张晓华,杨严鸥,岳鼎鼎,王孝宇
(安徽农业大学动物科技学院,安徽 合肥 230036)
低蛋白饲料对异育银鲫肠道抗氧化指标的影响
张晓华,杨严鸥,岳鼎鼎,王孝宇
(安徽农业大学动物科技学院,安徽 合肥 230036)
以蛋白含量38%为对照组,设饲料蛋白水平分别为34%、30%与26%的3个试验组(4种饲料能量相等),分别饲养异育银鲫8周,探讨了低蛋白饲料对异育银鲫(Carassiusauratusgibelio)肠道抗氧化指标的影响。结果显示,超氧化物歧化酶(SOD)活性不受饲料蛋白水平的显著影响;随着蛋白水平的下降,总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶℃AT)活性以及抑制羟自由基能力(RAHFR)呈显著下降趋势,丙二醛含量(MDA)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性呈显著上升趋势上升,但34%试验组与对照组均无显著差异;谷胱甘肽(GSH)含量先升后降,在30%试验组显著低于对照组。结果表明,低蛋白饲料中,34%试验组各抗氧指标与对照组无显著差异,30%与26%试验组多数指标受到显著影响,抗氧化能力下降。
异育银鲫(Carassiusauratusgibelio);低蛋白;抗氧化;肠道
饲料质量差异对鱼类抗氧化指标有显著影响[1~3]。在养殖中有时会遇见以低蛋白饲料投喂鱼类的情况,而这类低蛋白饲料对鱼类抗氧化指标影响的研究相对缺乏;另一方面,饲料质量主要以对肝脏、血液等的影响研究较多[1,4,5],对肠道的研究较少[6],而肠道是鱼体重要的消化吸收器官,其抗氧化能力的变化会影响到鱼体消化吸收能力,因此有必要对此进行深入研究。本研究以异育银鲫(Carassiusauratusgibelio)为研究对象,研究了低蛋白水平对异育银鲫肠道抗氧化指标的影响,并探讨了低蛋白水平下鱼类肠道各抗氧化指标间的相互关系。
1.1 材料
试验鱼取自安徽省合肥市肥东县,运回后使用2%的食盐水进行消毒,暂养期间投喂对照组饲料,10d后开始试验。暂养与正式试验时均使用循环水养鱼系统,水族箱(60cm×60cm×65cm)水位50cm,盛水180L。试验鱼平均初始体重为(6.05±0.30)g。
4种等能饲料的蛋白水平分别为38%(对照组)、34%、30%以及26%,均为自制的硬颗粒饲料,直径2~3 mm,60℃烘干后置于4℃的冰柜中保存。试验饲料配方组成及营养水平详见表1。
1.2 方法
试验开始前,将鱼饥饿24 h,每箱放入试验鱼30尾,每种饲料4个重复,共16个水族箱。水温由空调及蓄水箱内的电热棒控制,维持(25±1)℃水平。光照时间8:00~20:00,节能日光灯提供。试验期间,水体溶氧>5.25mg/L,pH为7.08~7.30,氨氮<0.09mg/L。
试验持续8周,每天上午和下午各投过量饲料1次,1.5h后回收残饵,70℃烘干。残饵量用饲料溶失率校正。测定溶失率时随机在4个无鱼的箱中各放入1份已称重的饲料,1.5h后回收,70℃烘干至恒重并称重。
表1 试验饲料配方组成及营养水平
注:1) 维生素预混物(I.U./100g预混物)中维生素A 550、维生素D3100、维生素E 5、维生素K 1、胆碱55、尼氨酸10、核黄素2、吡哆醇2、硫胺素2、泛酸钙5、生物素0.01、叶酸0.5、维生素B122、抗坏血酸10、肌醇10;2)矿物盐预混物(g/100g预混物)中氯化钠1、硫酸镁15、磷酸二氢钠25、磷酸二氢钾32、磷酸二氢钙20、柠檬酸铁2.5、乳酸钙3.5、硫酸锌0.353、硫酸锰0.162、硫酸铜0.031、氯化钴0.001、碘酸钾0.003、纤维素0.45。
试验结束时将鱼饥饿1d,称量各缸鱼体重;每缸鱼取7尾,滤纸擦干,冰盘解剖取肠道,冰浴清洗后混合,-70℃保存。
超氧化物歧化酶SOD 活性、MDA含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX) 活性、谷胱甘肽(GSH)含量、过氧化氢酶℃AT)活性、抑制羟自由基能力(RAHFR)、总抗氧化能力(T-AOC)的测定按相关试剂盒说明进行,试剂盒为上海江莱生物科技有限公司产品。
1.3 数据处理
各试验数据采用平均数±标准差表示。方差分析后进行组间差异的多重比较(Duncan’s procedure)。统计软件为Statistica 5.0。主成分分析采用SPSS 17.0 软件。
由表2可见,SOD活性不受饲料蛋白水平的显著影响;随蛋白水平下降,T-AOC、CAT活性及RAHFR呈显著下降趋势,MDA含量、GSH-PX活性呈显著上升趋势,但34%试验组与对照组均无显著差异;GSH含量先升后降,在30%试验组显著低于对照组。
异育银鲫幼鱼蛋白质最佳需求为35.05%~38.0%[7~9],因此,本研究设计最高蛋白水平为38.0%。结果显示,低蛋白饲料中,34%试验组各抗氧指标与对照组无显著差异,30%与26%试验组多数指标受到显著影响,抗氧化能力下降。
表2 低蛋白饲料对异育银鲫肠道抗氧化指标的影响
注:同行数据上标字母不同表示组间存在显著差异(P<0.05)。
T-AOC代表体内酶类和非酶类抗氧化物的总体水平,其含量直接反映了组织抗氧化能力的高低[10]。过氧化氢酶CAT能将细胞内H2O2分解为H2O和O2,抑制羟自由基能力(RAHFA)间接反映机体羟自由基水平[11]。本研究中,这3项指标变化一致,均随着蛋白水平下降而显著下降,有很强的协同性;GSH-Px也可将细胞内H2O2分解为H2O和O2,降低羟自由基浓度[12],但其变化却与CAT相反,随蛋白水平降低而呈上升趋势;而超氧化物歧化酶(SOD)是催化氧自由基O2-生成H2O2消除超氧阴离子毒性的重要酶类,是重要的抗氧化酶类,但本研究中该指标未受到蛋白水平的显著影响,其变化趋势与总抗氧化能力变化趋势不一致,这反映出指标变化的复杂性。
丙二醛(MDA)是脂质过氧化物的最终分解产物之一,具有很强的生物毒性,其含量能直接反映机体脂质过氧化程度[13,14]。本研究中MDA含量偏高,这可能是由于肠道内含有较多的游离脂肪酸,同时肠道中抗氧化酶活性相对较低,不能充分消除所生成的过氧化物(ROS),导致MDA大量积累[2]。
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2016-08-15
安徽省科技富民强县专项行动计划资金项目(2069999)。
张晓华(1966-),女,副教授,硕士生,研究方向为水产养殖学。通信作者:杨严鸥,cdyyo@126.com。
S917;Q959.46+8
A
1673-1409(2016)27-0033-03
[引著格式]张晓华,杨严鸥,岳鼎鼎,等.低蛋白饲料对异育银鲫肠道抗氧化指标的影响[J].长江大学学报(自科版),2016,13(27):33~35.