重组猪α干扰素防治仔猪流行性腹泻病试验及临床应用

赵永旭，袁秀芳，姜 平，李 慧，王一成*

(1.南京农业大学 动物医学院，江苏 南京 210095； 2.浙江诺倍威生物技术有限公司，浙江 杭州 310018；3.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所，浙江 杭州 310021)

重组猪α干扰素防治仔猪流行性腹泻病试验及临床应用

赵永旭1,2，袁秀芳3，姜 平1，李 慧2，王一成3*

(1.南京农业大学 动物医学院，江苏 南京 210095； 2.浙江诺倍威生物技术有限公司，浙江 杭州 310018；3.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所，浙江 杭州 310021)

针对近年在我国再次出现的猪流行性腹泻，尤其是造成初生仔猪大批死亡的情况，本试验应用酵母表达的重组猪α-干扰素开展初生仔猪流行性腹泻病的临床防治试验。选择了3个发病猪场，以口服重组猪α-干扰素方式进行防治。结果表明，口服重组猪α-干扰素对初生仔猪流行性腹泻具有较好的防治作用，仔猪存活率可达50%～70%。同时进行腹腔或/和口服补液，仔猪存活率从53%提升到71%。同时对重组猪α-干扰素进行临床防治应用，取得了较好的效果。

重组猪α-干扰素； 猪流行性腹泻病； 仔猪存活率

2010年下半年以来，猪流行性腹泻病(porcine epidemic diarrhea，PED)又在我国出现新一轮的暴发流行。最早发生在广西，然后湖南、华北、华东、山东、河北等地普遍发病，呈现全国性大流行，造成哺乳仔猪的大量死亡。因此，养猪生产中迫切需要立即开展新生仔猪PED防治技术研究，尽快建立有效的防治技术，以解临床防控的燃眉之急。

早在1996年刘万均等[1]就已证明白细胞干扰素对同群未发病猪具有仔猪流行性腹泻病的预防作用，对病猪进行治疗能缩短病程，提高日增重，加快肠绒毛修复。张泉军等[2]用猪白细胞干扰素预防哺乳仔猪腹泻病和断乳仔猪腹泻病有效率分别为84.5%和96.3%；治疗哺乳仔猪腹泻病和断奶仔猪腹泻病的治愈率分别为95%和100%；在干扰素推广应用中，预防哺乳仔猪腹泻病和断奶仔猪腹泻病的有效率分别为88.4%和96.8%；治疗哺乳仔猪腹泻病和断奶仔猪腹泻病治愈率分别为95.8%和97.6%。本试验将酵母表达的重组猪α-干扰素试用于临床发病的新生仔猪流行性腹泻防治，取得了一定的防治效果。

1 材料与方法

1.1 材料

冻干的酵母表达的重组猪干扰素产品由浙江诺倍威生物技术有限公司试生产，每瓶5头份(15 mL/瓶，0.5 mg·mL-1)。

1.2 方法

1.2.1 重组猪α-干扰素对猪流行性腹泻治疗试验

选取3个发生仔猪流行性腹泻的猪场，口服重组猪α-干扰素3 mL·头-1(0.5 mg·mL-1)，每天2次，连用2～3 d，记录仔猪成活率。

1.2.2 重组猪α-干扰素对猪流行性腹泻临床应用防治试验

选取临床自然发生仔猪PED的规模养猪场，设3种方法对发病猪群进行防治试验。方案1：母猪产前10 d肌注2.5头份，产前3 d肌注2.5头份；仔猪1日龄肌注1头份，2日龄肌注1头份。方案2：母猪产前20 d肌注2.5头份，产前5 d肌注2.5头份。方案3：仔猪1日龄肌注1头份，2日龄肌注1头份。

