白雪菇新菌株的培养特性研究

何焕清 肖自添 刘 明 潘新华



白雪菇新菌株的培养特性研究

何焕清1肖自添1刘 明1潘新华2

（1. 广东省农业科学院蔬菜研究所广东省蔬菜新技术研究重点实验室，广东广州 510640；2. 江西仙客来生物科技有限公司，江西九江332100）

通过对新分离的白雪菇（无毒肥脚环柄菇）菌株在不同环境和营养条件下的生长速率和长势等培养特性研究，探明了白雪菇菌丝生长的最适温度为30 ℃，培养基最适含水量为55%，pH为5，最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和黄豆粉、麸皮。

白雪菇；培养特性；温度；湿度；碳源；氮源

白雪菇（（Sow.:Fr.) Part.），学名无毒肥脚环柄菇，是新分离驯化栽培成功的一种食用菌（图1）。据中国科学院微生物研究所卯晓岚研究员对栽培成功的子实体的鉴定结果，其属伞菌目、蘑菇科、白鬼伞属。经毒理试验证明，该菌株无毒、可食用，为了与有关文献提及的肥脚环柄菇（有毒）[1]加以区别，命名为无毒肥脚环柄菇。本文对白雪菇菌株的适宜碳氮源和培养环境条件进行了研究，旨在为白雪菇人工栽培提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）供试菌株。白雪菇菌株由广东省农业科学院蔬菜研究所食用菌研究室保存并提供。

（2）PDA综合培养基。马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蛋白胨2 g，KH2PO43 g， MgSO41.5 g，维生素B115 mg，水1 L。

（3）碳源培养基。在基础培养基（KH2PO43 g，MgSO41.5 g，维生素B115 mg，琼脂20 g，硝酸铵1.15 g，水1 L）中分别加入0.72%的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉、果糖作为碳源培养基，以基础培养基为对照。

图1 白雪菇（无毒肥脚环柄菇）

（4）氮源培养基。在基础培养基中分别加入0.03%的牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麸皮、黄豆粉、硫酸铵、硝酸铵、氯化铵作为氮源培养基，以基础培养基为对照。

1.2 试验方法

（1）不同温度、酸碱度对菌丝生长的影响试验。用直径0.5 cm打孔器将经活化的菌种接到直径9 cm PDA综合培养基平板上。设10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃、28 ℃、30 ℃、35 ℃和38 ℃ 8个培养温度处理，每个处理设5个重复。接种后观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速率。

常规灭菌后分别用已灭菌的1.0 mol·L-1HCL 和1.0 mol/L NAOH调节培养基的pH至3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0和10.0，计14个梯度，然后制备平板培养基，每个处理设5个重复，接种后于30 ℃恒温生化培养箱中培养，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速率。

（2）不同湿度对菌丝生长的影响试验。培养基配方：棉籽壳88.5%，麸皮8%，石膏1.5%，石灰2%。培养基湿度（含水量）分别设45%、50%、55%、60%、65%、70%共6个处理。含水量（%）＝水分重量/（培养料干物质重量＋水分重量）×100。培养基充分混合后装入30×200 （mm）的试管中，每支试管折合干料10 g，每个处理设5个重复。接入直径为0.5 cm的菌种块，于30 ℃恒温生化培养箱中培养，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速率。

（3）不同碳源对菌丝生长的影响试验。试验按1.1（3）设计，采用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉、果糖6种碳源培养基，用直径0.5 cm打孔器将经活化的菌种接到直径9 cm平板培养基平板上，置于30 ℃恒温生化培养箱中培养，每处理设5个重复，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速率。

（4）不同氮源对菌丝生长的影响试验。试验按1.1（4）设计，采用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麸皮、黄豆粉、硫酸铵、硝酸铵、氯化铵8种氮源培养基，用直径0.5 cm打孔器将经活化的菌种接到直径9 cm平板培养基平板上，置于30 ℃恒温生化培养箱中培养，每处理设5个重复，观察菌丝生长情况，测量菌丝生长速率。

（5）采用Excel、DPS数据处理系统软件处理数据[5]。

2 结果与分析

2.1 不同温度下白雪菇菌丝的生长情况

白雪菇菌丝在15～38 ℃范围内均能生长（表1），其中15～30 ℃范围内，随温度上升，菌丝生长速度直线上升，长势趋好；30 ℃时达到最高值，高于30 ℃时菌丝开始受到抑制，生长减慢；38 ℃时菌丝长势和长速均急速下降；10 ℃时菌丝不能生长。综上表明，该菌株为耐高温菌株，适宜生长温度范围28～35 ℃，最适生长温度为30 ℃。

