消肿活络散中白芷、透骨草、独活、川芎的薄层色谱鉴别

广东省江门市新会区司前人民医院（529159）林传辉 余关厚 利超媚

“消肿活络散”是本院自制的中西药结合的散剂，由白芷、牛膝、透骨草、独活、续断、海桐皮、川芎、硫酸镁等23种药物组成，具有舒筋活络，消肿止痛，祛风除湿，活血化瘀，通利关节的功效。主要用于治疗四肢关节肿痛，扭挫损伤，风寒湿痹及骨折、脱位所致的软组织损伤、粘连、关节活动功能受限等症。为了提高制剂质量标准，完善制剂质量控制方法，笔者采用薄层色谱法对消肿活络散中白芷、透骨草、独活、川芎进行定性鉴别，结果比较满意，现介绍如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器 UV-1型三用紫外分析仪（上海顾村电光仪器厂)；25μl微量进样针(上海医用激光仪器厂)；双槽展开缸（10cm×10cm，上海信宜仪器厂）；预制硅胶G薄层板（规格：10cm×10cm，厚度：0.25～0.3mm，青岛海洋化工有限公司）；自制硅胶G薄层板（规格：10cm×10cm，厚度0.3mm）。

附图1 白芷的薄层鉴别

附图2 透骨草的薄层鉴别

附图3 独活的薄层鉴别

附图4 川芎的薄层鉴别

1.2 材料 白芷对照药材（中国药品生物制品检定所，批号：120945-201008）；川芎对照药材（中国药品生物制品检定所，批号：120918-201110）；独活对照药材（中国药品生物制品检定所，批号：120940-201111）；透骨草药材（购自佛山市中天饮片有限公司）；消肿活络散（本院制备,批号：20150312，20150528）；石油醚、乙醚（广州化学试剂厂），甲醇、乙酸乙酯（汕头市光华化学厂），盐酸（广州市东红化工厂），无水乙醇、正已烷（天津市大茂化学试剂厂）。以上试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 白芷的薄层鉴别 取消肿活络散粉末40g，加乙醚浸泡提取二次（70ml、30ml），合并乙醚液，挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作供试品溶液。取白芷对照药材粉末0.5g，按同法制成对照药材溶液。按处方比例制成缺独活的阴性对照品，按同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验[1]，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（60℃～90℃）-乙醚（3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。见附图1。

2.2 透骨草的薄层鉴别 取消肿活络散粉末40g，加甲醇70ml，超声30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取透骨草药材粉末1g，按同法制成对照药材溶液。按处方比例制成缺透骨草的阴性对照品，按同法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验[1]，吸取上述三种溶液5μl，分别点于同一含甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见附图2。

2.3 独活的薄层鉴别 取消肿活络散粉末40g，加乙醚70ml，超声10分钟，滤过，滤液挥干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取独活对照药材粉末1g，按同法制成对照药材溶液。按处方比例制成缺独活的阴性对照品，按同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验[1]，吸取上述三种溶液5μl，分别点于同一含甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（60℃～90℃）-乙酸乙酯（7∶3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见附图3。

2.4 川芎的薄层鉴别 取消肿活络散粉末40g，加酸性甲醇（50ml甲醇中加0.5ml盐酸）70ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水20ml溶解，以氢氧化钠试液调节pH至9，用乙酸乙酯萃取二次（20ml、15ml），合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作供试品液。另取川芎对照药材粉末1g，按同法制成对照药材溶液。按处方比例制成缺川芎的阴性对照品，按同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验[1]，吸取上述三种溶液3μl，分别点于同一含甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（60℃～90℃）-乙醚(2∶1)为展开剂，在10℃低温条件下展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见附图4。

3 讨论

3.1 白芷的鉴别已做过报道，对供试液的制备、展开剂的比例、检视灯光进行了调整改进，使层析分离效果更好，斑点更清晰。

3.2 透骨草的鉴别与文献比较，在供试液的制备方法、展开剂的品种与比例更为简单，分离的薄层斑点更清晰，不需显色，直接置紫外灯检视方法简便。

3.3 独活鉴别的展开剂在实验中作了比较，白芷鉴别的展开剂为石油醚（60℃～90℃）-乙醚（3∶1，V∶V）；文献方法展开剂为石油醚（60℃～90℃）-乙酸乙酯（1∶1，V∶V）；药典方法的展开剂石油醚（60℃～90℃）-乙酸乙酯（7∶3，V∶V），结果药典方法的展开剂分离效果要好。

3.4 川芎的鉴别，参考文献，除供试液的制备外，对展开剂、显色剂显色、检视薄层斑点都作了改良，采用石油醚（60℃～90℃）-乙醚(2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，分离效果好，薄层色谱斑点清晰。