无偿献血者弱D鉴定两种试剂结果不一致分析与探讨

高凌峰

（临汾市中心血站，山西 临汾 041000）

无偿献血者弱D鉴定两种试剂结果不一致分析与探讨

高凌峰

（临汾市中心血站，山西 临汾 041000）

目的通过两种不同的试剂做RhD阴性确认试验，来检测献血者Rh血型是否为RhD弱D型。从而判断两种试剂做RhD阴性确认试验的一致性和必要性。方法选取2017年1月至2017年4月所检测出的RhD弱D型做回顾性检查，发现RhD弱D型一例，通过初筛疑为Rh阴性，分别用两种抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）做抗人球蛋白试验。结果两种试剂一种做出的确认结果为RhD阴性，另一种试剂做出的结果为RhD弱D型。结论不同的试剂厂家的试剂对弱D的检测能力不尽相同，所具备的检测抗原表位的种类也不尽完全相同，所以用不同的厂家的试剂检测弱D是有必要的。

RhD阴性确认试验；弱D检测

Rh血型系统是输血医学中仅次于ABO系统的第二大血型系统。临床上，D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，Rh系统一般只作D抗原鉴定，凡带有D抗原者称为Rh阳性，不带D抗原称为Rh阴性。但弱D型红细胞与某些抗D试剂在盐水介质中不发生凝集，而在间接抗球蛋白试验中发生凝集。因此，当在盐水介质中发现红细胞与IgM抗D不凝集时，不应立即鉴定为RhD阴性，需进一步排除弱D型的可能。在临床献血中，任何献血者被检出Rh弱阳性，都应做为Rh阳性对待，本单位多次检出RhD弱D的标本，但同时也发现有两种试剂检测出现不同结果的情况，个人认为用两种不同厂家的试剂鉴定可以提高弱D的检出率，保障输血安全。现将同一份标本两种不同厂家试剂得出不同结果报告如下。

1 所用试剂

初筛试验选用北京金豪生产的抗D（IgM）血型定型试剂；

确认试验选用加拿大Dominion Biologicals Limited生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）；英国Millipore生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）。

血型血清学方法：按试剂说明书采用盐水法，抗人球蛋白法。

2 方法与结果

2.1 盐水法

2.1.1 用生理盐水配制3%～5%的献血者红细胞悬液。

2.1.2 取标记清晰的洁净试管，加入两滴抗D（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体）。

2.1.3 再向试管中加入一滴3%～5%的待测红细胞悬液。

2.1.4 充分混匀试管中的内容物。

2.1.5 900～1000 g 离心15秒。

2.1.6 轻摇试管，轻轻重悬红细胞，肉眼观察试管底部是否出现凝集。

2.1.7 结果为无肉眼可见凝集。

2.2 间接抗人球蛋白实验

2.2.1 用生理盐水配制3%～5%的献血者红细胞悬液。

2.2.2 取标记清晰的洁净试管两支，分别加入Dominion Biologicals Limited生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）和英国Millipore生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）两滴。

2.2.3 再分别向两支试管中加入一滴3%～5%的献血者红细胞溶液。

2.2.4 充分混匀后，37℃孵育30分钟。

2.2.5 生理盐水洗涤红细胞三次。

2.2.6 末次洗涤后控干盐水。

2.2.7 向试管中加入两滴抗人球蛋白试剂，并充分混匀。

2.2.8 900～1000g离心15秒钟。

2.2.9 轻摇试管，轻轻重悬红细胞，肉眼观察试管底部是否出现凝集。出现凝集为阳性；无凝集加入IgG致敏的试剂红细胞观察结果是否有效，若IgG致敏的试剂红细胞凝集则结果有效为阴性。

2.2.10 试验结果

英国Millipore生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）出现肉眼可见凝集。Dominion Biologicals Limited生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）未出现凝集，加入IgG致敏的试剂红细胞后红细胞凝集

3 讨 论

根据以上结果，献血者的红细胞在盐水介质中与初筛试剂呈阴性反应，而用抗人球蛋白试验，与英国Millipore生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）呈阳性反应，与加拿大Dominion Biologicals Limited生产的抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（单克隆抗体）呈阴性反应，个人认为：

1、在对献血者血型检测中对RhD弱D型的确认非常重要，因为Rh弱D型虽然抗原性较弱，但它容易产生抗-D抗体，Rh阴性人接受Rh弱阳性输血后，至少20%要对D抗原发生致敏，在第二次体内接触此抗原会发生溶血反应，因此如果被检出献血者是Rh弱D型，应把它当做Rh阳性看待，不可以输给Rh阴性受血者，但是对于受血者怀疑为Rh弱D型，则可不必做RhD弱D型的确认试验，应看做Rh阴性，只可接受Rh阴性血液。

2、对于两种试剂检测结果哪个更趋向于正确没有做讨论，因为对于献血者的血来说，不能确定为Rh阴性的都当做RhD阳性来对待，对于受血者都当做RhD阴性来对待。

[1] 孙国栋,王小平.Rh血型系统弱D及部分D研究进展.临床输血与检验.2007,9(2):183-185

[2] 兰炯采,张德梅,张印则,等.再论Rh阴性患者的科学安全输血.中国输血杂志,2009,22(5):341-342

R446.5

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ISSN.2095-8242.2017.38.7453.01

本文编辑：王雨辰