NIH-Ⅲb型前列腺炎患者尿液前列腺小体外泄蛋白的测定及诊断评价

邵雪峰，李晓君，刘 锋，蒋 挺

(苏州大学附属太仓医院暨太仓市第一人民医院泌尿外科，江苏太仓 215400)



·临床研究·

NIH-Ⅲb型前列腺炎患者尿液前列腺小体外泄蛋白的测定及诊断评价

邵雪峰，李晓君，刘 锋，蒋 挺

(苏州大学附属太仓医院暨太仓市第一人民医院泌尿外科，江苏太仓 215400)

目的 通过检测尿液前列腺小体外泄蛋白(PSEP)来评估其作为慢性前列腺炎诊断标记物的临床价值。方法 收集NIH-Ⅲb型前列腺炎患者107例和健康对照96例的尿液标本，采用ELISA方法对收集的尿液样本进行PSEP的检测。比较前列腺炎组与对照组之间尿液PSEP水平的差异。采用受试者工作特征(ROC)曲线计算灵敏度、特异度并计算最大约登指数，得出最佳诊断界值。结果 两组尿液PSEP数据均呈非正态分布，前列腺炎组中位PSEP为1.133(0.371～3.580)ng/ mL，显著高于对照组0.193(0～0.734)ng/ mL(P<0.01)。对PSEP检测结果进行ROC曲线拟合，曲线下面积为0.755，诊断界值为1.237 ng/mL，敏感性为51.4%，特异性为88.5%。结论 尿液PSEP作为NIH-Ⅲb型前列腺炎的辅助诊断指标，其诊断效能中等，但具有较高的可操作性和较好的临床应用价值。

前列腺小体外泄蛋白(PSEP)；慢性前列腺炎；诊断；ELISA

慢性前列腺炎( chronic prostatitis，CP) 是泌尿外科成年男性最常见的疾病之一。1998 年美国国立卫生研究院将CP分为3 型：①NIH-Ⅱ型：慢性细菌性前列腺炎；②NIH-Ⅲ型：CP/慢性骨盆疼痛综合征，此型根据前列腺按摩液、精液中白细胞计数又分为炎症性(NIH-Ⅲa)和非炎症性(NIH-Ⅲb)两个亚型；③NIH-Ⅳ型：无症状炎症性前列腺炎[1]。CP的病因及发病机制复杂，其发病是各种因素引起的感染、免疫、内分泌、神经、精神因素等相互作用所导致的炎症过程[2]。NIH-Ⅱ型前列腺炎有明确致病因素。但NIH-Ⅲ型前列腺炎，尤其是Ⅲb型，诊断主观性较强，实验室检查方法有限[3]。本研究中，我们检测NIH-Ⅲb型患者尿液前列腺小体外泄蛋白(prostatic exosomal protein，PSEP)，并评估其作为诊断标记物的临床价值，报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 参照中国泌尿外科疾病诊断治疗指南(2014版)中CP临床诊断标准，采用两杯法，收集自2014年5月至2015年12月的江苏省太仓市第一人民医院就诊的NIH-Ⅲb型前列腺炎患者107例和健康对照96例的尿液标本，年龄18～60岁，两组年龄分布无显著差异。

排除标准：前列腺癌患者；急性前列腺炎患者；二周内置入导尿管者；48 h内有性生活者；有严重的肛肠部位疾病，不适合行前列腺按摩检测者。

1.2 样本检测 CP患者留取按摩前中段尿暂存于-80 ℃冰箱，并常规行尿常规、EPS镜检及培养，根据EPS结果保留NIH-Ⅲb型患者中段尿标本待检。对照组留取中段尿标本，此外行尿常规检测。采用ELISA方法对收集的尿液样本进行PSEP检测。 ELISA试剂盒购自昂科生物医学技术(苏州)有限公司。

1.3 评估PSEP 数据采用中位数(四分位距)表示。比较前列腺炎组与对照组之间尿液PSEP水平的差异。ROC曲线计算灵敏度，特异度并计算最大约登指数，得出Cutoff值。

1.4 统计学处理 数据分析采用SPSS20.0统计软件进行统计学处理。前列腺炎症患者与正常人的样本差异比较采用秩和检验。P<0．05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组数据比较 前列腺癌组与对照组中位年龄分别为30(25～38)岁及32(27～40)岁，年龄分布无显著性差异(P>0.05)。两组尿液PSEP数据均呈非正态分布。前列腺炎组中位PSEP为1.133(0.371～3.580)ng/mL，显著高于对照组[0.193(0～0.734)ng/mL,P<0.01]。见表1。

