重型颅脑损伤并发急性肾损伤患者NGAL和CysC水平变化及诊断价值

杨美平

河北平山县人民医院重症医学科 平山 050400



重型颅脑损伤并发急性肾损伤患者NGAL和CysC水平变化及诊断价值

杨美平

河北平山县人民医院重症医学科 平山 050400

目的 研究重型颅脑损伤并发急性肾损伤(AKI)患者中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)和血清胱抑素C(CysC)水平的变化及诊断意义。方法 选取我院76例重型颅脑损伤合并AKI患者，采用双夹心抗体ABC-ELISA法检测NGAL，免疫散射比浊法检测CysC，并与正常体检者进行比较，同时分析不同分期急性肾损伤患者及不同生存结局患者NGAL和CysC水平。结果 AKI患者NGAL、CysC水平均显著高于正常组，随分期上升均呈递增趋势，各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)；76例中死亡18例，存活58例，死亡患者NGAL、CysC水平分别为(1.52±0.51)μg/L、(2.96±0.92)mg/L，显著高于存活患者的(3.95±1.10)μg/L、(5.87±2.03)mg/L。结论 重型颅脑损伤患者NGAL和CysC表现为异常上升，且随AKI分期发生改变，可作为预后的预测因子。

NGAL；CysC；重型颅脑损伤；急性肾损伤

重型脑损伤为临床常见急危重症，致死率达30%～60%[1]，除颅内损伤本身伤情外，其并发急性肾损伤、全身感染或多器官功能障碍综合征等同为影响预后的危险因素。重型颅脑损伤合并AKI患者诊断难度较高，以往认为血清肌酐及尿量可靠性较高，但重型颅脑损伤患者受非肾性因素影响较大，如手术、药物等，因此，上述指标特异性降低，急需寻求更为准确的诊断指标[2]。近年发现的几种AKI生物标志物用于诊断急性肾损伤的效果已得到认可，主要包括CysC与NGAL，为研究两者在重型颅脑损伤合并AKI中诊断的可行性，本次研究对我院76例患者进行相关检验，现报告如下。

1 资料与方法

1．1 一般资料 选取我院2011-08—2014-11收治的76例重型颅脑损伤合AKI患者为研究对象，男43例，女33例，年龄24～61(52.16±7.58)岁。另选同期正常体检者30例为正常组，男19例，女11例，年龄23～58(53.13±7.42)岁；排除合并严重感染、乙肝相关肾炎、糖尿病肾病、狼疮性肾炎及肿瘤相关肾疾病者。2组性别、年龄等基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1．2 检测方法 空腹抽取肘静脉血5 mL，保存至真空采血管内，4 000 r/min离心2 min，分离上清，于-20 ℃保存待检。NGAL检测：双夹心抗体ABC-ELISA法检测，试剂由武汉博士德公司提供。洗涤液：将20 mL洗涤液与450 mL蒸馏水相溶，配制为470 mg洗涤液；显色液：显色液A、B于使用前15 min等量混合；校准液RD5-24：校准液原液20 mL加入蒸馏水80 mL，配制为100 mL稀释液：标准品配置：加入1 000 mL蒸馏水标准品浓缩液内，配制为100 ng/mL标准品原液，后准备7个EP管，第1个管中加入100 ng/mL 100 μL原液，后将900 μL RD5-24液体加入1管内并混匀，第2管内加入第1管500 μL液体，后将500 μL RD5-24液体于2管内，重复上述操作，后配置成为10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156 ng/mL的管标准品。检测过程：在室温下将试剂盒放置15～20 min，没孔加入100 μL样品稀释液RD5-24，第1孔为空白孔，2～8孔内加入标准品，剩余孔为尿液样品，每孔内加入50 μL，将板盖上，于2～8 ℃环境内反应2 h，完成后用洗涤液将每孔洗涤4次，后使其干燥，在每孔内加入200 μL NGAL抗体结合液，将盖子盖好后2～8 ℃反应2 h，后洗涤4次，每孔内加入200 μL显色液，注意在避光室内下进行，反应30 min，每孔内加入50 μL终止液，30 min内在450 mm波长的酶标仪内读取孔内OD值，将OD作为纵坐标，标准品为横坐标做曲线图，根据OD值找出浓度范围。CysC检测：采取Behring免疫散射比浊法检测，试剂购自北京嘉鸿生物科技有限公司，严格依照说明书进行。

2 结果

2．1 不同分期AKI患者NGAL和CysC水平比较 随着AKI分期NGAL、CysC均呈递增趋势，AKI患者两项水平显著低于正常值，且不同分期AKI患者组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同分期AKI患者NGAL和CysC水平比较

