甲状腺癌颈淋巴结转移诊断中D2—40免疫组化检测和彩超的价值

王勇炫

[摘要]目的探讨甲状腺癌颈淋巴结转移诊断中D2-40免疫组化检测和彩超的诊断效果。方法选取2013年1月～2016年1月广东省佛山市第二人民医院收治的40例甲状腺癌患者设为A组，40甲状腺腺瘤患者设为B组，40例甲状腺组织正常者设为对照组。所有患者均进行D2-40免疫组化检测和彩超诊断，对比三组患者诊断效果。结果手术病理检查，40例甲状腺癌患者颈淋巴结转移率为100.0%。超声诊断准确率、灵敏度、特异性与术前触诊相比明显较高（P<0.05）。A组患者颈淋巴结密度与B组、对照组相比明显较高（P<0.05）。结论临床上彩超诊断甲状腺癌颈淋巴结转移诊断准确率高，甲状腺癌患者D2-40免疫组化染色检测时患者颈淋巴结密度明显高于甲状腺良性病变患者，临床可采取D2-40免疫组化染色辅助诊断甲状腺癌颈淋巴结转移诊断，提高诊断效果。

[关键词]甲状腺癌；颈淋巴结转移；D2-40免疫组化检测；彩超；诊断

甲状腺癌是发生于甲状腺的恶性肿瘤，其在女性中发病率较高。由于甲状腺癌分型较多，许多患者发病较为隐袭，常导致临床诊治不及时，影响患者治疗效果。因此，加强对患者的早期诊断，及时对患者进行针对性诊治，控制疾病扩展，是保证患者生命安全的基础。甲状腺癌患者常出现颈淋巴结转移状况，且常表现为淋巴结肿大症状，而甲状腺良性肿块患者淋巴结肿大发生率较低，临床常通过触诊辅助甲状腺癌诊断。但采取触诊时常出现误诊和漏诊状况。D2-40属于一种单克隆抗体，可识别特定糖蛋白，其只存在于人体淋巴管内皮中。此次研究中探讨D2-40免疫组化检测和彩超诊断的效果，以期提高甲状腺癌的临床诊断效果，对患者进行及时有效的治疗，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2013年1月～2016年1月广东省佛山市第二人民医院收治的40例甲状腺癌患者设为A组，患者符合《甲状腺疾病的诊断与治疗》中关于甲状腺癌的相关诊断标准，均经手术病理检查确诊；患者未进行进一步颈淋巴结清除手术；无化疗和放疗史。选取同时期收治的40甲状腺腺瘤患者设为B组，将同时期收治的40例甲状腺组织正常者设为对照组。所有患者重要器官均无严重损害；所有患者均无严重精神性疾病，能自主表达意愿。A组患者中男女比为23：17；年龄19～74岁，平均（41.6±6.2）岁；B组患者中男女比为22：18；年龄20～74岁，平均（42.1±6.5）岁；对照组患者中男女比为21：19；患者19～75岁，平均（42.4±6.3）岁。A组、B组、对照组患者的一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

所有患者均采取触诊、彩超检查，使用多普勒超声诊断仪（GE公司LOJIQ-P3型）对患者进行术前检查，频率7.5～12MHz，对患者上中下颈、气管部位对患者颈淋巴结部位进行观测。对患者进行手术，清除患者颈部淋巴结，并对患者转移淋巴结获取部位进行标识，统计转移淋巴结数量、分布状况。取患者转移淋巴结标本，使用4%甲醛溶液（湖南尔康制药股份有限公司，H43020198）进行固定，随后完成脱水，使用石蜡包埋，行切片，厚度4μm，将切片组织进行免疫组化染色后，使用显微镜观测患者标记试验淋巴管状况。使用SP试剂盒、鼠抗人D2-40单克隆抗体、DBA显色试剂盒完成染色和显色过程，所有试剂和材料均由北京中杉金桥生物有限公司生产。阳性标本使用已知D2-40阳性乳腺浸润性导管癌标本，阴性标本使用PBS代替抗体。

1.3观察指标

统计病理检查、彩超和颈部触诊对A组患者转移淋巴结诊断状况，对比患者彩超诊断和颈部触诊的诊断效果。对比A组患者不同部位淋巴结转移状况。对比三组患者D2-40免疫组化检测的效果，对比三组患者标记淋巴管数目。以Weider标准作为计数标准，首先使用40低倍镜对患者肿瘤状况、周边组织等进行观测，确定患者淋巴管密度较高的部位，使用200高倍镜再次进行观测，统计患者标记淋巴管数目。计数过程中若出现与周边组织分开的棕色内皮细胞，也计为一个标记颈淋巴管。对比三组患者颈淋巴结密度状况：选取5个部位进行颈淋巴管计数，取平均值。

1.4统计学方法

用统计学软件SPSS19.0对本次研究所统计数据进行分析，数据资料的表述形式如下：正态计量资料→均值±标准差；正态计数资料→例数（率）；检验方法如下：正态计量资料→t检验；正态计数资料→x²检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1超声诊断和病理诊断A组患者淋巴结转移状况

采用超声诊断时，图像显示淋巴结表现为肿大状况；淋巴结髓质状况不明显，皮质状况较多；淋巴结内部回声强，部分患者表现为钙化灶；存在淋巴结转移的，血液流速快。

手术病理检查，40例甲状腺癌患者中40例患者均存在颈淋巴结转移，颈淋巴结转移率为100.0%。经彩超诊断，38例患者存在颈淋巴结转移，诊断符合率为95.0%；术前采取颈部触诊，确定31例患者存在颈淋巴结转移，诊断符合率为77.6%，采取超声诊断准确率与术前触诊相比明显较高，差异有统计学意义（x²=5.165，P<0.05）。

