雾化吸入对小儿哮喘调节性T细胞及气道炎症的治疗效果

张云　张晓　黄治华



·论著·

雾化吸入对小儿哮喘调节性T细胞及气道炎症的治疗效果

张云张晓黄治华

目的观察并探讨布地奈德(BUD)、沙丁胺醇(SAL)和异丙托溴铵(ipratropium bromide，IB)三联雾化吸入治疗对小儿支气管哮喘调节性T细胞及气道炎症的影响。方法分析儿童支气管哮喘患者40例，随机平均分为2组，哮喘组采用BUD、SAL联合IB三联雾化吸入治疗，对照组口服维生素B1(安慰剂)，10 mg/d。收集外周血样，测定IFN-γ和IL-4的水平。哮喘严重度由哮喘症状评分评估，肺功能比较用FEV1比较。观察2组患者治疗前及药物治疗后1个月、3个月、6个月的肺功能各项指标的情况，2组治疗后检测胸膜厚度及胸膜滑动度。结果哮喘组FEV1显著改善，Th2细胞百分比显著降低(P<0.05)。哮喘组Th1细胞与Treg细胞略有变化，从而减轻Th1/Th2细胞和Treg/Th17细胞的失衡，对照组无明显变化(P>0.05)；2组治疗前及治疗后1个月、3个月肺功能差异无统计学意义(P>0.05)；6个月肺功能哮喘组优于对照组，2组差异有统计学意义(P<0.05)；哮喘组术后CT测量胸膜厚度要厚于对照组，胸膜滑动度优于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论雾化吸入重新平衡细胞因子，调节Th1/Th2细胞和Treg/Th17细胞平衡，改善患者肺功能，从而缓解哮喘患者症状。

小儿哮喘；雾化吸入；T细胞；气道炎症；细胞因子

哮喘代表气道的慢性炎症性疾病，并与气道高反应性相关，导致经常反复发作和肺内气流阻塞[1]。哮喘一度被认为是一个典型的Th2细胞介导的疾病。新的证据表明哮喘不仅仅是Th2型疾病。Th1和调节性T细胞(Treg)也参与了哮喘的发展。Th1细胞释放干扰素(IFN)-γ，抑制Th2细胞的发展，因此，Th1/Th2细胞的失衡可能是导致哮喘严重程度的一个关键因素[2]。临床上普遍采用支气管扩张剂来解除气道平滑肌痉挛和缓解喘憋，如茶碱类、酚妥拉明、阿托品等，但是其缓解症状、改善体征方面疗效不一，且各有其不良反应[3]。我院对小儿毛细支气管炎患儿给予布地奈德(BUD)、沙丁胺醇(SAL)和异丙托溴铵(IB)的三联吸入治疗，取得了理想的效果，有效控制哮喘症状[3]。本文旨在研究小儿哮喘雾化吸入治疗对患儿肺功能及Th1、Treg平衡的调节作用，报告如下。

1　资料与方法

1.1一般资料回顾性分析2012年8月至2015年11月在我院儿科住院的40例儿童支气管哮喘患者，所有患者符合全球哮喘防治倡议和2008年我国儿童支气管哮喘诊断与防治指南中有关小儿支气管哮喘的诊断标准，入组患者均为特应性轻中度持续性哮喘患者。将患者随机分为2组，哮喘组20例，男11例，女9例；年龄4～16岁，平均年龄(10.4±1.3)岁；对照组20例，男9例，女11例；年龄5～16岁，平均年龄(10.7±2.9)岁。所有纳入病例测试前未使用激素、茶碱类、支气管扩张剂等。2组一般资料具有均衡性。

1.2观察指标哮喘患者记录患者社会人口特征包括年龄，性别。应用6-域哮喘症状评分评估并记录哮喘程度[4]。血清IL-4、IFN-γ和IgE水平进行了测定。样品收集的当天，还测定1 s用力呼气容积(FEV1)。

1.3治疗方法所有患儿均按照小儿毛细支气管炎的综合治疗方案，包括抗感染、吸氧、镇静和支气管解痉药等常规治疗方式。哮喘组在西医治疗的基础上给予布地奈德(阿斯利康制药有限公司)1 ml，0.5 mg剂量、0.5%沙丁胺醇(北京海德润制药有限公司)0.25 ml 和异丙托溴铵(华润双鹤药业股份有限公司)1 ml，0.125 mg剂量加入0.9%氯化钠溶液1 ml吸入治疗，经氧气驱动喷射雾化吸入。对照组口服维生素B1(安慰剂)，10 mg/d。2组服用对应制剂12周后，判断2组疗效。 判断标准:按照哮喘症状评分系统评估哮喘症状。该项目包括呼吸困难、胸闷、白天喘息，夜间喘息和日常表现，分数范围0～3分。根据欧洲呼吸协会标准测定FEV1%。测定3次，最高FEV1值用于数据分析。

