不同体质特性过敏性紫癜血清免疫学指标特征的相关性研究*

乌日图那顺 布仁巴图龚翠琴 哈申高娃白呼和巴拉 阿木拉 黄丽艳 九姑娘（内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028007）

·研究报告·

不同体质特性过敏性紫癜血清免疫学指标特征的相关性研究*

乌日图那顺 布仁巴图△龚翠琴 哈申高娃白呼和巴拉 阿木拉 黄丽艳 九姑娘
（内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028007）

目的 观察不同体质特性过敏性紫癜 （HSP）患者治疗前、后的血清免疫学指标IgA、IgG、IgM、IgE、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6的变化特征。方法 搜集不同体质特性HSP患者各30例作为实验组，搜集与2种体质特性患者相对应的健康者各30例作为对照组。实验组患者在治疗前、治疗后各1次，对照组为1次，空腹采3 mL静脉血测试血清IgA、IgG、IgM、IgE、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6的值，进行统计分析。结果 搜集到赫依-希拉体质特性患者27例、巴达干-希拉体质特性患者8例、巴达干-赫依体质特性患者2例、希拉体质特性患者1例。因例数太少未对巴达干-赫依和希拉体质特性患者进行统计处理。各组间不同年龄及不同性别患者和正常人群的分布差异无统计学意义（P＞0.05）；赫依-希拉型、巴达干-希拉型正常组间IgG、IgM、IL-4、CD4+T、CD8+T差异有统计学意义（P＜0.05）；赫依-希拉型实验组 （治疗前）与赫依-希拉型正常组间IgA、IgM、IgE、IL-4、CD4+T、CD8+T差异有统计学意义 （P＜0.05）；巴达干-希拉型实验组（治疗前）与巴达干-希拉型正常组间CD8+T、CD4+T/CD8+T差异有统计学意义（P＜0.05）；而赫依-希拉型、巴达干-希拉型实验组治疗前后组间及组内免疫指标均无显著差异（P＞0.05）。结论 与巴达干-希拉型体质特性人群相比赫依-希拉型体质特性人群可能更易患HSP，但有待流行病学调查证实；与相应体质特性正常人群相比，赫依-希拉体质特性HSP患者在免疫学指标的变化特征是IgA、IgM、IgE、IL-4显著下降，CD4+T、CD8+T显著上升；巴达干-希拉型体质特性HSP患者在免疫学指标的变化特征是CD8+T显著下降、CD4+T/CD8+T显著上升；而赫依-希拉型体质特性HSP患者和巴达干-希拉型体质特性HSP患者在免疫学指标的变化特征和转归特征无显著性差异。

过敏性紫癜 蒙医体质特性 免疫指标

【Abstract】Objective：To observe the changes features of seroimmunological indexes that IgA、IgG、IgM、IgE、CD4+T、CD8+T、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6 in different physique characteristics patients when treatment or not.Methods：Different physique characteristics patients with Henoch-schonlein purpura（HSP）were collected.30 patients with Henoch-Schonlein Purpura were divided into the treatment group，Opposite，30 cases with normal people into the control group.The treatment group were treated with 3 mL venous blood one time in empty stomach to test serum indexes that IgA、IgG、IgM、IgE、CD4+T、CD8+T、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6 befor therapy and treatment later again.Results：The physique feature of Heyi-xila patients 27 cases、Badggan-xila patients 8 cases and The feature of Badagan-heyi patients 2 cases、Xila patients 1 case，were collected.less case groups have not processed the statistical count.Various ages and gender in these groups contrast the distribution in normal people had no significant difference（P>0.05）.But，comparison Heyi-xila patients group to Badagan-xila patients group with this indexes that IgG、IgM、IL-4、CD4+T、CD8+T，the differences had statistical significance（P＜0.05）.Contrast Heyi-xila patients treatment group（befor therapy）and the physique feature of Heyi-xila regular people without Henochschonlein purpura showed the differences between about IgA、IgM、IgE、IL-4、CD4+T、CD8+T have statistical sig-nificant（P＜0.05），then，Badagan-xila patients treatment group（befor therapy）and the physique feature of Badagan-xila normal people without Henoch-schonlein purpura showed the differences between about CD8+T、CD4+T/ CD8+T have statistical significant（P＜0.05），however，these immunity index have been analysed and showed insignificant difference between Hetween Heyi-xila patients treatment group and Badagan-xila patients treatment group whether or therapy and no matter intra-group comparison.Conclusion：This study shows the physique feature of Heyi-xila population can be easier to suffer the Henoch-schonlein purpura，it remains to prove by epidemiology.Also，Heyi-xilapatients with Henoch-schonlein purpura have some immunity index apparently decline，such as IgA、IgM、IgE、IL-4.But，CD4+T、CD8+T have clearly rise.The physique feature of Badagan-xila patients with Henoch-schonlein purpura have decrease about CD8+T，increase about CD4+T/CD8+T.While compare the physique feature of Badagan-xila patients with HSP to Heyi-xila patients with HSP has no significant difference in immunity index change and outcome feature.

