高效液相色谱法测定马来酸多潘立酮片的含量

易路遥 熊蔚#

（1江西省药品检验检测研究院 南昌 330029；2江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心 南昌 330029）

●中西药苑●

高效液相色谱法测定马来酸多潘立酮片的含量

易路遥1,2熊蔚1,2#

（1江西省药品检验检测研究院 南昌 330029；2江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心 南昌 330029）

目的：建立了高效液相色谱法测定马来酸多潘立酮片含量的方法。方法：使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，流动相为甲醇-0.5%乙酸铵（55﹕45），检测波长为285 nm，流速1 ml/min，柱温30℃。结果：马来酸多潘立酮在0.129 4～5.176 μg呈良好线性关系，相关系数r2为0.999 99；加标回收率98.21%～101.73%。结论：本法准确、可靠，可用于马来酸多潘立酮片的质量控制。

马来酸多潘立酮片；含量测定；高效液相色谱法

马来酸多潘立酮化学名为5-氯-1-[1-[3-(2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-1-基)丙基]-4-哌啶基]-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮马来酸盐。马来酸多潘立酮片是外周多巴胺受体拮抗剂，可促进上胃肠道的蠕动和张力恢复正常，促进胃排空，增强胃窦和十二指肠运动，协调幽门的收缩，同时也能增强食道的蠕动和食道下端括约肌的张力。笔者承担了中国食品药品检定研究院委托的该品种标准转正工作，借标准转正之机，对含量测定的方法进一步提高。马来酸多潘立酮片有国家食品药品监督管理局标准（试行）YBH24812005标准。美国药典、日本药局方和欧洲药典均未收载马来酸多潘立酮片等其它剂型，英国药典和欧洲药典收载多潘立酮和马来酸多潘立酮原料，其中英国药典（2013年版）收载了多潘立酮片（以马来酸多潘立酮为原料）的质量标准，YBH24812005标准针对马来酸多潘立酮片的含量测定是紫外-可见分光光度对照品法，而英国药典采用高效液相色谱法。考虑到紫外光谱法的专属性不如HPLC，实验中也发现该药品的含量测定受到溶剂以及辅料等若干因素影响，故本文参考《中华人民共和国药典》[1]“高效液相色谱法”及英国药典2013年版附录[2]建立了马来酸多潘立酮片含量测定的高效液相色谱法。该方法简单快速、准确可靠、专属性。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂LC2010高效液相色谱仪（日本岛津公司），AE163电子天平（瑞士Mettler公司），BP211D电子天平（德国satorius公司）。马来酸多潘立酮对照品（中检院，批号100697-200401），马来酸多潘立酮片（南京长奥制药有限公司，批号100706、100607、081202、100404、100307），甲醇为色谱纯，盐酸、乙酸铵试剂均为分析纯，水为自制高纯水。

1.2 色谱条件色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.5%乙酸铵（55∶45）为流动相；检测波长为285 nm；流速1 ml/min；柱温30℃。理论板数按多潘立酮峰计算不低于3 000。

1.3 试验方法供试品溶液：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于多潘立酮10 mg），置100 ml量瓶中，加0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）超声15 min使溶解，冷却，加0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液；对照品溶液：取105℃干燥至恒重的马来酸多潘立酮对照品约12.72 mg，置100 ml量瓶中，加0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）超声溶解，冷却，加0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）稀释至刻度，作为对照品溶液。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法以峰面积计算，即得。

2 结果与讨论

2.1 线性试验精密称取马来酸多潘立酮对照品12.94 mg，置100 ml瓶中，加0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）溶解并稀释至刻度，摇匀，分别量取1、2、5、10、20、40 μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以进样量（μg）为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为：Y=1 667 740X-40 470，相关系数r2=0.999 99。同时，对照品溶液和供试品溶液的测定色谱图分别见图1和图2。

图1 对照品溶液图谱

图2 供试品溶液图谱

2.2 精密度试验取[线性试验]考察项下的马来酸多潘立酮对照品溶液，连续进样6次，结果RSD（%）为0.06%，精密度试验结果良好。

2.3 重现性试验取样品（批号100706），按试验方法中供试品溶液配制，平行配制5份，分别进样，测定，结果5份供试品测定结果平均标示含量为100.8%，RSD（%）为0.1%，试样方法重现性良好。

2.4 稳定性试验取样品（批号100706），按试验方法中供试品溶液配制，分别在0、2、4、6、8、10、12 h进样，7个时间点的测定结果RSD（%）为0.11%，试验方法所得供试品溶液在12 h内均较稳定。