表1 前列腺炎组与对照组年龄及PSEP的比较

项目前列腺炎组对照组P值例数10796年龄[M(范畴),岁]30(25～38)32(27～40)>0.05PSEP[M(范畴),ng/mL]1.133(0.371～3.580)0.193(0～0.734)<0.01*

*Mannwhitney U检验。

2.2 ROC结果 对PSEP检测结果进行受试者工作特征(receiver operating，ROC)曲线拟合，结果见图1。ROC曲线下面积为0.755，选择Youden指数最大的点对应的界值作为NIH-Ⅲb型前列腺炎的诊断标准，得出Cutoff值为1.237 ng/ mL，对应的诊断敏感性为51.4%，特异性为88.5%。

图1 前列腺小体外泄蛋白的受试者工作特征曲线

3 讨 论

前列腺炎临床表现缺乏特异性，同时缺乏客观准确的诊断手段，临床的诊疗效果一直不理想[4]。在CP诊断标记物的研究方面，国内外已取得一定进展。神经生长因子(nerve growth factor，NGF)在神经功能中起着至关重要的作用，在神经损伤和神经性感染后，NGF都会迅速再生[5]。从UPOINT分型来看，神经功能紊乱是CP的一个危险因素。有相关报道表明，CP患者前列腺液中的NGF表达明显增高[6]，且与患者的主观症状呈正相关。自身免疫方面，前列腺组织在发生炎症时会产生特异性抗原，这些抗原会通过生理屏障和前列腺管进入血液中[7]。CP患者细胞因子水平中，白介素2(interleukin-2，IL-2 )、白介素10(interleukin-10,IL-10)及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα，TNF-α)明显升高[8]。NADLER[9]及国内学者吕玉宏等[10]分别通过对患者前列腺液及血清中白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平进行检测，发现在前列腺液及血清中，患者的IL-1β水平均增高。吕玉宏等[10]进一步发现治疗后患者血清中IL-1β表达下降。

然而上述这些标记物都需要通过前列腺按摩采集患者前列腺液进行检测，实际应用于临床诊断仍存在较大局限性：前列腺液临床取材不便，相当一部分患者无法取得前列腺液，同时前列腺按摩也存在一定痛苦。而尿液取材简便，在尿液中寻找到合适的前列腺炎诊断标记物可很好地化解这一难题。

前列腺小体(prostasomes)是一种亚细胞的囊泡状结构，具有广泛的生理功能，其直径40～500 nm，由人类前列腺上皮细胞通过胞吐作用分泌[11]，然后进入前列腺液及尿液[12]。前列腺小体的脂质成分以鞘磷脂为主，并含有一定量的核酸成分，如mRNA、miRNA、DNA小片段等。前列腺小体包含的蛋白质成分多达百余种：酶类(35%)，运输、结构类蛋白(19%)，GTP结合蛋白(14%)，分子伴侣(6%)，信号转导蛋白(17%)以及注释蛋白(9%)等[13]。前列腺增生、炎症、肿瘤等病理情况下，前列腺小体的分泌量以及蛋白组学特征可能产生变化，其中一些蛋白成分已成为前列腺癌的潜在诊断标记物[14]。研究显示，在炎症状态下，前列腺小体外泄蛋白明显升高，可达到诊断CP的目的[15]。

本研究中，NIH-Ⅲb型前列腺炎患者尿液中PSEP明显高于对照组。ROC曲线分析结果显示其曲线下面积为0.755，诊断效能中等。PSEP界值1.237 ng/mL所对应的检测敏感性为51.4%、特异性为88.5%。本研究中所纳入的病例数还有所欠缺，相信通过大样本的数据分析，可以得出PSEP的确切诊断界值以及敏感性和特异性。由于NIH-Ⅲb型前列腺炎症状不典型，盆腔疼痛综合征病因广泛，目前临床诊断CP往往需要大量辅助检查进行鉴别诊断，且仍有较高的误诊率。因此在临床应用中可适当提高PSEP诊断界值，来增加诊断特异性，这样可能会对NIH-Ⅲb型前列腺炎的确诊大有益处。

综上所述，尿液前列腺小体外泄蛋白可以作为NIH-Ⅲb型前列腺炎的临床辅助诊断指标，具有可操作性和较好的临床价值。前列腺小体外泄蛋白检测方法的应用，有可能弥补临床上诊断NIH-Ⅲb型前列腺炎主观性强、检测方法有一定痛苦等不足，可能为NIH-IIIb型前列腺的诊断提供一种新颖的简便易行、非侵入性、无痛的分子检测方法，具有较好的临床应用前景。

[1] 那彦群，叶章群，孙颖浩，等.中国泌尿外科疾病诊断治疗指南(2014版) [M]. 北京：人民卫生出版社，2013:437-438.