【Key words】Henoch-Schonlein purpura（HSP）；The physique characteristics of Mongolian medicine；Immunty index

蒙医学依据人体先天构成的“三根（赫依、希拉、巴达干）”的各自所占比例的不同，将人的体质特性分为赫依、希拉、巴达干分别为主的赫依体质特性、希拉体质特性、巴达干体质特性；赫依、希拉、巴达干两两为主的赫依-希拉混合型体质特性、巴达干-希拉混合型体质特性、巴达干-赫依混合型体质特性；赫依、希拉、巴达干三者相等的赫依、希拉、巴达干聚合型体质特性。由于体质特性的不相同，每个人的肤色、体态、性格、思维方式，对某种疾病的易感性、转归程度均有所不同。因此不同体质特性的人群罹患过敏性紫癜必定有其各自的特点和规律，并且过敏性紫癜是一种免疫相关性疾病，因此与免疫系统相关指标有密切关系。为阐明体质特性与过敏性紫癜的内在的联系，本课题预观察不同体质特性过敏性紫癜的血清免疫指标。为从蒙医学理论角度阐明过敏性紫癜的发病机理，研发预防和治疗的方法奠定基础。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 搜集2010年1月至2010年12月内蒙古民族大学附属医院蒙医血液科、蒙医儿科、蒙医皮肤科门诊和住院患者中符合纳入标准并通过蒙医体质特性判定表判定的不同体质特性HSP患者各30例作为实验组，搜集与各体质特性患者相对应的正常人30例作为对照组。

1.2 研究方法 1）体质特性的判定。对实验组和对照组的所有受试者首先进行体质特性判定，填写蒙医学体质特性判定表。2）血清的收集与保存。对所有受试者早晨空腹采（实验组治疗前、治疗后各1次，正常对照组为1次）静脉血3 mL先在室温放置30 min，再置于37℃恒温水浴槽10 min，以3000 r/mim的速度离心10 mim后分离血清，每位受试者备50 μL血清20份装入离心EP管，存于-60℃冰箱内。3）免疫指标检测。血清收集完毕后对血清免疫学指标以酶标仪进行集中测试。具体步骤与方法如下。将试剂盒和血清从冰箱取出放置于常温之下30 min备用→对电热恒温培养箱进行预热→从试剂盒内取出标准品及其稀释液按要求分别配制5等倍数浓度的标准品备用→取出酶标包被板，96孔和48孔的A-1孔设为空白孔（其中不加酶标试剂和血清，其余各步骤均相同），96孔的B-1、C-1、D-1、E-1、F-1孔，48孔的B-1、C-1、D-1、A-2、B-2孔设为标准品孔按浓度梯度加入事先备好的5等不同倍数浓度的标准品各50 μL，其余各孔加入样本稀释液各40 μL，再加入待测样本各10 μL（最终测试样本是5倍稀释后的），以酶标板振荡器振荡30 s后置于37℃电热恒温培养箱内30 min→其间取出20倍稀释的洗涤液（96孔的30 mL，48孔的20 mL），以双蒸水稀释20倍备用→30 min后取出酶标包被板甩出液体、甩干，每孔加入350 mL洗涤液，振荡30 s甩出液体，在滤纸上用力拍杆。如此反复5次→除空白孔外每孔加入酶标试剂50 μL振荡30 s后置于37℃电热恒温培养箱内30 min→30 min后取出酶标包被板甩出液体、甩干，每孔加入350 mL洗涤液，振荡30秒甩出液体，在滤纸上用力拍杆。如此反复5次→每孔先加显色剂A 50 μL（此时变为蓝色），再加显色剂B 50 μL振荡30 s后置于37℃电热恒温培养箱内10 min→取出酶标包被板每孔加入终止液50 μL（此时立刻从蓝色变为黄色）→15 min以内，以空白孔调零，在450 nm波长下用酶标仪测出每个孔的OD值（吸光度），根据标准品浓度和对应的OD值计算出标准曲线直线回归方程，再根据样本OD值以回归方程计算出每个样本的浓度（因样本事先以5倍稀释，最终浓度应乘以5倍）。

1.3 统计学处理 检验各组间患者年龄分布是否存在差异性时使用t检验，检验各组间患者性别是否存在差异性使用χ2检验；各组间及组内免疫学指标IgA、IgG、IgM、IgE、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6对比分析采用“秩和检验”。

