 结 果

使用全血法流式细胞术进行检测的患者有56例（72.7%），PALgG阳性的为39例，血浆抗血小板抗体阳性，总阳性率为91.6%；使用传统的方法进行检测的是46例（59.7%），PALgG阳性的为25例，血浆抗血小板抗体阳性。

3 讨 论

血小板抗体能够引发很多种疾病，比如特发性血小板减少性紫癜、自身免疫血小板减少症等并发症。现阶段我们对血小板抗体检测还不够普及，方法也不够完善。全血法流式细胞术在对血小板抗体检测、诊断血栓性的疾病和出血性疾病包括血小板等一系列问题的检测判断都有优势，能够帮助医生及时的进行改善病情。传统的检测方法采血量大，并且检测结果也不够准确，影响了患者的治疗效果，对患者和患者家属的情绪影响也比较大。面对这种情况临床需要一种快速、简单、有效、准确、对患者身体影响比较小的血小板抗体检测方法。全血法流式细胞术恰恰能够满足这项需求，弥补了传统方法的许多不足之处。通过本文的对比分析得出，在进行检测血小板抗体的问题里，全血法流式细胞术和传统方法比较，医生可以获得更多可靠信息。所以全血法流式细胞术对血小板检测提供了可靠的技术支持和依据，医生能够更好地为患者进行治疗，更多的获取患者的信息，更准确更详细的了解患者病情信息，对患者的治疗、病情的判断、进行手术的方式、后续监控都十分重要。全血法流式细胞术随着医学的进步，时代的发展，因为优秀的临床价值，开始逐渐替代传统方法被逐渐运用在临床上，能够更好地为患者服务，提高患者治疗效果，减轻患者痛苦，减少医疗纠纷等各种问题。为临床医疗做出了极大贡献。

[1]聂咏梅,Deborah F.Dumont,Larry J.Dumont.流式细胞术检测小鼠全血中人血小板方法的建立[J].广东医学.2010年16期.

[2]余 晖,高晓阳.全血法流式细胞术检测血小板相关抗体[J].细胞与分子免疫学杂志.2010年12期.

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ISSN.2095-8242.2017.061.12002.01

本文编辑：赵小龙