紫外分光光度法测定柚子中维生素C的含量

胡庆兰， 丰 蒙

(湖北第二师范学院 化学与生命科学学院， 武汉 430205)



紫外分光光度法测定柚子中维生素C的含量

胡庆兰， 丰 蒙

(湖北第二师范学院 化学与生命科学学院， 武汉 430205)

建立以pH=1的盐酸溶液为溶剂，用紫外分光光度法直接测定柚子中维生素C的含量的方法。维生素C在4—140μg/mL浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系，回归方程为：y=0.0253x+0.1450，R2=0.9974。加标回收率在94.9039%-96.3079%之间,RSD为1.85%。

柚子； 维生素C； 紫外分光光度法

维生素C又叫L-抗坏血酸，在日常生活中具有十分显著的作用，也是一种常见的水溶性维C。主要生理功能有：促进骨胶原的生物合成，促进氨基酸中络氨酸和色氨酸的代谢，利于组织创伤口的更快愈合，延长机体寿命；改善铁、钙和叶酸的利用；改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢，增强机体对外界环境的抗应激能力和免疫力，预防心血管疾病；防止牙床出血，促进牙齿和骨骼的生长。测定方法主要有2，6-二氯靛酚滴定法[1]碘量法[2]可见光分光光度法[3-5]紫外分光光度法[4-10]。测定维生素C的方法有很多，为了能够达到快速简便的检测柚子中维生素C的含量的目的，本次试验采用直接紫外分光光度法测定柚肉中维生素C的含量，效果显著，所得结果快速准确。

1 实验部分

1.1 实验仪器和试剂

仪器：分析天平(FA2004B电子天平，上海精密科学仪器有限公司)、TU-1810紫外分光光度计(北京普析仪器有限责任公司)、电热鼓风干燥箱(上海苏进仪器设备厂监制，南通沪南科学仪器有限公司制造)、台式离心机80-2(常州国华电器有限公司)

试剂：抗坏血酸、硫酸、氢氧化钠、浓盐酸和硝酸(以上均为分析纯)新鲜的柚子

1.2 实验原理

紫外分光光度法是在紫外光区(200-400nm)的特定波长处或者一定范围内的吸光度，对物质进行定性和定量分析。根据维生素C具有对紫外产生吸收和对碱的不稳定性特征，在pH=1的条件下，于236nm处测定样品液与碱处理液两者吸光度之差，根据标准曲线方程，计算得出样品中Vc的含量。

1.3 样品的处理

取柚肉20.00g于研钵中，加入10.00mL10%HCl,研磨成匀浆，然后放入离心管中，以8000r/s 离心10min，取上层清液，即为提取液。

1.4 最大吸收波长的测定

在200-400nm对溶液进行扫描，得出最大吸收波长为236nm

1.5 pH的选择

由于抗坏血酸易被空气氧化，而它在酸性条件下较稳定，因此，在此试验中，应在酸性环境下进行测量，在不同pH条件下，测量维生素C的吸光度，并由此选择最适宜的pH。本实验维生素C标准溶液及样品处理液最适宜的pH为1。

1.6 标准曲线的绘制

先取一定量的抗坏血酸标准溶液，用TU-1810紫外分光光度计以上述盐酸溶液为参比，在200nm-400nm范围内测绘Vc的吸收光谱，以确定其最大吸收波长。

分别用移液管取上述抗坏血酸标准溶液2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL于50mL容量瓶中，用上述盐酸溶液定容，备用。

标准曲线的绘制：

称取抗坏血酸100mg(精确到0.1mg)，用上述盐酸溶液溶解，小心转移到1L容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。此时抗坏血酸的浓度为100mg/L。吸取2.00mL、4.00mL、6.00mL、8.00mL、10.00mL抗坏血酸标准溶液于50mL容量瓶，并用上述盐酸溶液定容混匀备用。此时它们的溶液浓度分别为4mg/L、8mg/L、12mg/L、16mg/L、20mg/L。以盐酸溶液为参比溶液于波长为236nm处，测定标准系列抗坏血酸的吸光度。以吸光度值与抗坏血酸的浓度Cvc绘制标准曲线。

表1 标准曲线的测量

得出y=0.0253x+0.1450 R2=0.9974

1.7 样品吸光度的测定

取柚肉20.00g于研钵中，加入10.00mL1%HCl,研磨成匀浆，然后放入离心管中，以8000r/s 离心10min，取上层清液，配制成样品标准溶液100mL。平行实验三次，标记为1、2、3。测得结果取平均值，通过标准曲线 中的线性方程y=0.0253x+0.1450，以及计算中维生素C含量的计算公式计算获得柚子中维生素C的含量。

表2 样品吸光度的测定

1.8 加标回收率

为了保证分析结果的可靠性，了解试样中干扰物质的影响，应用本法对样品进行加标回收实验。

A组取1.00ml提取液，放入盛有4ml盐酸溶液(均为上述溶液配制中的盐酸溶液)的50ml容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀备用。

B组取1.00ml提取液，并加入盛有1.00ml标准抗坏血酸溶液，放入盛有4ml盐酸溶液的50ml容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀备用。

C组吸取1.00ml提取液，并加入4ml上述氢氧化钠溶液，混匀，15min左右(让样品中的维生素C与氢氧化钠充分反应)，加入4.00ml盐酸溶液，再用去离子水定容至刻度，摇匀备用。

以C组为空白对照，测定相应的吸光度值，并记录。

表3 加标回收率

2 结论

本实验采用直接紫外分光光度法在pH=1的条件下来测定柚子中维生素C的含量。线性方程为： y=0.0253x+0.1450，R2=0.9974。线性范围为：4-140μg/mL。

使用紫外分光光度法测定维生素C含量，方法简单，快速，结果较为准确，且不会因为样品本身颜色而导致影响实验结果。此次实验，所得结果较为低下，但用此种方法，仍然可以在较短时间内获取结果，说明紫外分光光度法不受限于较低含量的维生素C的测定。

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Determination of Vitamin C in Pomelo by Uv Spectrophotometry

HU Qing-lan, FENG Meng

(College of Chemistry and Life Sciences, Hubei University of Education, Wuhan 430205, China)

This paper attempts to establish a pH=1 hydrochloric solution as the solvent and draw direct determination of the content of vitamin C in pomelo by UV. Vitamin C in the 4-140μg / mL concentration range and absorbance was linear. And the regression equation is:y=0.0253x+0.1450, R2=0.9974.The detection limit is 0.12μg / mL, the recoveries in between94.9039%-96.3079%. The RSD is 1.8523%.

pomelo; Vitamin C; Uv spectrophotometry

2016-07-03

胡庆兰(1965-)女 ，高级工程师，研究方向为分析化学。

O65

A

1674-344X(2016)08-0005-03