石蜡对病理组织切片的影响

刘毓玲，周 林，许爱萍

石蜡对病理组织切片的影响

刘毓玲，周 林，许爱萍

石蜡切片；石蜡熔点；硬脂酸；蜂蜡

组织石蜡切片技术是病理科最基本最重要的技术，从病理科接收到已固定大体标本，到一张病理切片制成，其间经组织取材固定、脱水、包埋、切片、染色一系列步骤，由于试剂、手工操作、人为主观性以及个人经验等因素，对最终的切片质量均有直接影响。而组织蜡块制备的好坏，则直接影响切片质量。本文结合近10年日常工作实践，分析探讨石蜡对病理组织切片的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 58～60 ℃切片石蜡、60～62 ℃切片石蜡(上海标本模型厂，每盒500 g)；硬脂酸(国药集团化学试剂公司，每瓶500 g)；蜂蜡(国药集团化学试剂有限公司，每瓶500 g)；樱花VIP5全自动组织脱水机，泰维TB-718D组织包埋机。

1.2 方法 按照《临床技术操作规范·病理学分册》中《常规石蜡包埋组织切片(常规切片)的制备》进行组织处理。

2 结果

夏季使用熔点为60～62 ℃的石蜡，春秋冬季使用熔点为58～60 ℃的石蜡；当季节交替时，适当添加硬脂酸、蜂蜡以调整石蜡硬度；保证浸蜡时间为3～5 h；控制浸蜡及包埋温度比熔点高2 ℃，才能保证蜡块质量，进而制得高质量切片。

3 讨论

石蜡作为组织包埋剂，在组织脱水的浸蜡步骤和组织包埋步骤中被运用，是病理切片技术中最常用的材料之一。组织脱水、透明的处理，都是为了更好地让石蜡浸入组织块。石蜡的熔点、添加物、浸蜡时间以及温度设置各条件不同，对切片质量均有不同程度的影响。

3.1 石蜡熔点 石蜡熔点范围大，可选择的余地较多。低熔点石蜡适合在室温偏低时包埋质软组织，高熔点石蜡与之相反。如若遇到室温偏高，低熔点石蜡所制蜡块偏软，切片时易发生卷片、黏连粘刀，无法连续切片，展片也很困难，所制切片皱褶多，而且很难制成薄片。如若遇到室温偏低，高熔点石蜡所制蜡块偏硬，切片易产生裂隙。包埋骨组织、富含肌纤维的组织，还易发生组织破碎，造成蜡块残缺或者崩裂，所制切片不完整，出现跳片，厚薄不均等现象[1]。因此一年四季温度变化，对不同熔点的石蜡使用不能千篇一律，选用不同熔点种类的石蜡，是很有必要的。

3.2 添加物 在日常实际工作中，有时即使根据不同季节选择了不同熔点的石蜡，蜡块质地还是达不到所需要求的，可适当添加硬脂酸、蜂蜡等进行石蜡软硬度调节。

硬脂酸属于脂肪族一元羧酸，为白色叶片细颗粒状，是动植物油脂中一个重要的饱和脂肪酸，弱酸性，熔点为56～69 ℃。可与石蜡液体混合，帮助石蜡渗透到组织内。按照硬脂酸 ∶石蜡为1 ∶9的比例混合使用，起到软化作用。可减小组织收缩，不会变硬变脆。对组织切片起到很好的支持作用，易于连续切片，保证切片完整无裂隙，厚度均一。且硬脂酸对组织内抗原不产生封闭现象，对后期的特染和免疫组化标记无影响[2]。

蜂蜡又称蜜蜡，是由蜜蜂腹部的蜡腺分泌出来的灰黄色固体，主要是棕榈酸蜂酯和蜡酸的混合物，熔点为62～66 ℃，可与石蜡液体混合。按照蜂蜡 ∶石蜡为1 ∶9的比例混合使用，起到硬化作用。增加石蜡韧性，提高蜡块硬度，利于切片平展无皱褶。当有特殊薄切要求时，添加蜂蜡所制石蜡组织块，可以制出良好的2 μm厚切片。

3.3 浸蜡时间 组织脱水机总的浸蜡时间应控制在3～5 h。时间太短，浸蜡时间不够，组织发白、发软，挤压有明显凹陷，切片有明显空洞。时间超过6 h，组织收缩变硬[3]，蜡块易破碎，切片有粉末。

3.4 温度设置 熔蜡的温度一般设置为比熔点高2 ℃，使固体石蜡全部液化即可。浸蜡过程中，温度过高，质密组织周围变硬，中心浸蜡不佳，所制蜡块切片难完整。而且由于酶类对温度敏感性较强，温度越高，对酶活性的破坏就越严重，后期做免疫组化染色抗原易丢失。包埋温度要与浸蜡温度相同或接近[4]，否则易造成组织块与周围石蜡脱裂，无法制片。

病理蜡块是病理科HE切片，免疫组化标记及分子诊断技术的原材料，作为病理技术工作者，必须对石蜡有一个全面了解，对于科室每一批购进的石蜡，都要根据其性状，合理得当使用。这样才能提高病理技术的稳定性，更好地保证切片质量。

[1] 刘 亚, 陈 雪, 魏永敬, 等. 石蜡切片常规制片中预防“跳片”的体会[J]. 临床与实验病理学杂志, 2015,31(4):468.

[2] 胡小安, 卢 静, 张 润, 等. 改良硬脂酸石蜡切片的免疫组化染色效果观察[J]. 诊断病理学杂志, 2004,11(6):439.

[3] 赵 兵, 罗 波, 袁静萍. 影响淋巴结HE制片因素的探讨[J]. 临床与实验病理学杂志, 2012,28(2):220-221.

[4] 祁珊珊, 辛 薇, 王永吉. 大鼠皮肤石蜡切片的制作技巧与质量控制[J]. 临床与实验病理学杂志, 2015,31(11):1307-1308.

时间：2017-4-17 18:19

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170417.1819.029.html

湖北省武汉市中医医院病理科，武汉 430050

刘毓玲，女，主管技师。E-mail: 12412990@qq.com 周 林，男，主治医师，通讯作者。E-mail: 16191025@qq.com

R 329-33

B

1001-7399(2017)04-0462-02

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.04.029

接受日期：2016-12-15