1.4测定方法患者空腹过夜，次日上午9∶00，静脉血液样本(2 ml)测定IL-4和IFN-γ水平。血样室温下凝结60 min。1 200 r离心分离10 min得血清，-80℃储存至测量之前。血清LL-4和IFN-γ水平，以及总IgE水平，用ELISA法测定。(1)胸膜厚度测量:分别在治疗后予64排胸部 CT 复查，采用薄层(3 mm)扫描。取术侧前正中线，在纵隔窗图像片上选择，后正中线、侧正中线测量胸膜最大厚度的数值，记录每例胸膜最大厚度的CT片层为中心所测量值的平均值；(2)胸膜滑动度的测量：治疗后予CT片彩超胸部复查。采用7 MHz 线性探头测量患者胸膜滑动征，在腋中线第 2、4、6 肋间、脊柱旁线第 2、5、7、9 肋间、胸壁锁骨中线第 2、4 肋间检测胸膜滑动征。记录吸气末、呼气末胸膜移动距离(mm)。胸膜滑动度值是以上测量数值取平均值；分别于治疗前及治疗后1个月、3个月、6个月观察患者肺功能的变化情况，肺功能的检测，记录1 s用力呼气容积占预测值FEV1% pred、1s用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、FEV1。

2　结果

2.1人口学和临床特征数据比较哮喘组和对照组平均年龄分别为(10.4±1.3)岁和(10.7±2.9)岁(P=0.06)。男性比例分别为55%和45%(P=0.66)。哮喘组平均哮喘症状评分高于对照组[(10.9±2.8)分和(8.1±2.4)分;P<0.01]。哮喘组平均FEV1%显著低于对照组(P<0.05)。见表1。

表1　人口学和临床特征数据　n=20

2.22组细胞因子数据2组平均IFN-γ水平、血清IL-4水平，差异均有统计学意义(P<0.05)，哮喘组IFN-γ水平与哮喘症状评分呈显著正相关关系(r=0.61)，并与FEV1%呈负相关(r=-0.59)。IFN-γ和IL-4之间无显著相关性。见表2。

变量哮喘组对照组P值IgE(U/ml)244.0±29.955.0±8.5<0.05IL-4(pg/ml)89.0±20.910.0±2.2<0.05IFN-γ(pg/ml)40.8±11.320.0±9.5<0.05

2.3治疗效果比较哮喘组炎症细胞，包括嗜酸性粒细胞，中性粒细胞和淋巴细胞，下降显著。哮喘组Th2细胞百分比显著降低。哮喘组Th1细胞与Treg细胞略有变化，从而减轻Th1/Th2细胞和Treg/Th17细胞的失衡。对照组无明显变化(P>0.05)。见表3。

表3　IFN-γ水平与其他哮喘参数相关性

2.42组患者肺功能指标比较2组治疗前及治疗后1个月、3个月肺功能差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后6个月肺功能哮喘组优于对照组，2组差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

组别FEV1pred(%)FEV1(L)FEV1/FVC(%)哮喘组 治疗前42.87±1.381.25±0.2554.32±5.34 治疗后 1个月42.86±1.091.26±0.2354.29±5.53 3个月44.45±6.761.32±0.3256.45±8.12 6个月48.34±7.89*#1.39±0.56*#59.23±9.23*#对照组 治疗前42.56±1.341.24±0.2354.34±5.34 治疗后 1个月42.67±1.451.25±0.2254.56±5.67 3个月43.34±6.231.30±0.2555.34±6.78 6个月44.34±6.451.32±0.3256.34±6.77

注：与治疗前比较，*P<0.05；与对照组比较，#P<0.05

2.52组患者胸膜厚度和胸膜滑动度比较哮喘组治疗后CT测量胸膜厚度厚于对照组，胸膜滑动度优于对照组(P<0.05)。见表5。

表5　2组患者胸膜厚度和胸膜滑动度比较　±s

3　讨论

临床上普遍采用支气管扩张剂来解除气道平滑肌痉挛和缓解喘憋，如茶碱类、酚妥拉明、阿托品等，但是其缓解症状、改善体征方面疗效不一，且各有其副作用[5,6]。

本次研究对20例小儿毛细支气管炎患儿给予BUD、SAL和IB的三联吸入治疗，对另20例患儿在常规治疗基础上采用BUD、SA雾化吸入治疗。雾化吸入将药物形成雾状颗粒送入气道，直接与呼吸道黏膜接触，不经过全身血液循环的稀释，因此局部药物浓度较高，可迅速发挥其抗感染、消除炎症以及稀释痰液等作用，已经成为呼吸系统疾病治疗的重要手段[7]。国外研究显示，RSV毛细支气管炎后吸入糖皮质激素可以减少2年内喘息症状的发生，持续2月的吸入治疗可以减少此后2年内哮喘的发病率[8]。IB是目前临床上使用最为广泛的短效抗胆碱药[9]，在吸入后5 min 开始起效，30～60 min达峰值，持续4～6 h，因而适应对于需要立即缓解症状的患者。我们本次研究发现，三联雾化吸入治疗与二联雾化吸入治疗相比，能明显改善小儿毛细支气管炎患儿的肺功能和临床症状[10-12]。与上述理论一致。

