脂肪酶测定试剂盒技术审评要点概述

杨笑鹤寇艳芹 董沁芳 叶朝付 甄辉 浙江省医疗器械审评中心 （浙江 杭州 310012）

脂肪酶测定试剂盒技术审评要点概述

杨笑鹤＊寇艳芹 董沁芳 叶朝付 甄辉 浙江省医疗器械审评中心 （浙江 杭州 310012）

脂肪酶是急性胰腺炎诊断的重要参考指标，目前脂肪酶测定试剂盒尚无国家标准及行业标准发布。文章从产品说明书、产品技术要求、临床评价等方面对该试剂盒在技术审评中的要点进行简要概述，旨在帮助注册申报人更好地把握产品的技术要点，有效指导注册申报工作。

体外诊断试剂 脂肪酶 技术审评要点

Abstract: Lipase is an important reference indicatiors of risk stratifying acute pancreatitis. Currently there is no national standard existed, no industry standard is published. A research is carried out focused on in the product technical requirements, the brochures, the clinical evaluationl and other aspects in this paper. We hope it will help the manufacturer grasp of the key points of the product and help the registration application effectively.

Key words: in vitro diagnostic reagents, lipase, evaluation guidance

急性胰腺炎具有起病迅急、病情凶险，病死率高的特点，所以早期及时而正确的诊断显得尤为重要。与传统的急性胰腺炎诊断指标淀粉酶相比，血清脂肪酶升高时间早、幅度大、持续时间长，具有更好的敏感性和特异性，为急性胰腺炎的辅助诊断的提供参考依据。脂肪酶测定试剂盒生产企业数量众多，水平稂莠不齐，目前没有国家标准、相关行业标准以及指导原则发布。该产品是浙江省医疗器械审评中心2016年体外诊断试剂软课题研究项目的选定品种，结合省内已审批上市的该产品的审评经验，对技术审评中的要点进行概述，旨在帮助申请人准备及撰写脂肪酶测定试剂盒注册申报资料，同时也为该类产品的技术审评过程提供一定的参考。

1.适用范围

该技术审评要点分析适用于管理类别为Ⅱ类的、基于分光光度法原理进行体外定量测定脂肪酶活性的试剂盒。

2.产品技术要求

建议参照临床应用需求、已上市同类产品、分析性能评估结果、GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》等合理制定产品的性能指标，产品的性能指标应能被注册检验报告佐证。应根据《医疗器械产品技术要求编写指导原则》等要求，进行相关内容的编写。下面就一些关键性能指标进行简要说明。

2.1 外观

建议明确试剂的性状、颜色、浊度、是否有沉淀、颗粒或絮状物等具体信息。

2.2 试剂空白

参照GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》的检测方法，用企业指定的空白样品测试脂肪酶测定试剂盒，空白吸光度以及空白吸光度变化率的检测结果，应在生产企业规定范围之内。

2.3 分析灵敏度

用脂肪酶测定试剂盒测试生产企业指定活性的样本时，在测试主波长下，吸光度差值或吸光度变化率应不超过给定值。

2.4 线性范围

用超出线性范围上限的高活性样品和接近线性范围下限的低活性样品，混合成至少5个浓度。用脂肪酶测定试剂盒对每个浓度样本平行测定3次，计算出平均值。以稀释浓度为自变量，以测定结果平均值为因变量求出线性回归方程，将各稀释浓度带入回归方程，计算出理论值，测定结果平均值与理论值之差为线性偏差，线性偏差的绝对值除以理论值为线性相对偏差。线性相关系数应大于等于0.990；线性偏差应在生产企业给定范围之内，如需分段表述，应结合临床意义及参考区间等资料，合理设置线性分段点。

2.5 批内精密度

建议选择试剂盒检测范围内且具有一定临床意义的两个血清样本或质控样本进行测试，检测结果应不超过生产企业给定值。通常选用医学决定水平附近的样品和病理值样品进行验证。

2.6 准确度

参照GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》，准确度的检测包括：相对偏差、方法学比对、回收试验等方法，建议企业基于现实条件，采取合理可行的方法进行准确度的研究。如果企业采用质控物质进行相对偏差分析，建议采用正常值质控和病理值质控分别测定，测定值应在企业规定的范围内。

