HBsAg阳性血标本无害化处理方法的研究

武红玉，陈永伟，李跃松，马智鸿，潘栋辉，徐希杰，王静，陆丹

1.江苏省原子医学研究所附属江原医院（检验科），江苏无锡214063；2.江苏省原子医学研究所（研究部），江苏无锡214063

HBsAg阳性血标本无害化处理方法的研究

武红玉1，陈永伟1，李跃松1，马智鸿1，潘栋辉2，徐希杰2，王静1，陆丹1

1.江苏省原子医学研究所附属江原医院（检验科），江苏无锡214063；2.江苏省原子医学研究所（研究部），江苏无锡214063

目的探索并建立乙肝病毒表面抗原阳性血标本无害化处理的可行方案。方法通过给不同阳性强度的乙肝病毒表面抗原阳性血标本加入不同量的84消毒液，于不同的时间周期检测乙肝病毒表面抗原浓度，寻找乙肝病毒表面抗原被灭活的84消毒液有效剂量和灭活所需时间。结果当84消毒液剂量达不到有效灭活水平时，作用时间1周也无灭活效果；而使用84消毒液有效灭活剂量即体积比达1：1时，作用1 h以上强阳性的血标本也完全达到灭活效果。结论使用84消毒液等体积处理乙肝病毒表面抗原阳性血标本可以完全灭活乙肝病毒，达到无害化效果，是简便、快捷、价廉、安全的防范风险医疗废弃物处理手段，值得推广应用。

乙肝病毒表面抗原；阳性血标本；84消毒液；医疗废弃物；无害化；处理

我国乙肝病毒感染率一直比较高［1］，甚至在某个时段有超过1亿的乙肝病毒携带者［2］。有资料显示，农村的阳性率较城市高，有些农村高达55%，这样的高感染率基本上是由失控的感染源所致。有些地区孕妇HBV总感染率达到21.26%［3］，高感染率严重影响了人们的身心健康，干扰了正常的生活。有相关研究证明乙肝病毒阳性的患者与肝硬化和肝癌有一定的相关性。目前乙肝疫苗的预防接种是控制乙肝最经济有效的措施之一［4］，尽管经过多年努力，阳性率有所下降，但目前青少年乙肝表面抗原阳性率仍＞4.0%［5-6］。乙肝阳性血标本的灭活处理，从源头上阻断接触感染，应该是一种很有效的控制手段。如果对各类医疗单位的乙肝病毒污染的血液或其他污染物进行无害化处理，杜绝未经消毒灭活处理就排放进下水管道或送到医疗垃圾中转站，以免造成意外乙肝病毒的传染。检验标本应放在带盖的试管中，在作为医疗废弃物前做好规范的无害化灭活处理，符合从传染源上防止和控制传染病的原则。

1　材料与方法

1.1仪器、材料与试剂

微量移液器，上海求精玻璃仪器厂；HH-W21-600S数显电热恒温水温箱，上海跃进医疗器械有限公司；iMa r K酶标仪，美国BI0-RAD公司；1575洗板机，美国BI0-RAD公司；KJ-201C微量振荡器，江苏康健医疗用品有限公司；血液标本，收集本科室乙型肝炎表面抗原阳性病人血清；84消毒液，江苏爱特福84股份有限公司；乙型肝炎表面抗原诊断试剂盒（酶联免疫法），上海科华生物工程股份有限公司。

1.2方法

配制工作浓度洗涤液，选择一定量的板条，分别加入75 uL待测标本和阴性、阳性对照。预留空白对照孔。用封片纸覆盖反应板后，置37℃水浴箱孵育60 uL。取出反应板，撕去封片，在已加入待测样本和阴性、阳性对照的孔中加入50 uL酶结合物，在微孔振荡器上震荡10 s，用封片纸覆盖反应板后，置37℃水浴箱孵育30 min。取出反应板，撕去封片纸，在洗板机上洗涤反应板5次。洗完后在干净的吸水纸上拍干。洗涤结束后立即在所有孔内加入显色剂A、显色剂B各50 uL，混匀，在微孔震荡器上震荡10 s，用封片纸覆盖反应板后，将反应板置37℃孵育30 min。在所有孔内加入50 uL终止液，振荡反应板5 s，使之充分混匀。用酶标仪读数，双波长：波长450 nm，参考波长630 nm，空白校零，然后读取各孔0D值S。根据公式：CO=NC+0.100。C0为阈值；NC为阴性对照0D值。当S/C0≥1.0，说明该检测标本HBsAg结果为阳性；当S/C0＜1.0，说明该检测样本HBsAg结果为阴性。

