两种培养基对污染性啤酒野生酵母培养效果的比较

◎文天寿，曾 园，付良姬，秦 卓（燕京啤酒（玉林）有限公司，广西 玉林 537000）

两种培养基对污染性啤酒野生酵母培养效果的比较

◎文天寿，曾 园，付良姬，秦 卓
（燕京啤酒（玉林）有限公司，广西 玉林 537000）

使用2种不同的培养基来检测4种污染性啤酒野生酵母，考察2种培养基的培养效果，以期找到更合适啤酒厂日常测酵母菌用培养基，结果发现2种培养基在培养污染性啤酒野生酵母的效果上未存在明显的差异，但是从经济成本和方便性考虑，WA培养基更适合啤酒厂日常检测。

啤酒；野生酵母；培养基；检测

野生酵母是指啤酒厂中除培养酵母以外的所有酵母。野生酵母的种类繁多，性状各异，对啤酒生产的危害较大。啤酒厂常见的野生酵母种类包括酵母属（Saccharomyces），如克氏酵司（Kloeckera）、汉逊氏酵母（Hansenula）、假丝酵母（Candida）、圆酵母（Torulopsis）、红酵母（Rhodotorula）、酒香酵母（Brettanomyces）和毕赤氏酵母（Pichia）等。目前，燕京啤酒（玉林）有限公司已鉴定出的污染性野生酵母有4种：酿酒酵母（非本厂使用酵母）、假丝酵母、胶红酵母及毕赤酵母。

根据GB4789.15-2010推荐的培养基，现选用选用马铃薯葡萄糖琼脂培养基和麦汁琼脂培养基分别检测4种野生酵母及燕京啤酒酵母，考察这两种培养基的培养效果，以期找到培养效果好、经济实惠的培养基，用来做啤酒厂日常检查酵母菌用。

1　材料和方法

1.1主要材料

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA），北京陆桥科技有限责任公司；麦汁琼脂培养基（WA），10oP麦汁，2%琼脂。菌种：野生酵母（日常检测出）。

1.2仪器和设备

超净工作台，西班牙STERIL，POLARIS/SQF-D；恒温培养箱，韶关市泰宏医疗器械有限公司，LRH-250A。

1.3试验方法

试验方法如下：（1）9.0 mL 0.85%的无菌生理盐水试管6支，1.0 mL无菌一次性枪头1盒，1.0 mL移液枪1支，无菌涂布棒12支，接种针1只，酒精灯1盏。

（2）用接种针挑取野生酵母菌落，放进9.0 mL的无菌盐水试管内，在接近液面的试管壁上，用接种针将菌落展开，然后放在振荡器上震荡，使菌落细胞近可能均质，然后用该只试管作为原菌液，按表1进行稀释及涂布试验。

（3）每个稀释梯度涂布2个平皿，每个平皿取0.2 mL菌液，用一次性无菌涂布棒涂布，然后置于同一个培养箱，27 ℃培养72 h。

（4）同样的试验方法，分别取酿酒酵母（非本厂使用酵母）、假丝酵母、胶红酵母及毕赤酵母进行试验。

表1　菌落稀释和涂布情况表

2　试验结果

27 ℃培养72 h，2种培养基培养相同菌落的对比结果如下。

酿酒酵母（非本厂使用酵母）：①PDA培养基，10-1时 192，10-2时31，10-3时7，10-4时1，10-5时0；②WA培养基，10-1时195，10-2时29，10-3时8，10-4时0，10-5时0。

假丝酵母：①PDA培养基，10-1时210，10-2时45，10-3时11，10-4时2，10-5时0；②WA培养基：10-1时214，10-2时41，10-3时13，10-4时3，10-5时0。

胶红酵母：①PDA培养基，10-1时236，10-2时46，10-3时14，10-4时3，10-5时0；②WA培养基，10-1时231，10-2时48，10-3时16，10-4时4，10-5时0。

毕赤酵母：①PDA培养基，10-1时186，10-2时47，10-3时16，10-4时5，10-5时0；②WA培养基，10-1时188，10-2时50，10-3时17，10-4时4，10-5时0。

3　讨论

从数据结果不难看出，2种培养基培养污染性啤酒野生酵母未存在明显的差异，都合适用于啤酒厂用来检测啤酒野生酵母。从成本和方便性考虑，WA培养基所用的麦汁在啤酒厂容易得到，其经过简单的过滤处理后添加琼脂粉即可，主要成本只是琼脂粉，琼脂粉的市场价格为103元/瓶，而PDA培养基为成品培养基，其市场价格为130元。根据公司的实际情况琼脂粉的添加量是2%，每年的使用量是15瓶，即可以配置成750.00 L培养基，总成本是1 545元，750.00 L培养基换算PDA培养基（40 g溶于1.00 L的纯净水，每瓶250 g即6.25 L/瓶）的使用量是120瓶，总成本是15 600元。很容易看出，WA培养基比PDA培养基更加经济。

综上所述，2种培养基在培养污染性啤酒野生酵母的培养效果上未存在明显的差异，但是从成本经济方面考虑，选择WA培养基比较合适。

[1]陈泽宇，周青梅.啤酒生产中的有害菌及控制办法[J].广东化工，2011（12）：68-69．

[2]管建良.野生酵母对啤酒生产的影响及控制[J].啤酒科技，2009（2）：47-48.

[3]田威，欧英秋.阎凤文两种方式培养啤酒有害菌的比较[J].啤酒科技，2012（8）：24-25．

Two Kinds of Culture Medium on Polluting Beer Wild Yeast Culture Effect Comparison

Wen Tianshou，Zeng yuan，Fu Liangji，Qin Zhuo
（Yanjing Beer （Yulin） Co. Ltd.，Yulin 537000，China）

This article used two different types of culture medium to detect the four kinds of wild polluting beer yeast，to investigate the effect of these two kinds of culture media，in order to find a more suitable brewery yeast daily test media，the results showed that two kinds of culture medium on the effect of wild yeast culture polluting beer was no obvious difference，but taking the economic cost and convenience into consideration，WA culture medium was more suitable for brewery routine detection.

Beer； Wild yeast； Medium； Detection

TS262.5

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.04.016

文天寿（1985-），男，广西玉林市人，本科，助理工程师，主要研究方向：啤酒分析。