表1 不同温度下白雪菇菌丝的生长速度与长势

注：“+”越多，表示菌丝长势越好，以下各表同。

2.2 不同pH下白雪菇菌丝的生长情况

白雪菇菌丝在pH 3.5～9.0范围内均可生长（表2），其中pH 3.5～5.0范围内，随pH的上升，菌丝长速加快，长势趋好，pH 5时达到最高；此后，随着pH的上升，菌丝生长速度减慢，长势趋一致；pH 3时菌丝不能生长。表明该菌株喜好偏酸性，适宜pH范围为4.5～6.0，最适pH为5。

表2 不同pH培养基白雪菇菌丝生长速度与长势

2.3 不同湿度培养基白雪菇菌丝的生长情况

培养基含水量对菌丝生长速度有明显影响，在含水量45%～55%范围内，随着培养料含水量的升高，菌丝长速和长势均趋好，55%时达到最高；其后随着含水量的升高，菌丝长势和长速均降低。表明，培养料最适含水量为55%。

2.4 不同碳源培养基白雪菇菌丝的生长情况

白雪菇菌丝可以利用多种碳源，但不同碳源对菌丝生长的影响有显著差异（表4）。以淀粉为碳源的菌丝生长速度最快，显著高于其他处理；但菌丝长势较弱。其次是蔗糖和葡萄糖，以葡萄糖为碳源的菌丝长势最好。以果糖为碳源的菌丝生长速度和长势中等。对照中菌丝虽能生长，且长速与果糖无明显差异，甚至比以麦芽糖和乳糖为碳源的菌丝长速快，但长势最弱。以麦芽糖和乳糖为碳源菌丝长势较弱，长速较慢，其中乳糖的长速尤慢，显著或极显著低于其他处理。综上结果，葡萄糖是该菌株菌丝生长的最适碳源，蔗糖次之。

表3 不同培养料含水量的白雪菇菌丝的生长速度与长势

表4 不同碳源培养基白雪菇菌丝的生长速度与长势

2.5 不同氮源培养基白雪菇菌丝的生长情况

以蛋白胨为氮源的培养基菌丝生长速度最快，日均生长量达3.34 mm；其次为氯化铵，但两者的长势均较弱。以黄豆粉和麸皮为氮源，菌丝生长快且旺盛，其生长速度与蛋白胨、氯化铵没有显著差异。以硫酸铵、硝酸铵为氮源，菌丝长势和长速一致，表现均较弱、较慢。牛肉膏在所有添加氮源中长速最慢，酵母膏次之。对照虽然能生长，但菌丝非常弱，长速也最慢。综上结果，黄豆粉、麸皮等有机氮是培养该菌株较理想的氮源。

表5 不同氮源培养基白雪菇菌丝生长速度与长势

3 结 论

本试验表明，白雪菇属耐高温品种，适宜生长温度范围28～35 ℃，最适生长温度为30 ℃；喜酸性，最适pH为5；培养基含水量为55%时菌丝长势好、长速快。

白雪菇能利用多种碳源、氮源。以淀粉为碳源菌丝长速最快但长势较弱；而以葡萄糖为碳源的菌丝生长最好，为最佳碳源。以黄豆粉和麸皮为氮源菌丝长势最好，且生长速度较快，是理想的氮源。

白雪菇是最近分离驯化成功的一种新菌株，我们还对其开展了形态学观察、驯化栽培、营养分析，以及毒理等方面的研究，将另文逐一报道。

参考文献：

[1] 何介元. 肥脚环柄菇人工栽培初探[J]. 微生物学通报, 1996, 23(2): 67-69.

Research on the culture characteristics of

He Huanqing1Xiao Zitian1Liu Ming1Pan Xinhua2

（1.Vegetables Research Institute Guangdong Academy of Agriculture Sciences, Key laboratory of Guangdong Vegetables Newly Technology, Guangzhou, Guangdong 510640, China; 2.Jiang Xi Xian Ke Li Biotechnology Limited Company , Jiu Jiang, Jiang Xi 332100,China）

The culture conditions of the newly strain Baixue mushroom (), such as the growth rate and the growth vigor were studied , The optimal temperature ,moisture and pH for the mushroom growth are 30℃, 55%, and 5 respectively , the best carbon source for the mycelium growth is glucose, and the best nitrogen source are soybean flour, bran.

; culture characteristics; temperature; moisture; carbon source; nitrogen source

S646

A

2095-0934（2016）05-316-04

广东省科技厅农业攻关项目（2013B020406008）；广东省公益研究与能力建设项目（2015A020210076）

何焕清（1964—），男，研究员，从事食药用菌技术研究与推广；E-mail：hhq407@sina.com