2.5 回收率试验取已知含量的样品（批号100706）9份，分别加入不同量的对照品溶液，按试验方法中供试品溶液配制，进样，测定结果见表1。

表1 回收率试验结果

2.6 讨论

2.6.1 检测波长的选择考察了马来酸多潘立酮对照品在三种溶液项下的紫外最大吸收值：取马来酸多潘立酮对照品适量分别用甲醇、甲醇-0.5%乙酸铵（30∶70）、甲醇-0.5%乙酸铵（55∶45）三种溶液溶解，在200～400 nm处扫描，结果表现均在285 nm处有最大吸收。

2.6.2 流动相的选择英国药典与国内原料标准均采用甲醇-0.5%乙酸铵流动相系统，在此基础上调整流动相比例，以取得合适的保留时间、对称因子、理论板数，分别考察了马来酸多潘立酮样品在二种流动相下的峰形情况：流动相一：0→10 min，甲醇∶0.5%乙酸铵=（30∶70）→（100∶0）；10→12 min，保持甲醇100%。流动相二：甲醇∶0.5%乙酸铵=（55∶45）。在保证保留时间一致的情况下，主要以峰面积、对称因子、理论塔板数为考察指标，结果表明甲醇-0.5%乙酸铵（55∶45）峰形较好，保留时间合适，选用了甲醇-0.5%乙酸铵（55∶45）为流动相。

2.6.3 样品提取溶剂的选择分别考察了三种提取溶剂在相同的超声提取情况下的提取效果，取研细后本品约0.1 g，精密称定，分别加入纯甲醇、甲醇-0.5%乙酸铵（55∶45）、0.002 mol/L和盐酸∶甲醇（1∶1）三种溶剂，结果见图3。根据图中结果可见，三种溶剂效果基本一致，由于标准中含量均匀度拟修订采用同样的方法，而该薄膜衣片在纯甲醇中难以崩解，故选择英国药典0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）做为提取溶剂。

图3 不同溶剂的提取效果

2.6.4 两种方法测定结果比较高效液相法：按试验方法中供试品溶液配制。紫外光谱法：供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于多潘立酮50 mg），置100 ml量瓶中，加40 ml甲醇，超声处理10 min，再振摇10 min使马来酸多潘立酮溶解，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，用0.45 μm滤膜滤过，取续滤液2 ml置50 ml量瓶中，用0.1 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得。对照品溶液的制备：取105℃干燥至恒重的马来酸多潘立酮对照品约12.72 mg，精密称定，置100 ml量瓶中，加0.1 mol/L盐酸适量，超声溶解，冷却，加0.1 mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml，置25 ml量瓶中，加0.1 mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，即得。测定法：取上述对照品溶液与供试品溶液，照分光光度法（中国药典二部附录ⅣA），在284 nm波长处分别测定吸收度，计算，即得。两种方法试验测定结果见表2。拟建立的高效液相新方法与原紫外光谱方法结果无显著性差异。

表2 两种含量测定方法试验结果

3 结论

本文建立了高效液相色谱法测定马来酸多潘立酮片含量的方法，该方法采用甲醇-0.5%乙酸铵（55∶45）作为流动相，0.002 mol/L盐酸∶甲醇（1∶1）超声提取来酸多潘立酮，经十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱分离，在检测波长为285 nm条件下测定，其线性范围、相关系数、方法精密度、稳定性、重现性及回收率等指标均符合分析检测的要求，并且操作方便，结果准确可靠，与原紫外测定方法测定结果无明显差异，且专属性及先进性均优于原方法，适用性更广，是标准提高改进的理想方法。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(四部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015.512

[2]British Pharmacopoeia Commission.英国药典[S].British:TSO(The Stationery Office),2013.附录ⅢB,ⅧL

High Performance Liquid Chromatography Method for Determining the Content of Domperidone Maleate Tablets

YI Lu-yao1,2,Xiong Wei1,2#

(1Jiangxi Institute of Drug Control,Nanchang330029;2Jiangxi Drug and Medical Devices Quality Engineering Center,Nanchang330029)

Objective:To establish a method to determinate the content of domperidone maleate tablets by high performance liquid chromatography(HPLC).Methods:Using C18 column,the mobile phase was methanol-0.5%ammonium acetate(55:45),the detection wavelength was 285 nm,the flow rate was 1.0 ml/min,the temperature of column was set at 30℃.Results:Domperidone maleate in 0.129 4～5.176 μg showed a good linear relationship,the correlation coefficient r2was 0.999 99,the rate of recovery was 98.21%～101.73%of standard addition.Conclusion:This method is accurate and reliable,can be used for the quality control of domperidone maleate tablets.

Domperidone maleate tablets;Determination of content;HPLC

R927.2

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2016.10.044

2016-09-16）

#通讯作者：熊蔚，E-mail：1513476937@qq.com