全自动血型分析仪在血站血型检测中的应用

王梓　辽宁省沈阳市中心血站检验科　（沈阳　110000）

全自动血型分析仪在血站血型检测中的应用

王梓辽宁省沈阳市中心血站检验科（沈阳110000）

内容提要： 目的：探讨全自动血型仪在血站血型工作中的应用价值。方法：采用全自动血型仪对11298例献血者样本进行ABO、Rh（D）血型及盐水不规则抗体鉴定，并与手工法对比。结果：11298份样本全自动血型仪ABO一次定型准确率为99.9%（11287/11298），手工法ABO一次准确定型率为99.7%（11268/11298），两种方法比较差异有统计学意义（P＜0.05）；Rh（D）血型正确率均为100%；两种方法比较O细胞凝集阳性率：0.08%、0.009%，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：全自动血型仪鉴定结果准确可靠，能永久保存；其实验操作规范标准化，降低了人为错误发生，并且更易于检出不规则抗体，适于血站大批量血型检测。

全自动血型仪ABO血型Rh（D）盐水不规则抗体

血型是血站检测最重要的环节之一，血型鉴定的准确与否直接关系到受血者的生命安全。本血站多年来一直采用纸片法鉴定ABO正反定型，检测流程是由体采科检验人员在采血前做正定型，检验科标本接收人员留取血袋样本做正反定型，最后检验科血型岗人员做血管样本的ABO及Rh（D）血型鉴定。虽然三次血型检测大大降低了血型鉴定的错误率，但由于检测过程人为操作且结果由人肉眼判断，故人为因素不可避免地影响了最终鉴定结果。故本血站于2013年开始采用全自动血型仪进行血型检测，并与传统手工法平行试验比对。

1.材料与方法

1.1样本来源

本站于2014年3月采集的11298份日常无偿献血者样本。样本用EDTA-K2抗凝。

1.2仪器与试剂

Hemotype全自动血型分析仪（意大利GSG公司）；平板振荡器（Heidolph公司）；一次性96孔U形板（北京汉泰旭和公司）；单克隆抗A抗B血型定型试剂（北京金豪）；人ABO反定型红细胞试剂（北京金豪）；抗D（IgM+IgG）血型定型试剂（Dominion Biologcials Limited）；现代血站管理软件检验模块（唐山现代）；TECAN RSP 200全自动加样仪（瑞士TECAN公司）。

1.3方法

1.3.1ABO血型鉴定纸片法见《全国临床检验操作规程》［1］；Rh（D）鉴定采用RSP加样仪及96孔 U形板检测。对于可疑、正反不符、O细胞凝集、Rh（D）阴性样本送血型室用血型血清学方法确认，方法参见文献［2］。

1.3.2全自动血型仪将红细胞悬液30ul（在预稀释微板孔内加0.9%生理盐水200ul，再加入6ul红细胞混匀）和血浆30ul各3孔分配至96孔U形板内，然后分别加入单克隆抗-A、抗-B血型试剂30ul、抗D血型试剂30ul以及ABO反定型红细胞试剂30ul（每板可检测16份样本）；经血型仪孵育、离心后震荡两次，然后放入判读系统进行拍照判读；最后由软件自动汇总上传结果到局域网。同样对于可疑、正反不符、O细胞凝集、Rh（D）阴性样本送血型室进一步确认。离心、振荡、孵育参数设置见表1。

表1.离心、振荡、孵育参数设置

1.4质量控制每批样本检测前都用AB（+）、O（-）质控血清（北京汉泰旭和公司）做ABO、Rh（D）血型试剂的符合性试验以控制试剂质量。

1.5统计学处理

采用SPSS19.0软件对数据进行x²检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

Hemotype全自动血型仪与手工纸片法血型鉴定结果比较见表2、表3。由表2可见两种方法比较ABO一次准确定型差异有统计学意义（x²=8.35 P＜0.05）；由表3可见O细胞凝集差异有统计学意义（x²=6.4 P＜0.05）。两种方法Rh（D）鉴定都为100%。

表2.血型仪与手工法试验结果比较

表3.O细胞凝集与正反不符血型室鉴定结果比较

3.讨论

血型鉴定的经典方法是试管法，但此方法操作费时费力，难以大批量检测样本，故本血站一直采用纸片法检测血型。虽然三次检测以及在检测过程中如遇任何疑难血型都必须送血型室做最终鉴定可以保证定型正确率，但纸片法结果的肉眼观测，还是会给检测带来很大的错型风险。并且由于最终结果无法保存，也会给血型溯源带来困难。

Hemotype全自动血型仪的检测原理即为试管法，使用U形微板代替试管，样本和试剂分配完后离心，经过第一次快速振荡可使没有凝集的红细胞在微板孔内均匀分布，再经过第二次慢速振荡，可使弱凝集微小颗粒再次聚拢至中央凝集点，以达到充分凝集的效果。Hmotype全自动血型仪从加样到最终判读全部由电脑控制，实现了操作标准化、自动化，避免了人为错误发生［3］。且其结果与实验室软件系统连接，可自动汇总、保存于计算机内，便于核对，提高了工作效率和准确率。

