魏榕,王旗,彭旺,李润成*
(1.湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;2.常州出入境检验检疫局,江苏 常州 213003)
一起大量哺乳仔猪腹腔感染的实验室检测与分析
魏榕1,王旗2,彭旺1,李润成1*
(1.湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;2.常州出入境检验检疫局,江苏 常州 213003)
本文就一小型规模大量哺乳仔猪出现腹腔感染的病例进行了临床调查、病理解剖以及细菌分离鉴定。结果从发病小猪腹腔液中分离到了大量大肠杆菌和链球菌。结合临床及解剖观察诊断小猪腹腔感染主要为不科学的腹腔注射操作所致,建议猪场采取针对性措施控制了发病情况。
生猪腹腔炎症是临床上比较常见的病变,可引起该问题的病原有链球菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌等。2015年8月浏阳一60头母猪的规模猪场,7日龄左右哺乳仔猪发生腹泻,为防止小猪脱水死亡,采用每天进行1次腹腔补液,3~5d后小猪腹泻情况逐步好转,但经过腹腔注射的小猪临床上除腹泻得到缓解外,精神、食欲情况反而变差,死亡率出现增加。本文就该病例进行了临床解剖、实验室检测,并根据检测结果指导猪场有效的控制了发病情况。现报道如下:
哺乳仔猪10日龄左右开始出现水样腹泻、消瘦。畜主采取腹腔注射补液盐以及庆大霉素、阿莫西林等抗生素药物,结果3~5d后小猪腹泻情况逐步好转,但经过腹腔注射的小猪临床上除腹泻得到缓解外,精神、食欲情况反而变差,死亡率出现增加。解剖3头发病小猪发现腹腔均存在肠浆膜弥漫性出血,肝脏、脾脏表面有黏连迹象。心脏、肺脏没有明显异常。
图1 临床发病小猪
图2 小猪的腹腔病变
2.1 细菌分离培养与革兰氏染色镜检在打开小猪腹腔后,用无菌棉签在腹腔内、肠浆膜表面搅动、粘取腹腔液以及无菌取小猪肺脏组织接种巧克力营养琼脂,37℃培养24h,结果肺脏接种培养基没有发现细菌生长,腹腔液棉拭子培养出了以2种形态为主的优势细菌。取2种形态的细菌涂片进行革兰氏染色镜检,结果发现1种为革兰氏阴性小杆菌(见图3),另外一种为短链状革兰氏阳性球菌(见图4)。根据细菌生长特性及显微镜检结果,分离的2种细菌疑似大肠杆菌和链球菌。
图3分离的革兰氏阴性杆菌
图4分离的革兰氏阳性球菌
2.2 分离菌的PCR鉴定取2种菌落形态的分离菌为模板,用大肠杆菌和链球菌检测引物进行PCR鉴定。引物资料见文献[1]、[2]。结果见图5、图6。由图可见,2对引物均扩增出了预期大小的条带。
图5 大肠杆菌PCR检测结果
图6 链球菌PCR检测结果
根据畜主反应情况、临床解剖观察以及实验室检测结果,建议猪场一方面做好接产消毒工作,尤其是断脐时的消毒工作并且停止对小猪进行腹腔注射;另一方面给腹泻以及发病小猪口服恩诺沙星,严重者结合肌肉注射头孢噻呋钠。结果7d后控制了疫病。
本文就哺乳仔猪腹腔注射后出现死亡增加的病例进行了临床、解剖观察以及实验室细菌检测,结果从发病仔猪腹腔液分离到大肠杆菌和链球菌,结合畜主反应在腹腔注射没有进行消毒工作,以及采取针对性措施后取得明显效果来看,该猪场小猪经过腹腔注射后出现腹腔感染,死亡增加,是由于不规范的腹腔注射操作,导致细菌感染所致。
由于仔猪腹膜面积大,密布血管和淋巴管,腹腔注射吸收快,且一次可较大量的快速注射,常用于腹泻小猪的补液,防止小猪因腹泻导致脱水死亡。但腹腔注射操作方法比较复杂需倒提仔猪进行保定、局部消毒后才能进行注射,且应防止注射时小猪过度挣扎,扎伤肠道或其他脏器,注射完毕后同样应进行注射部位消毒。此外、还应注意保持栏舍卫生定期进行消毒工作。否则容易出现腹腔感染。
取分离的2种细菌分别进行液体培养后等量混合,调整菌液浓度至0.5个麦氏单位。然后用纸片法进行药物敏感性检测。结果见表1。由表1可见,2种细菌均敏感的抗生素有头孢曲松、恩诺沙星、头孢噻肟。
表1 分离菌药物敏感性检测结果
[1]汤起武.猪场大肠杆菌耐药与用药相关性研究[D].湖南农业大学,2014.
[2]贺名叶.猪源链球菌的分离鉴定与SEZ保护性抗原蛋白的研究[D].湖南农业大学,2013.
10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.04.022
★通讯作者