注：与Ⅰ期比较，①P<0.05；与Ⅱ期比较，②P<0.05；与Ⅲ期比较，③P<0.05

2．2 NGAL和CysC对AKI死亡事件发生的判断 76例患者中死亡18例，存活58例；死亡患者NGAL、CysC水平显著高于存活患者。见表2。

表2 NGAL和CysC对AKI死亡事件发生的判断

3 讨论

重型颅脑损伤合并AKI近年发病率明显上升，可进展为严重肾损伤，病死率高达40%，以往多采用血肌酐等指标进行检测，但敏感性较低，且非肾因素对其水平影响较大，易出现漏诊或误诊[3]，故寻找替代指标对患者病情回归及预后有重要的临床意义。

NGAL是脂质运载蛋白家族成员，分子量25 u，以共价键结合于中性粒细胞明胶酶，通常在肝脏、结肠、肾脏中表达，但表达水平极低，如机体发生炎症或上皮细胞受损时NGAL被诱导则表达升高，多高表达于肾小管，同时可诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞凋亡，可抑制炎性细胞对肾脏组织的损伤[4-5]。动物学研究显示，微阵列基因表达谱分析检测NGAL最为稳定和及时，且NGAL诊断AKL敏感度为90%，特异性则可达到99.5%[6-7]。患者发生重症颅脑损伤或急性肾损伤时，以ELISA法检测NGAL可在血液及尿液中获得较高水平表达[8]。

CysC为半胱氨酸蛋白酶抑制物家族成员，其水平通常较为恒定，受影响因素少，如年龄、性别、炎症等均对其无明显影响，因此特异性较高。CysC经肾小球滤过，而肾小球不分泌CysC，人体只有肾脏对循环中CysC进行清除[9]。众多研究显示，肾脏出现损伤后，CysC异常改变时间较血肌酐变化更早，提前1～2 d[10]，且随损伤程度加重不断增高。因此，CysC较血肌酐在短时间内对轻、中度肾损伤的诊断价值更高[11-12]。

本次研究中重型颅脑损伤合并AKI患者NGAL及CysC水平显著高于正常组，且Ⅲ期组明显高于Ⅰ期组、Ⅱ期组，死亡患者NGAL及CysC明显高于存活患者，表示NGAL及CysC可用于评估急性肾损伤病情程度，可作为死亡预测因子。

综上，NGAL和CysC诊断重型颅脑损伤合并AKI效果显著，具有较高的临床应用价值。

[1] 吴家玉，熊冠泽，丁福全，等．血清胱抑素C和尿NGAL联合检测在急性肾损伤病情评估及预后中的价值[J]．中山大学学报：医学科学版，2014，35(1)：152-155．

[2] 张石珠，杨敬伟，陈宪典，等．急性肾损伤患者血清胱抑素-C及尿NGAL水平的变化及其临床意义[J]．现代生物医学进展，2012，12(15)：2 943-2 945．

[3] 徐磊，徐晓萍，应春妹，等．NGAL在成人心脏术后急性肾损伤中的早期应用价值探讨[J]．检验医学，2014，17(2)：139-142．

[4] 陆任华，严玉澄，车妙琳，等．肾科医生会诊时的生物学标志物水平对预测急性肾损伤患者预后的价值[J]．中华肾脏病杂志，2013，29(3)：163-168．

[5] 李冰心，周小兵，杨林，等．白细胞介素18、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和血清胱抑素C在呼吸衰竭合并急性肾损伤中的变化[J]．临床肾脏病杂志，2014，14(3)：146-150．

[6] 刘亚红，苑丽华．尿沉渣联合尿KIM-1、NGAL在诊断原发性肾脏病合并急性肾小管间质病变中的意义[J]．国际泌尿系统杂志，2015，35(2)：176-179．

[7] 杨欣悦，钱传云．胱抑素C对急性肾损伤早期诊断价值及与临床预后的关系[J]．中国老年学杂志，2015，24(2)：391-393．

[8] 何敏，桑晓红，刘健，等．血清胱抑素C在多发性软组织挫伤患者急性肾损伤早期诊断中的应用[J]．肾脏病与透析肾移植杂志，2013，22(1)：10-14．

[9] 万志红，王建军，谢国明，等．血清胱抑素C对慢加急性肝衰竭患者肾损伤的早期诊断意义[J]．临床肝胆病杂志，2014，18(7)：666-669．

[10] 王久胜，李振彪．血肌酐、尿量及胱抑素C在病毒感染致儿童急性肾损伤中的诊断意义研究[J]．中国医师进修杂志，2013，36(22)：32-34．

[11] 贾洪艳，李家瑞．生物学标志物在脓毒症肾损伤中的诊断价值[J]．中华急诊医学杂志，2015，24(2)：151-154．

[12] 郭建中，李大连，程智广，等．冠状动脉旁路移植术后急性肾损伤患者尿液CysC和KIM-1的变化及临床意义[J]．临床和实验医学杂志，2014，19(17)：1 441-1 444．

(收稿2015-10-23)

R651.1+5

B

1673-5110(2016)19-0110-03