岳鼎鼎,杨严鸥,万全,卜远富,姚峰,陈路
(安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036)
米粉蛋白替代商品膨化饲料对黄鳝肝脏抗氧化指标的影响
岳鼎鼎,杨严鸥,万全,卜远富,姚峰,陈路
(安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036)
以冰鲜鱼和膨化饲料2种原料各占1/2质量混合所得饲料作为对照组,再以米粉蛋白分别按25%、50%、75%和100%比例替代膨化饲料,研究了米粉蛋白的替代对黄鳝(Monopterusalbus)肝脏抗氧化能力的影响。结果显示,随着米粉蛋白替代比例上升,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量先上升后下降,总谷胱甘肽(T-GSH)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量先显著下降再上升,氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量各组无显著变化,而替代组维生素E含量均显著低于对照组(P<0.05)。结果表明,随着米粉蛋白的替代比例上升,黄鳝肝脏抗氧化能力显著下降,但当完全替代时,抗氧化能力又有所提高。
黄鳝(Monopterusalbus);米粉蛋白;替代;抗氧化
黄鳝(Monopterusalbus)是我国重要的淡水名优养殖鱼类,养殖中一般使用黄鳝专用膨化饲料与冰鲜鱼混合投喂。由于膨化饲料价格较高,一般会考虑使用其他饲料替代膨化饲料[1~3]。这种替代需要考虑替代量的问题,过多的替代会造成生长下降[4],同时也要考虑替代对鱼体抗氧化能力的影响,因为不适宜的替代会降低鱼体抗氧化能力,导致免疫力下降[5,6]。米粉蛋白是大米加工过程的副产品,具有抗原性低[7]、蛋白含量高[8]的特点,是一种优良的植物性蛋白。目前,有关探讨米粉蛋白在水产饲料中应用的研究尚无报道,而且主要是从生长和饲料利用的角度评定替代效果[4,9],对抗氧化能力影响的研究非常缺乏。因此,本研究采用米粉蛋白替代黄鳝商品饲料,探讨其对黄鳝肝脏主要抗氧化指标的影响,以期为黄鳝配合饲料的研究提供基础资料。
1.1 试验材料
试验鱼购自合肥市肥西县野生黄鳝收购站,挑选个体大小均匀、健康无伤者放入水族箱中暂养1周,暂养期间投喂对照组饲料。
1.2 试验设计
试验共分5个处理,每个处理4个重复。试验鱼在由20 个塑料水族箱(60cm×60cm×65cm)组成的循环水养鱼系统中进行饲养。养殖用水为曝气自来水,使用沸石和活性炭过滤净化水体,水深3~6cm,用真空泵提水;使用罗茨鼓风机通过连接有散气石的通风管间断性充氧。
设计鱼糜(鲜重)和膨化饲料含量各为50%的饲料作为对照组,在此基础上,用米蛋白粉分别替代对照组饲料中的膨化饲料的25%、50%、75%、100%,共5种试验饲料,饲料主要生化成分见表1。制作饲料时,将新鲜鳙鱼切块,用小型粉碎机搅成鱼糜,膨化饲料粉碎过筛,米粉蛋白过筛,再按比例将三者混合均匀并揉成团状,放入水族箱中。
表1 饲料主要生化成分 %
1.3 饲养管理
正式试验前24h停止投喂试验鱼,每个养殖箱随机放入30尾。养殖期间,每天18:30喂食1次(以半小时内吃完为准),持续30d。每天8:00和19:00各换水1次,水温为(24±1.5)℃。节能日光灯提供照明,光照时间8:00~20:00,瞬时开断。
1.4 样本采集
养殖试验结束后,饥饿黄鳝24h,再随机取10尾处死,取肝脏置于液氮罐中保存。
1.5 样品分析
超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)、总谷胱甘肽(T-GSH)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、维生素E(VE)含量均采用南京建成生物有限公司试剂盒测定,测定详细步骤请查阅试剂盒说明书。
1.6 数据统计与分析
试验数据以平均值±标准差表示,采用SPSS 19.0数据统计软件进行单因素方差分析(One-Way ANOVA),用Duncan’s多重比较组间差异,显著性表示P<0.05。