固定专人饲养发病猪舍，立即隔离淘汰发病仔猪和母猪，做好猪舍温湿度控制，每天进行全舍消毒，猪舍门口设置雨鞋消毒桶，进出病猪舍均需严格消毒等。

2 结果与分析

2.1 对猪流行性腹泻治疗效果

2.1.1 试验猪场1

选择4窝初生仔猪，口服重组猪α-干扰素(0.5 mg·mL-1)3 mL·头-1，每天2次，连用2 d，统计存活率，结果见表1。平均存活率为51.3%，最高存活率为70.0%。

表1 重组猪α-干扰素腹泻治疗的效果

2.1.2 试验猪场2

选择产房一幢，产仔380头，出生后2～3 d出现典型严重腹泻。立即使用重组猪α-干扰素3 mL·头-1，(0.5 mg·mL-1)口服治疗，出现腹泻后同窝猪同治，每天2次，连用2～3 d。同时腹腔补液5%葡萄糖盐水+多维 10～20 mL·头-1，每天1～2次；口服体脱康(维生素+矿物盐)，2 mL·头-1，每天1～2次。

结果表明，重组猪α-干扰素停止使用后，产房中仍出现零星腹泻，完全停止腹泻的病程约10 d。至腹泻停止时存活270头，存活率71.1%。至4月5日(发病后16 d)存活235头，存活率61.2%。口服后病程缩短，病发减少，严重腹泻猪效果不佳。

2.1.3 试验猪场3

产房一幢，产仔441头，出生后2～3 d出现典型严重腹泻。立即使用重组猪α-干扰素(0.5 mg·mL-1)口服治疗，全幢仔猪同步治疗，3 mL·头-1，每天2次，连用2 d。除口服重组猪α-干扰素外，补液盐自由饮水，未做其他处理。

结果表明，至4月5日(病程7 d)存活233头，存活率52.8%，仍有部分腹泻。

2.2 对猪流行性腹泻临床应用效果

2.2.1 方案1

母猪产前10 d和3 d各注射重组猪α-干扰素，同时仔猪1日龄和2日龄注射重组猪α-干扰素的防治结果见表2。

表2 方案1的防治结果

注：猪场1同时执行淘汰、隔离、控温、消毒等综防措施，猪场2主要发生于14日龄仔猪，猪场3母猪产前40天免疫T-P二联苗。

通过对3家猪场利用重组猪α-干扰素治疗猪流行性腹泻，都获得良好的效果，说明产前10 d和产前3 d注射重组猪α-干扰素，仔猪出生后1日龄和2日龄注射重组猪α-干扰素治疗方案可行，有效率达90%以上，但总体防治成本较高。

2.2.2 方案2

母猪产前20 d和产前5 d注射重组猪α-干扰素防治的结果见表3。

表3 方案2的防治结果

注：猪场1母猪产前40 d免疫T-P二联苗，猪场2主要用于预防。

通过以上2家猪场利用重组猪α-干扰素对母猪进行抗病毒保健，结果表明重组猪α-干扰素对抑制母猪排毒效果明显，但病毒仍持续存在，如未能做到持续产前保健，流行性腹泻仍会发生。

2.2.3 方案3

仔猪出生后1日龄和2日龄注射重组猪α-干扰素的防治结果如表4。

表4 方案3的防治结果

注：猪场1在2013年以来一直做初生仔猪保健(1头份)，猪场2主要用于病猪治疗。

以上2个猪场试用结果表明，猪α-干扰素用于预防仔猪发病有较好的预期结果，但用于治疗发病仔猪效果不理想。

3 讨论

近年来，在重组猪α-干扰素及其抗病毒研究上取得了显著的成就。Albina等[3]、Yao等[4]、Chinsangaram等[5]分别报道了重组猪α-干扰素可以抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)等多种病毒的复制。华中农业大学姚清侠[6]用腺病毒表达系统对猪α-干扰素进行了表达，体外试验表明真核表达系统表达的重组猪α-干扰素能有效抑制PRRSV的增殖，但腺病毒表达量低，成本高。福建农林大学崔敏[7]在毕赤酵母中表达了重组猪α-干扰素，并对其体外抗伪狂犬病毒的活性进行了研究，达到1.817×106IU·L-1；江南大学徐俊[8]通过多变量在线监控技术实现了重组猪α-干扰素在毕赤酵母中的高效表达，抗水疱性口炎病毒活性达到1×106IU·mL-1。可见真核表达重组猪α-干扰素的抗病毒活性较高。重组猪α-干扰素有着广泛的抗病毒作用，具有良好的市场前景。

