中风通腑泄热颗粒的质量标准研究

2016-12-22 05:06赵建军方春雪娄婷婷
长春中医药大学学报 2016年6期
关键词:通腑枳实薄层

董 晗,赵建军,何 蕊,方春雪,娄婷婷,位 鸿*

(1.吉林大学第一医院老年病科,长春 130021;2.长春中医药大学附属医院,长春 130021)



·方药研究·

中风通腑泄热颗粒的质量标准研究

董 晗1,赵建军2,何 蕊2,方春雪2,娄婷婷2,位 鸿2*

(1.吉林大学第一医院老年病科,长春 130021;2.长春中医药大学附属医院,长春 130021)

目的 建立中风通腑泄热颗粒的质量评价方法。方法 采用薄层色谱法(TLC)对厚朴、大黄、枳实进行定性鉴别,以厚朴酚与和厚朴酚作为指标成分,采用高效液相色谱法(HPLC)对样品进行含量测定。结果 薄层色谱鉴别特征斑点清晰,专属性强;厚朴酚进样量在0.101 2~1.012 0 μg范围内与峰面积线性关系良好,r=1.000 0,计算其平均回收率为97.39%,RSD为1.72%,和厚朴酚进样量在0.105 2~1.052 0 μg范围内与峰面积线性关系良好,r=1.000 0,计算其平均回收率为95.75%,RSD为2.60%。结论 本试验建立的定性及定量方法简单可行,重复性好,能有效地控制中风通腑泄热颗粒的质量。

中风通腑泄热颗粒;薄层色谱法;高效液相色谱法;质量标准

中风通腑泄热颗粒是由厚朴、大黄、枳实等多味中药制成,具有通腑泄热,软坚化痰之功。用于中风痰热腑实证,症见半身不遂,口舌歪斜,伴腹胀,便秘,头晕目眩,咯痰,舌质红,苔黄腻。本品厚朴为方中主药,主要含有酚类成分,以厚朴酚、和厚朴酚为主,约占原药材的5%~12%。厚朴中的酚类成分药效作用确切,且性质稳定,常作为药材及制剂的含量测定指标。为了有效控制本制剂的质量,建立了薄层色谱法(TLC)对厚朴、大黄、枳实进行定性鉴别,HPLC法同时对中风通腑泄热颗粒中厚朴酚与和厚朴酚的定量测定方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 高效液相色谱仪日本岛津LC-2010A,紫外检测器,CLASS-VP色谱数据工作站,色谱柱:Inertsil ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)。日本岛津LC-2010高效液相色谱仪,自动进样系统,紫外检测器,超声波清洗机(天鹏电子新技术有限公司),DIF-6050型真空干燥箱(上海一恒实验仪器厂),数码照相机(索尼公司,型号DSC-RX100),硅胶G板(青岛海洋化工有限公司)。

1.2 试药 厚朴酚对照品(批号:111707-201209,供含量测定用,规格:20 mg,购于中国药品生物制品检定所)、和厚朴酚对照品(批号:111707-201206,供含量测定用,规格:20 mg,购于中国药品生物制品检定所),供含量测定用。甲醇为色谱纯,水为超纯水;其他试剂均为分析纯(北京化工厂)。

2 薄层色谱鉴别

2.1 对照品溶液制备[1]取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品,加甲醇制成每1 mL各含0.1 mg的混合溶液,作为对照品溶液1。取大黄酸对照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液2。取辛弗林对照品,加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作为对照品溶液3。

2.2 供试品溶液制备 取批号为20130401、20130402、20130403样品各5.0 g,依次编号为样品1、样品2、样品3,研细,加甲醇20 mL,密塞,振摇30 min,滤过,取滤液作为供试品溶液1[2-3]。

取批号为20130401、20130402、20130403样品各2.0 g,依次编号为样品1、样品2、样品3,加甲醇20 mL,浸泡1 h,滤过,取滤液5 mL,蒸干,残渣加水10 mL使溶解,再加盐酸1 mL,加热回流30 min,立即冷却,用乙醚分2次振摇提取,每次20 mL,合并乙醚液,蒸干,残渣加三氯甲烷1 mL使溶解,作为供试品溶液2[4-5]。

取批号为20130401、20130402、20130403样品各5.0 g,研成细粉,依次编号为样品1、样品2、样品3,加甲醇20 mL,超声处理20 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇0.5 mL使溶解,作为供试品溶液3[6-7]。

2.3 对照药材溶液制备[1]另取厚朴对照药材0.5 g,按照供试品溶液1的制备方法制成对照药材溶液1。另取大黄对照药材0.1 g,按照供试品溶液2的制备方法制成对照药材溶液2。另取枳实对照药材0.5 g,按照供试品溶液3的制备方法制成对照药材溶液3。

2.4 阴性对照液制备 按处方和制备工艺分别制备除去厚朴、大黄、枳实的阴性样品,按上述供试品溶液制备方法操作,分别得厚朴阴性对照溶液、大黄阴性对照溶液、枳实阴性对照溶液。

2.5 薄层色谱鉴别

2.5.1 厚朴 按照薄层色谱法实验,吸取上述4种溶液各 5 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-甲醇(17∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以1%香草醛硫酸溶液,在100 ℃加热至斑点显色清晰[1]。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性样品相应位置无干扰。