病理诊断出转移性淋巴结43枚，非转移性淋巴结33枚，超声诊断转移淋巴结44枚（病理确诊42枚），非转移性淋巴结32枚（病理确诊31枚），超声诊断灵敏度为97.7%（42/43），特异性为93.9%（31/33）。触诊转移淋巴结42枚（病理确诊34枚），非转移性淋巴结34枚（病理确诊25枚），超声诊断灵敏度为79.1%（34/43），特异性为75.8%（25/33）。采取超声诊断的灵敏度、特异性与触诊相比明显较高，差异有统计学意义（x²=7.242、4.243，P<0.05）。

采用彩超诊断甲状腺癌患者时，38例存在颈淋巴结转移患者中，27例患者颈淋巴结转移累及2个或以上区域，占71.1%，累及一个区域患者11例，占28.9%。采用彩超诊断甲状腺癌颈淋巴结转移时，中颈转移检出率与上、下颈、气管旁相比均明显较高，差异有统计学意义（x²=5.846、4.828、12.258，P<0.05）。见表1。

2.2D2-40免疫组化检测效果

A组患者颈淋巴结密度与B组、对照组相比明显较高，差异有统计学意义（t=19.021、24.066，P<0.05）。B组患者颈淋巴结密度与对照组相比明显较高，差异有统计学意义（t=9.454，P<0.05）。见表2。

3讨论

甲状腺癌是临床常见甲状腺恶性肿瘤。甲状腺癌是临床常见疾病，导致甲状腺病变的因素较多，缺碘、放射线、相关激素慢性刺激、生甲状腺肿物质刺激、家族遗传、甲状腺疾病等均是引起甲状腺癌的重要影响因素。甲状腺癌患者常出现甲状腺肿块，增长明显，部分患者会出现呼吸困难症状，由于甲状腺癌患者临床表现不具备特异性，使得临床早期诊断效果不佳，影响患者治疗效果。甲状腺癌患者颈淋巴结转移是临床常见症状，其多发生在未分化癌，部分患者甲状腺整块状况不明显。因此，发现患者颈淋巴结转移状况，也是临床早期辅助诊断甲状腺癌的重要检测方法。甲状腺癌患者晚期可出现声音嘶哑、呼吸困难、吞咽困难、交感神经压迫、颈丛疼痛等，治疗不及时将导致患者死亡，严重威胁患者生命安全。

以往诊断甲状腺癌常采取颈部触诊来诊断，但采取颈部触诊时，对于存在淋巴结肿大患者判定为阳性，若无肿大患者则判定为阴性。因此采取颈部触诊时，对于不同患者诊断效果不同，易受患者体型状况、淋巴结转移部位、淋巴结大小等的影响；且医生临床诊断经验也是影响诊断效果的重要影响条件。因此，采取触诊对患者转移性淋巴结和非转移性淋巴结状况判断效果不佳，易出现漏诊和误诊状况。随着当前医疗技术的发展，彩超技术在临床上的运用也越来越广泛。在姜东升的相关研究中，对50例甲状腺癌患者进行检测，其中彩超诊断的符合率为93%，采取门诊触诊的诊断准确率为85%，采取彩超诊断的符合率与触诊相比明显较高，此次研究结果与之相符，进一步肯定了彩超对甲状腺癌患者的诊断效果。且采取彩超诊断时，患者甲状腺相关部位图像显现清晰，能直接观测到患者淋巴肿大状况，且显现患者淋巴结内部状况，出现淋巴结转移患者淋巴结内部回声较强，部分患者可显现微小钙化状况。临床可根据患者影像学显现状况及血流状况辅助判定甲状腺癌，提高诊断效果，因此采取超声诊断时，能有效减少漏诊和误诊状况，提高诊断灵敏度和特异性。

D2-40属于单克隆抗体，属于抗M2A癌胚膜抗体，其可识别相对分子质量为40000的糖蛋白，而该糖蛋白主要存在于淋巴管内皮。D2-40免疫组化检测时，主要利用D2-40多在肿瘤外周淋巴管上皮中表达，在肿瘤内部间质淋巴管中较少，主要因为肿瘤组织中压力较大，能抑制肿瘤中淋巴管的生长；肿瘤细胞增生扩散、静水压等相关微环境等均是影响淋巴管生成的重要因素，因此甲状腺病变状况将会影响D2-40分布。且当前相关研究结果显示，肿瘤内淋巴管属于无功淋巴管，而肿瘤转移依靠有功淋巴管，有功淋巴管主要存在于外周血管，因此可根据D2-40分布状况判定患者淋巴结转移状况。此次研究中甲状腺癌组患者颈淋巴结密度与甲状腺腺瘤组、对照组相比明显较高，该研究结果与上述理论相符，进一步说明随着患者甲状腺病变程度增加，患者颈淋巴结密度将会逐渐升高，说明颈淋巴结密度可作为临床诊断颈淋巴结患者转移的重要诊断指标。

综上所述，临床上彩超诊断甲状腺癌颈淋巴结转移诊断准确率高，可将其作为临床诊断甲状腺癌淋巴结转移的重要诊断方法。甲状腺癌患者D2-40免疫组化染色检测时患者颈淋巴结密度明显高于甲状腺良性病变患者，对于彩超无法诊断患者，临床可将采取D2-40免疫组化染色辅助诊断，以提高诊断效果。