本试验结果表明，口服重组猪α-干扰素对初生仔猪流行性腹泻具有较好的防治作用，仔猪存活率可达50%～70%。比未处理病猪提高20～40个百分点(资料未显示)。从试验猪场1的试验结果可见，不同窝仔猪间重组猪α-干扰素的防治效果差异较大，存活率从37.5%至70.0%不等，可能与初生仔猪感染的严重程度不同有关。比较试验猪场2与试验猪场3的结果可见，在使用重组猪α-干扰素进行防治的同时，进行腹腔或/和口服补液可起到良好的辅助治疗作用，仔猪存活率从53%提升到71%。所以，在用重组猪α-干扰素防治初生仔猪流行性腹泻时，应注意同时做好综合防控措施，加强清洁卫生，强化消毒，尤其是必须做好保温和补液工作。

本试验临床应用结果表明，重组猪α-干扰素用于预防PEDV效果好于发病治疗，母猪和仔猪联用效果好于母猪或仔猪单用。严重发病时用于病仔猪治疗效果不佳，可能原因是仔猪发生严重PED时，肠道损伤较严重，大量腹泻引起机体脱水和酸中毒，仅用重组猪α-干扰素不能缓解脱水和酸中毒症状。

[1] 刘万钧，胡景韶，张道永，等. 用猪白细胞干扰素防治猪流行性腹泻[J]. 中国兽医科技，1996，26(2)：27-28.

[2] 张泉军，邓绍基. 猪白细胞干扰素防治仔猪腹泻效果观察[J]. 畜禽业，2005(3)：52-53.

[3] ALBINA E, CARRAT C, CHARLEY B, et al. Interferon-alpha response to swine arterivirus (PoAV), the porcine reproductive and respiratory syndrome virus [J]. Journal of Interferon & Cytokine Research: the Official Journal of the International Society for Interferon & Cytokine Research, 1998, 18(7)：485-490.

[4] YAO Q, QIAN P, CAO Y, et al. Synergistic inhibition of pseudorabies virus replication by porcine alpha/beta interferon and gamma interferoninvitro[J]. European Cytokine Network, 2007, 18(2)：71-77.

[5] CHINSANGARAM J, KOSTER M, GRUBMAN M J. Inhibition of L-deleted foot-and-mouth disease virus replication by alpha/beta interferon involves double-stranded RNA-dependent protein kinase [J]. Journal of Virology, 2001, 75(12)：5498-5503.

[6] 姚清侠.猪α干扰素、猪β干扰素与猪γ干扰素的抗病毒活性及其免疫佐剂的研究[D]. 武汉：华中农业大学，2007.

[7] 崔敏.猪α干扰素基因在毕赤酵母中的表达与活性检测[D]. 福州：福建农林大学，2008.

[8] 徐俊. 多变量在线监控实现猪α干扰素在毕赤酵母中高效表达[D]. 无锡：江南大学，2009.

(责任编辑：卢福庄)

2016-10-17

浙江省重大科技专项重点农业项目(2012C12009-1)；杭州市农业科研主动设计项目(20162012A07)

赵永旭(1982—)，男，硕士研究生，从事传染病预防与免疫研究工作，E-mail：386532053@qq.com。

王一成，E-mail：95711@sina.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170233

S855.3

B

0528-9017(2017)02-0291-03

文献著录格式：赵永旭，袁秀芳，姜平，等. 重组猪α干扰素防治仔猪流行性腹泻病试验及临床应用[J].浙江农业科学，2017，58(2)：291-293.