3.产品说明书

产品说明书包含[预期用途][样本要求][检验方法][注意事项]等重要条款，对产品的正确使用、保障患者及操作者等的安全性具有非常重要的意义。产品说明书应当符合《医疗器械说明书和标签管理规定》、《体外诊断试剂说明书编写指导原则》等要求。下面对说明书中的部分条款进行简要说明。

3.1 产品名称

参照YYT1227-2014《临床化学体外诊断试剂（盒）命名》，产品名称至少包括三个部分（被测物、用途、方法或原理），应正确书写被测物的中文名称，用途部分应描述为“测定试剂（盒）”，方法或原理部分应以具有区分性的反应底物/产物/酶来命名。例如：脂肪酶测定试剂盒（甲基试卤灵底物法）。

3.2 包装规格

注明可测试的样本数或装量，如××测试/盒、××mL，除国际通用计量单位外，其余内容均应采用中文进行表述。如有货号，可增加货号信息。

3.3 预期用途

第一段明确脂肪酶测定试剂盒的预期用途，如用于体外定量测定人血清和血浆中的脂肪酶活性。适用的样本类型应结合临床研究情况进行确认。第二段明确与脂肪酶活性测定相关的临床适应症以及临床背景情况，如脂肪酶升高常见于急性胰腺炎；酗酒、慢性胰腺炎、肝胆疾患等血清脂肪酶可有不同程度升高。建议强调用于对急性胰腺炎的辅助诊断，不能作为早期识别或确诊的依据。

3.4 储存条件及有效期

注明未开封试剂的效期稳定性、开封后在生化分析仪的上的待机稳定性以及复溶稳定性（冻干粉）等信息，包括光线、温度、湿度等影响稳定性的储存条件。如试剂盒各组分的稳定性不一致，则应对各组分的储存条件和有效期分别进行描述。应明确具体储存条件，不建议使用“常温保存”、“尽快用完”等模糊表述。标注生产日期、使用期限或失效日期。

3.5 用仪器

应说明可适用的仪器的名称及型号，不能泛指某一系列仪器，以便用户能够正确选择使用。

3.6 样本要求

重点明确以下内容：①适用的样本类型，如血清、肝素抗凝血浆。②建议明确內源、外源干扰物质的影响，如溶血、脂血、黄疸、抗凝剂、药物等对测试结果的影响。③明确样本的储存条件及有效期以及冷冻保存样本的冻融次数。④应标明冷冻、冷藏样本在测试前是否要平衡到室温。

3.7 检验方法

明确检测条件、校准程序以及质控程序等试验流程的具体操作步骤。

3.8 参考区间

企业可以自己建立参考区间，也可以引用参考文献；如果引用文献资料，应提供对应的参考区间验证或评估资料。建议注明“建议各实验室建立自己的参考区间”。

3.9 检验结果的解释

明确需进行确认试验的具体情况以及可能的影响因素。对于超出线性范围的高活性样本，如果可以按照一定比例稀释后再进行检测，应根据研究资料明确最大可稀释倍数、稀释方法和稀释液类型等信息。

3.10 检验方法的局限性

对可能出现的局限性进行相关说明。例如：本试剂盒的测定结果仅供临床参考，不应作为临床诊断的唯一判据；高脂血、溶血标本影响测定结果等。

3.11 产品性能指标

说明该产品主要性能指标，建议明确产品技术要求中除稳定性、装量以外的所有指标要求，并与产品技术要求保持一致。

3.12 注意事项

应注明必要的注意事项：如胆固醇、甘油三酯等的测定试剂会影响脂肪酶测定结果；如果试剂瓶中有气泡，有可能干扰仪器对剩余试剂量的正确判断，导致试剂吸取量不足，影响检测结果；检测时需注意交叉污染；使用不同生产商的试剂对同一份样本进行检测可能会存在差异等。