如表2所示,随着替代水平的增加,SOD、CAT活性和MDA含量先上升后下降,呈抛物线变化,并在50%替代水平时显著最高(P<0.05)。100%替代时,SOD活性与对照组无显著差异(P>0.05),CAT活性与MDA含量显著低于对照组(P<0.05)。
随着替代水平的增加,GSH-Px活性先上升后下降,呈抛物线变化,并在50%替代水平时显著最高(P<0.05)。T-GSH、GSH含量变化趋势与之相反,随替代水平的增加而先下降后上升,75%替代水平组显著最低(P<0.05),GSSG含量在各组间差异不显著(P>0.05),而各替代组的VE含量均显著低于对照组(P<0.05)。
表2 不同米粉蛋白替代水平下的黄鳝肝脏抗氧化指标
注:同行数据上标字母不同表示组间存在显著差异(P<0.05)。
据卜远富等[4]报道,米蛋白粉分别替代对照组饲料中的膨化饲料的25%、50%、75%、100%量时各组黄鳝无死亡现象,成活率无差异;黄鳝生长率分别为对照组的84.2%、59.4%、52.4%以及40.7%。可见随着替代水平的增加,生长速度明显下降。
SOD是生物体内一种重要的抗氧化酶,能够清除生物体内超氧阴离子自由基[10,11],而CAT能清除SOD在歧化超氧阴离子自由基(O2 -)过程中产生的过氧化氢(H2O2)[12]。本研究中,随着替代升高,肝脏中SOD和CAT活力呈抛物线变化,替代50%时显著高于对照组,然后逐渐下降,而用豆粕分别替代饲料30%、50%和70%的鱼粉时,黄颡鱼(Pelteobagrusfulvidraco)肝脏SOD、CAT活性均显著低于对照组[13],用1︰1的大豆蛋白和肉骨粉替代鱼粉时,虹鳟(Oncorhynchusmykiss)血液SOD、CAT的活性也是随着替代增加而显著下降[14],本研究变化趋势与上述研究不一致,这可能与替代方式不同有关。本研究中,替代只针对占饲料配比50%的膨化饲料,按计算对整个饲料替代比例相对较小,可能胁迫压力相对较小,在一定程度上会激发鱼体的SOD、CAT活性,但当替代比例加大,SOD和CAT开始下降,完全替代时CAT 显著低于对照组(P<0.05),这又与对黄颡鱼等的研究结果一致。
MDA是机体内过多的氧自由基攻击生物膜的多不饱和脂肪酸形成的脂质过氧化物[15]。本研究中,黄鳝肝脏的MDA含量随着替代比例增加显著升高,这与一般情况下胁迫加剧时鱼类MDA含量会升高[16]的研究结论相一致,但替代比例进一步升高(75%)时MDA开始下降,完全替代时则显著低于对照组。这可能与替代比例增大时生长速度过慢、代谢下降有关,具体原因还有待进一步研究。
GSH-Px具有清除脂类氢过氧化物和减轻有机氢过氧化物对机体的损伤的作用[17]。本研究中,GSH-Px活性随替代先上升后下降,这表明一定的胁迫可以激发鱼类GSH-Px活性升高[18],但胁迫加剧则导致GSH-Px活性下降。GSH是生物体内抗氧化防御系统中重要的小分子活性寡肽,具有抗氧化、清除氧自由基等作用[19],本研究中,GSH含量随替代比例增加而降低,这说明替代造成了抗氧化能力减弱。但在完全替代时又有上升趋势,这同样可能与黄鳝生长速度过慢有关。
VE是脂溶性抗氧化剂,在体内参与清除氧自由基终止脂肪过氧化反应[20]。本研究中,替代导致VE含量均显著下降,但各替代组VE含量无显著差异,即VE含量没有受到替代量的影响,其原因还有待进一步研究。
替代水平对不同抗氧化指标影响有差异,总体而言,随着替代量的增加,鱼体肝脏的抗氧化能力显著下降,但当完全替代时,鱼体抗氧化能力有所恢复,这可能与完全替代时鱼体生长过于缓慢有关。
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2016-08-08
安徽省科技富民强县专项行动计划资金项目(2069999)。
岳鼎鼎(1993-),男,硕士生,研究方向为水产动物营养与饲料。通信作者:杨严鸥,cdyyo@126.com。
S917;Q959.482
A
1673-1409(2016)27-0036-03
[引著格式]岳鼎鼎,杨严鸥,万全,等.米粉蛋白替代商品膨化饲料对黄鳝肝脏抗氧化指标的影响[J].长江大学学报(自科版),2016,13(27):36~38,50.