[2] PONTARIMA，RUGGIERIMR. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome [J].J Urol，2004，172(3):839-845.

[3] LOTTIF，CORONAG，MONDAININ，et al.Seminal，clinical ancolour-Doppler ultrasound correlations of prostatitis-like symptoms in males of infertile couples[J]. Andrology，2014，2(1):30-41.

[4] MAGRIV，WAGENLEHEHNERFM，MARRASE，et al.Influence of infection on the distribution patterns of NIH-Chronic Prostatitis Symptom Index scores in patients with chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome[J]. ExpTher Med，2013，6(2):503-508.

[5] PEZETS, MCMAHONS B.Neurotrophins:mediators and modulators of pain[J]. Annu Rev Neurosci, 2006,29:507-538.

[6] WATANABE T, INOUEM, SASAKIK, et al. Nerve growth factor level in the prostatic fluid of patients with chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome is correlated with symptom severity and response to treatment[J]. BJU Int, 2011,108(2):248-251.

[7] 范华, 甘肖余. 慢性前列腺炎122例治疗体会[J]. 广西医学, 2005,33(3):416-417.

[8] HEL, WANGY, LONGZ, et al.Clinical significance of IL-2, IL-10, and TNF-alpha in prostatic secretion of patients with chronic prostatitis[J]. Urology, 2010,75(3):654-657.

[9] NADLERR B, KOCHA E, CALHOUNE A, et al. IL-1beta and TNF-alpha in prostatic secretions are indicators in the evaluation of men with chronic prostatitis[J]. J Urol, 2000,164(1):214-218.

[10] 吕玉宏, 张再高, 李家承. 慢性前列腺炎患者治疗前后血清IL-8、IL-1β和TNF-α检测的临床意义[J]. 放射免疫学杂志, 2009(06):593-594.

[11] NICKELJC.Recommendations for the evaluation of patients with prostatis[J].World J Urol， 2003， 21(2):75-81.

[12] AALBERTSM, STOUTT A, STOORVOGELW.Prostasomes:Extracellular vesicles from the prostate.[J]. Reproduction, 2013, 147(1):R1-R14.

[13] RONQUISTG. Prostasomes are mediators of intercellular communication :from basic research to clinical implications[J]. J Intern Med, 2012, 271(4):400-413.

[14] BJARTELLA, MONTIRONIR, BERNEYDM, et al.Tumour markers in prostate cancer II:diagnostic and prognostic cellular biomarkers[J]. Acta Oncologica，2011;50 (Suppl 1) 76-84.

[15] 曾燕, 张娇, 陈艳华,等. 前列腺小体外泌蛋白ELISA检测方法的建立和初步评价[J]. 实用医药杂志, 2015, 32(10):885-888.

(编辑 何宏灵)

Detection and diagnostic evaluation of urine prostatic exosomal protein in patients with NIH-Ⅲb prostatitis

SHAO Xue-feng, LI Xiao-jun, LIU Feng, JIANG Ting

(Department of Urology, Taicang Hospital Affiliated to Suzhou University & the First People’s Hospital of Taicang, Taicang 215400, China)

Objective Urine prostatic exosomal protein (PSEP) was detected to evaluate its clinical potential as a diagnostic marker of chronic prostatitis (CP). Methods A total of 107 cases of NIH-IIIb prostatitis and 96 healthy controls were enrolled. Urine samples were collected for ELISA testing. PSEP levels were compared between the two groups. A ROC curve was drawn to calculate the sensitivity, specificity and optimum Youden index, so as to figure out the cut-off value of PSEP. Results The median PSEP of the prostatitis group was 1.133(0.371—3.580) ng/mL, which was higher than that of the control group[0.193 (0—0.734)ng/mL,P<0.01]. The area under the ROC curve was 0.755. The diagnostic cutoff value was 1.237 ng/mL, the sensitivity was 51.4%, and the specificity was 88.5%.Conclusion Urine PSEP as a diagnostic marker of NIH- IIIb prostatitis, shows a medium ability in the diagnosis of CP, but it has good operability and clinical value.

prostatic exosomal protein(PSEP); chronic prostatitis; diagnosis; enzyme linked immunosorbent assay

2016-06-21

2016-08-31

蒋挺，副主任医师.E-mail:tcyyurology@163.com

邵雪峰(1970-)，男(汉族)，主任医师，硕士.研究方向：前列腺疾病、泌尿系肿瘤.E-mail：sxfsxf703@163.com

R697.33

A

10.3969/j.issn.1009-8291.2016.11.011