实验所用84消毒液是以次氯酸钠为主要成分的液体消毒液，有效氯含量为34.0～46.0 g/L。可杀灭肠道致病菌、化脓性球菌、致病性酵母菌，并能灭活病毒。将84消毒液和血清按不同比例分别混合，各放入试管中，盖紧，放置1 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d，分别测定HBsAg的S/CO值。

2　结果

S/CO=10±的HBsAg阳性血清标本的灭活效果，见表1；S/CO=15±的HBsAg阳性血清标本的灭活效果，见表2；S/CO=20±的HBsAg阳性血清标本的灭活效果，见表3；乙肝大三阳HBsAg强阳性血清标本的灭活效果，见表4。

由表1～4可见，HBsAg阳性血标本是否灭活完全取决于HBsAg阳性的强弱和84消毒液的使用比例，达不到灭活的剂量，作用时间延长也无效果。当两者体积等比时，1 h可完全灭活HBsAg阳性血清标本活性。

表1　S/CO=10±的HBsAg阳性血清标本的灭活效果（5例）

表2　S/CO=15±的HBsAg阳性血清标本的灭活效果（5例）

表3　S/CO=20±的HBsAg阳性血清标本的灭活效果（5例）

表4　乙肝大三阳HBsAg强阳性血清标本的灭活效果（5例）**

3　讨论

乙肝病毒于25℃下可以在血制品或干血块中保持活性7 d以上［7］，因而无论是医务人员还是从事医疗废弃物处理的相关人员在收集运输的过程中都存在接触乙肝阳性标本感染的高风险［8-11］，所以乙肝阳性血标本的无害化处理极其重要，须从源头上杜绝被感染的可能性。该研究提供了HBsAg阳性血标本无害化处理的简单价廉可行的解决方案。

从以上实验可以看出：同等体积的84消毒液对HBsAg阳性血标本有完全灭活作用。84消毒液的用量与乙肝病毒阳性强度有关。阳性越强，84消毒液用量越多。如果消毒液达不到有效量，作用时间延长也起不到灭活效果。

84消毒液是日常易得的商品化消毒杀菌制剂，用来处理HBsAg阳性血标本，使其达到无害化效果，从一个源头上解决感染和传播的风险，无需太多成本也易于操作。从而更好地保护医护人员，特别是保护从事医疗废弃物处理的各个环节上的从业人员的健康安全具有重要意义。

建议各医疗部门将HBsAg阳性血标本作为医疗废弃物处理1 h前加入同等体积的84消毒液进行灭活处理，以保护相关人员的健康安全。

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Research on Harmless Treatment Method of HBsAg Positive Blood Specimen

WU Hong-yu1，CHEN Yong-wei1，LI Yue-song1，MA Zhi-hong1，PAN Dong-hui2，XU Xi-jie2，WANG Jing1，LU Dan1
1.Department of Clinical Laboratory，Jiang Yuan Hospital Affiliated to the Institute of Atomic Medicine，Wuxi，Jiangsu Province，214063 China；2.Department of Research，Institute of Atomic Medicine，Wuxi，Jiangsu Province，214063 China

Objective To explore and establish the feasible program of HBsAg positive blood specimen.Methods The effective dose of 84 disinfectant and inactivation time needed were found out by putting different doses of 84 disinfectants into different positive intensities of HBsAg blood specimens and testing the HBsAg concentration in different time periods. Results There was no inactivation effect after 1-week action when the 84 disinfectant dose failed to reach the effective inactivation level，and the strong positive blood specimens could reach the inactivation effect after 1h action or above when the volume ratio of 84 disinfectant reached 1：1.Conclusion The use of isometric 84 disinfectants in handling the HBsAg positive blood specimens can totally inactivate the hepatitis B virus and reach the harmless effect，which is a simple，rapid，cheap and safe treatment means of medical wastes，and it is worth promotion and application.

HBsAg；Positive blood specimen；84 disinfectant；Medical waste；Harmless；Treatment

R19

A

1672-5654（2016）10（a）-0076-03

10.16659/j.cnki.1672-5654.2016.28.076

国家自然基金项目（81401450）。

武红玉（1964-），女，江苏无锡人，大专，主管检验师，研究方向：临床检验。

徐希杰（1964-），男，江苏南通人，大专，主管理化检验师，主管技师，研究方向：分析测试、放射防护，E-mail：xuxijie@jsinm.org。

（2016-07-06）