从表2看，全自动血型仪对11298份样本进行ABO一次定型准确率为99.9%，高于手工法99.7%，并且本研究全自动血型仪法结果高于国内许多文献报道［4］，也高于国外一些文献报道［5］［6］。Rh（D）血型一次定型准确率均为100%。故全自动血型仪做血型鉴定可靠性好。从表3看全自动血型仪检出的O细胞凝集经血型室确认后，其阳性率高于手工法（0.08%＞0.009%），说明全自动血型仪做盐水不规则抗体初筛更易发现不规则抗体。而红细胞血型不规则抗体是引起血型鉴定、交叉配血困难、输血不良反应的主要原因之一［7］。故检出盐水不规则抗体大大增加了输血安全性。

全自动血型仪法无法一次准确定型有11例，重新经血型仪鉴定后有8例样本正反不符，3例为正常血型，其无法一次通过检测的原因都是因为这3个血样管内有细小凝块。故用全自动血型仪进行血型鉴定，血样管须充分抗凝，未充分抗凝的样本不仅会造成结果假阳性，还会使加样针堵塞，给检测工作带来困难。［8］另外表3中手工法30例正反不符最后全部送血型室鉴定，其中只有一例是亚型，可见手工法中即使工作人员肉眼无法完全肯定结果即送血型室确认，仍旧有2例亚型被漏检，此时只有通过医院交叉配血被发现［9］。而全自动血型仪法正反不符经血型室确认有5例为正常血型，假阳性率占62.5%，归纳其原因有以下几点：①微板有污染。②血样未充分抗凝。③样本溶血或脂血。④红细胞抗原弱或丢失。⑤血清定型减弱或无反应［10］。故使用血型仪时需注意以上几点。

Hemotype全自动血型仪每小时可检测144例样本，由于每个微形板上有16例样本，故每1～16例样本的检测时间大概为7分钟。对于少量样本，血型仪在时间上是不具有优势的，但是目前本血站每天检测量平均为300例血样，所以使用全自动血型仪可明显提高本站工作人员的检测效率。值得一提的是，无论是血样还是试剂，全自动血型仪的加样量都远远小于手工操作，这不仅便于本科室进行血样的其他检测、留样，而且在一定程度上节约了试剂成本。

当然全自动血型仪的结果图片还是需要人工核对，所以在使用血型仪过程中仍需工作人员严格按照SOP操作，认真核对，维护好仪器，提高责任心，避免因血型错误而造成的输血事故。

［1］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京:东大学出版社，2006:246.

［2］高峰.输血与输血技术［M］.北京:人民卫生出版社，2003: 90-95.

［3］ Schoenfeld H， Pretzel KJ， von Heymann C，et al. Validation of a hospital-laboratory workstation for immunohematologicmethods ［J］. Transfusion，2010，50（1）: 26-31.

［4］ 邱昌文，颜秀娟，姜莹.STAR BG全自动血型仪在血站的应用［J］.检验医学与临床，2013，10（3）:361-366.

［5］ 秋会，夏爱军，穆士杰，等.应用全自动血型/配血系统对血型检测结果的分析［J］.临床输血与检验，2011，13（3）:249-250.

［6］ 宋建，彭涛，李翠莹，等.全自动血型及配血分析系统的应用［J］.中国输血杂志，2011，24（1）:60-61.

［7］ Moise KJ.Red blood cell alloimmunization in pregnancy［J］.Semin Hematol，2005，42（3）:169-178.

［8］ 王敏，王保龙，姚萍，等.全自动血型仪在输血前检查中的应用［J］.临床输血与检验，2011，13（2）:123-125.

［9］ 周国平，周喆，向东，等.全自动血型分析仪应用于献血者血型筛查［J］.中国输血杂志，2011，24（5）:395-398.

［10］ 李敏芳，刘峰.采用全自动血型仪正反定型不一致的原因分析及对策［J］.临床输血与检验，2013，15（1）:54-56.

The Application of Hemotype Fully Automatic Blood Type Instrument in Blood Station Blood Type

WANG ZiShenyang Central Blood Station， Liaoning（Shenyang110000）

Objective: To discuss the application of Hemotype fully automatic blood type instrument in blood station blood type identification value. Methods: The 11298 specimens of blood donors was taken to conduct the ABO/Rh（D） blood typing and brine irregular antibody indentification by using the Hemotype fully automatic blood type instrument， and then compared with the manual method. Results: The accuracy rate of ABO blood type one time of the two methods was compared. The rate of the two methods were 99.9%（11287/11298）and 99.7%（11268/11298） respectively， The difference was statistically significant（P＜0.05）； The correct rate for Rh（D） type was 100%； The positive rate of O cell agglutination was 0.08%、0.009%respectively.The difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion: The results ofthe fully automatic blood type instrument were accurate and reliable， and were able to last forever. It’s standard and automated in the operation process which might eliminate human error. Important， it’s easier to find the brine irregular antibodies. So the fully automatic blood type instrument applied to blood type batch testing for blood station.

fully automatic blood type instrument， abo blood typing， Rh（D）blood typing，brine irregular antibody

1006-6586（2016）10-0061-04

TH776

A

2016-05-24