在本研究中，哮喘组的平均哮喘症状评分高于对照组，平均FEV1%显著低于对照组。哮喘组血清IFN-γ、IL-4水平高于对照组，且IFN-γ水平与哮喘症状评分呈正相关，与FEV1%负相关。IFN-γ和IL-4之间无显著相关性。在治疗效果的比较上，哮喘组的炎症细胞，包括嗜酸性粒细胞，中性粒细胞和淋巴细胞，下降显著。此外，雾化吸入给药增加了经典的Th1细胞因子IFN-γ，从而改变Th1/Th2平衡。相比对照组，雾化吸入不仅减少炎性细胞因子Th2，而且如果施用较高剂量，抑制Th17细胞因子IL-17，雾化吸入可能调节Th1/Th2平衡和Th17/Treg的平衡。哮喘组的Th2细胞百分比显著降低。哮喘组Th1细胞与Treg细胞略有变化，从而减轻Th1/Th2细胞和Treg/Th17细胞的失衡。对照组无明显变化。治疗后哮喘组CT测量胸膜厚度要厚于对照组，哮喘组胸膜滑动度优于对照组；6个月的时候肺功能哮喘组要优于对照组。

综上所述，BUD、SAL联合IB三联雾化吸入治疗能明显改善小儿毛细支气管炎患儿的肺功能，重新平衡细胞因子，调节Th1/Th2细胞和Treg/Th17细胞平衡，从而缓解小儿哮喘患者症状。

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2周玲,潘家华.特异性免疫疗法治疗儿童哮喘临床观察.安徽医药,2013,17:1572-1574.

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6林文龙.博利康尼联合氨溴索驱动雾化吸入治疗小儿毛细支气管炎的疗效观察.临床肺科杂志,2013,18:1808-1809.

7张蕾,李敏,董巍,等.771例小儿下呼吸道感染的病毒病原检测分析.国际儿科学杂志,2010,37:1-3.

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Therapeutic effects of atomization inhalation on bronchial asthma in children and its effects on regulatory T cells and airway inflammation

ZHANGYun,ZHANGXiao,HUANGZhihua.

DepartmentofPediatrics,NanhaiHospitalofGynecologyandObstetricsandChildren’sHealthCareAffiliatedtoGuangzhouTCMUnivertsity,Guangdong,Foshan528200,China

ObjectiveTo observe the therapeutic effects of combination trigeminy atomization inhalation of budesonide (BUD), salbutamol (SAL) and ipratropium bromide (IB) on bronchial asthma in children and its effects on regulatory T cells and airway inflammation.MethodsForty children patients with bronchial asthma were randomly divided into two groups,with 20 patients in each group.The patients in observation group were treated by triple atomization inhalation of BUD,SAL and IB,however,the patients in control group were treated by oral Vitamin B1 (placebo),10mg/d. The srum levels of IFN-γ and IL-4 in peripheral blood of patients were detected,the severity of bronchial asthma was evaluated according to asthma symptom scoring,and lung function was compared between two groups by FEV1 comparison method. The parameters about lung function were observed before treatment and on 1m,3m,6m after treatment for both groups. Moreover the pleural thickness and pleural sliding degree were detected after treatment.ResultsAs compared with those in control group,the FEV1 was obviously improved,and the percentage of Th2 was significantly decreased in observation group (P<0.05). Moreover the disbalance of Th1/Th2 and Treg/Th17 was significantly improved in observation group (P<0.05). There were no significant differences in lung functions before treatment and on 1m,3m after treatment between two groups (P>0.05). However the lung functions on 6m after treatment in observation group were superior to those in control group (P<0.05). CT examination results showed that pleural thickness in observation group was thicker than that in control group,and pleural sliding degree in observation group was superior to that in control group (P<0.05).ConclusionThe atomization inhalation can balance cytokines again, regulate the balance of Th1/Th2 and Treg/Th17,improve lung function of patients,thus, which can relieve the symptoms of asthma.

asthma in children; atomization inhalation; T cells; airway inflammation; cytokines

10.3969/j.issn.1002-7386.2016.19.016

528200广东省佛山市，广州中医药大学附属南海妇产儿童医院儿内科

R 256.12

A

1002-7386(2016)19-2942-03

2016-03-17)