2.5.2 大黄 吸取上述4种溶液各4 μL,分别点于同一以羧甲基纤维素钠 为黏合剂的硅胶 H 薄层板上,以石油醚(30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365 nm)下检视[1]。层析结果:供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的橙黄色荧光主斑点,阴性样品相应位置无干扰。

2.5.3 枳实 吸取上述2种溶液各2 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以0.5%茚三酮乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰[1]。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性样品相应位置无干扰。

3 含量测定

本方法参考《中国药典》2010年版1部厚朴“含量测定”项下方法,以厚朴酚与和厚朴酚为检测指标,采用高效液相色谱法对供试品进行含量测定[8-10]。结果见表1。

表1 厚朴酚、和厚朴酚回收率试验结果

4 结论

本试验依照《中国药典》“厚朴”项下的方法,以厚朴酚与和厚朴酚为检测指标,采用TLC、HPLC对中风通腑泻热颗粒进行质量标准研究。

在TLC色谱中,中风通腑泻热颗粒与对照药材显示相同的斑点,检验呈阳性。

《中国药典》规定,按干燥品计算,含厚朴酚(C18H18O2)与和厚朴酚(C18H18O2)的总量不得少于2.0%。根据本品3批样品含量测定结果,厚朴酚及和厚朴酚总含量测定数据平均为5.009 mg/g,考虑实际生产中的损失,将上述结果下浮20%为4.008 mg/g,经测定3批中试样品的含量均大于4.008 mg/g,故暂定“本品每袋(15.0 g)含厚朴以含厚朴酚(C18H18O2)与和厚朴酚(C18H18O2)的总量计,不得少于60.00 mg/袋”。

以上结果表明,本方法科学准确,可以作为中风通腑泻热颗粒的质量控制标准。

[1]中华人民共和国药典委员会.中国药典[M].北京:中国医药出版社,2010:345.

[2]陈锦,倪立坚,何琳俐.胃得安胶囊的鉴别方法研究[J].海峡药学,2015,27(12):77-79.

[3]肖德华,谢谊,王实强,等.清咽利喉片的质量标准研究[J].湖南中医杂志,2014,30(11):160-162.

[4]赵瑜卿,桂双英.复方双金清胆胶囊的薄层鉴别和含量测定探讨[J].海峡药学,2016,28(3):74-76.

[5]陈勇军,黄云祥,王杏娥.茵黄利胆颗粒中大黄、茵陈的薄层色谱鉴别[J].中医学报,2014,11(11):1635-1636.

[6]刘振华,何丽果,徐艳霞.枳实消痞丸的薄层色谱鉴别[J].中国药业,2010,19(10):48.

[7]李琰,李云鹏,傅欣彤.香连止泻片质量标准研究[J].河北中医药学报,2012,27(1):42-43.

[8]王婧宁,王梦瑶,张振秋,等.HPLC法同时测定大黄,厚朴药对提取物中7个成分的含量[J].辽宁中医杂志,2014,41(4):763-766.

[9]林晓辉,张雪原,朱吉士,等.HPLC法测定脾约丸中厚朴酚与和厚朴酚的含量[J].今日药学,2015,25(2):114-116.

[10]刘传统,祁红.HPLC法测定益气养阴合剂中厚朴酚与和厚朴酚和延胡索乙素的含量[J].云南中医中药杂志,2015,36(1):59-61.

Quality standard of stroke Tongfu Xiere particles

DONG Han1,ZHAO Jianjun2,HE Rui2,FANG Chunxue2,LOU Tingting2,WEI Hong2*

(1.Department of Geriatrics,First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,China;2.The Affiliated Hospital to Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130021,China)

Objective To establish the quality evaluation of stroke Tongfu Xiere particles.Methods By TLC on Magnolia,rhubarb,citrus aurantium qualitative identification,using high performance liquid phase chromatography of samples were used to determine the content,Honokiol phenol and Honokiol phenol as an index component.Results TLC characteristics spots were clear,with strong specificity;Honokiol phenol in 0.101 2-1.012 0 μg range and peak area had good linear relation,r=1.000 0.The calculation of the average recovery rate was 97.39%,relative standard deviation was 1.72%.and Honokiol phenol in 0.105 2-1.052 0 μg range and peak area had good linear relation,r=1.000 0.The calculation of the average recovery rate was 95.75%,relative standard deviation was 2.60%.Conclusion In this study,a qualitative and quantitative method is simple and feasible,good repeatability,effectively control the quality of stroke Tongfu Xiere particles.

stroke Tongfu Xiere particles;TLC;HPLC;quality standard

10.13463/j.cnki.cczyy.2016.06.011

吉林省科技支撑计划项目“治疗中风病新药中风通腑泄热颗粒的临床前研究”(20130206069YY)。

董 晗(1986-),女,硕士研究生,医师,主要从事脑血管病、痴呆研究。

R248.2

A

2095-6258(2016)06-1132-04

辑:张海洋

2015-11-26)

*通信作者:位 鸿,男,主任药师,电话-13514412139,电子信箱-641538498@qq.com

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