4.临床评价资料

脂肪酶测定试剂盒的临床试验应符合《体外诊断试剂注册管理办法》以及《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》等要求，同时临床试验方案、报告及附件（如产品说明书、研究者简历）等资料的格式应符合国家食品药品监督管理总局发布的《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（2014年第44号）的有关规定。下面对临床试验的要点进行简单分析。

4.1 研究方法

脂肪酶测定试剂盒有同类产品上市的产品，企业应对产品上市情况、预期用途、样本类型、试剂性能等因素进行综合考虑，合理选择比对试剂。建议企业尽量选择线性范围覆盖待评价试剂、重要性能指标不低于待评价试剂的已上市的同方法学产品作为比对试剂。

4.2 临床试验机构的选择

脂肪酶测定试剂盒为第二类体外诊断试剂，至少应选择两家临床试验机构。申请人应根据该类产品特点、预期用途、临床试验机构的资质及能力等因素合理选择临床试验机构。

4.3 临床试验病例的选择

第二类产品一般要求临床试验的总样本数至少为200例，且应满足统计学要求，各临床机构的样本量应相对均衡分布。应选择涵盖产品预期用途、干扰因素的样本进行临床试验，且样本浓度应尽量覆盖待评价试剂的线性范围。样本的原始资料应包括唯一且可追溯的编号，确保临床试验用样本具有可追溯性。当血清样本和血浆样本同时适用于待评价试剂时，其中一个样本类型至少完成200例的临床研究，另一样本可进行同源样本的比对研究。

4.4 统计学分析

采用方法学比对进行临床研究，常用的统计学方法是通过对待评价试剂与比对试剂的测试结果的线性程度以及相关性进行分析，对相关系数、线性回归方程的斜率、截距等指标进行评价，证明申报试剂与参比试剂无统计学差异。

4.5 结果差异样本的验证

对于待评价试剂与比对试剂检测结果不符的样本，应采用第三方试剂或其他方法进行复检，进而对结果进行统计分析。如果无需进行复检，则应详细说明理由。

5.结语

脂肪酶测定试剂盒技术审评要点分析，有利于技术审评人员对该产品技术要点的掌握，提高审评质量和效率。为企业产品注册工作提供参考，有助于在安全有效前提下加快产品上市。

[1] 国家食品药品监督管理总局.《体外诊断试剂注册管理办法》(国家食品药品监督管理总局令 第5号)[Z].2014(7).

[2] 国家食品药品监督管理总局.《关于发布体外诊断试剂临床试验技术指导原则的通告》,(国家食品药品监督管理总局2014年 第16号)[Z].2014(9).

[3] 国家食品药品监督管理总局.《关于发布医疗器械产品技术要求编写指导原则的通告》,(国家食品药品监督管理总局通告2014年第9号)[Z].2014(5).

[4] 国家食品药品监督管理总局.《关于发布体外诊断试剂说明书编写指导原则的通告》,(国家食品药品监督管理总局通告2014年第17号)[Z].2014(9).

[5] 国家食品药品监督管理总局.《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》,(国家食品药品监督管理总局2014年第44号)[Z].2014(9).

[6] 国家质量监督检验检疫总局.GB/T 26124-2011 《临床化学体外诊断试剂(盒)》[S].2011.

[7] 国家质量监督检验检疫总局.GB/T 21415—2008 《体外诊断医疗器械 生物样品中量的测量 校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》[S].2008.

Overview of the Evaluation Points of the Lipase Assay Kit

YANG Xiao-he＊KOU Yan-qin DONG Qin-fang YE Chao-fu ZHEN Hui Medical Device Evaluation Center of Zhejiang Province (Zhejiang Hangzhou 310012)

1006-6586(2017)15-0033-03

R197.39

A

2017-04-25

杨笑鹤，通讯作者，博士，高级工程师，研究方向：医疗器械。

浙江省科技厅重点软科学研究项目（项目名称：体外诊断试剂的分析性能评估与其安全有效性研究，项目编号：2016C25045）。