2 结 果

未搜集到“赫依”和“巴达干”单一体质特性患者以及“聚合”型体质特性患者。“巴达干-赫依”体质特性患者仅2例，“希拉”体质特性患者1例，所未将以上体质特性患者纳入统计处理，而只对“赫依-希拉”和“巴达干-希拉”体质特性患者进行了统计处理。

2.1 人口学信息 见表1。各组间不同年龄、不同性别患者与正常人群的分布差异无统计学意义（P＞0.05）。2.2 免疫学指标的分析 见表2。结果表明赫依-希拉型、巴达干-希拉型正常组间IgG、IgM、IL-4、CD4+T、CD8+T具有显著性差异（P＜0.05），其中赫依-希拉正常组的IgG、CD4+T、CD8+T小于巴达干-希拉正常组，而IgM、IL-4大于巴达干-希拉正常组 （P＜0.05）。赫依-希拉实验组（治疗前）与赫依-希拉正常组间IgA、IgM、IgE、IL-4、CD4+T、CD8+T具有显著性差异 （P＜0.05），其中赫依-希拉型体质实验组的IgA、IgM、IgE、 IL-4均小于正常组，而CD4+T、CD8+T实验组的大于正常组（P＜0.05）。赫依-希拉正常组和而赫依-希拉型体质、巴达干-希拉型体质实验组治疗前后组间及组内对比各项免疫指标差异无统计学意义（P＞0.05）；赫依-希拉型体质和巴达干-希拉型体质正常组间各项免疫学指标差异无统计学意义（P＞0.05）。

表1 各组人口学信息

表2 各组免疫学指标水平比较（±s）

表2 各组免疫学指标水平比较（±s）

组别 时间 IgG IgM IL-4 CD4+T CD8+T IgA IgE CD4/CD8巴达干-希拉实验组 治疗前 49.30±16.69 26.37±47.31 101.75±85.94 92.38±42.00 59.31±32.26 42.04±25.69 23.68±20.59 1.63±0.38 （n=9） 治疗后 71.97±54.83 17.35±36.86 82.68±85.42 98.44±38.17 63.63±35.11 40.86±33.51 24.13±21.98 1.75±0.76巴达干-希拉正常组 治疗前 156.28±201.61 121.01±243.97 208.78±339.50 144.11±102.10 121.38±100.53 104.23±137.62 53.16±79.99 1.26±0.28 （n=26） 治疗后赫依-希拉实验组 治疗前 71.89±64.85 31.33±49.65 111.05±96.57 93.94±48.67 63.18±36.10 44.67±32.98 29.82±24.10 2.10±2.87 （n=29） 治疗后 116.20±150.64 47.23±120.89 100.22±169.76 119.57±83.37 74.73±71.95 56.21±73.21 33.15±34.84 1.85±0.63赫依-希拉正常组 治疗前 95.42±114.57 135.46±186.85 284.51±284.93 72.36±74.36 58.42±73.44 104.85±131.11 53.40±55.08 1.80±1.09 （n=27） 治疗后

3 讨 论

体质是人类生命活动的重要表现形式，生理状态下表现为对外界刺激的反应和对环境的适应性，病理状态下可表现为对某些疾病的易患性和疾病转归的某些倾向性。因此体质与疾病和健康密切相关［1］。产生过敏性疾病的根源在于患者的过敏体质，所以治疗过敏性疾病关键在于调整过敏体质［1］。过敏体质是在禀赋遗传基础上形成的一种特异体质［2］。蒙医学自古就非常重视体质特性与疾病的关系，并且认为体质特性对于疾病的发生、诊断及用药方面起着非常重要的指导作用。蒙医学体质特性的定义是人体在生理学和心里学方面先天形成的稳定的特性，依据人的肤色、体态、胖瘦、胃肠消化功能、好恶寒热情况、动作、智力情况、性格、睡眠状况等9条总体表现分为赫依、希拉、巴达干单纯体质特性，赫依-希拉、巴达干-希拉、巴达干-赫依混合型体质特性，赫依、希拉、巴达干聚合型体质特性等7种类型［7］。目前蒙医学界还尚未开展体质特性与HSP的相关性研究。对与HSP的研究主要还是集中在药物疗效的观察上［3-6］，证实了其疗效的可靠性和安全性。但有待从蒙医学理论角度结合现代先进的研究方法，阐明HSP的发病机制，为从根本上防治HSP提供科学依据。为此本课题率先从蒙医体质特性角度观察HSP患者血清免疫学指标IgA、IgG、IgM、IgE、CD4+T、CD8+T、CD4+T/CD8+T、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6的特征性变化，试着阐明不同体质特性HSP患者上属血清免疫指标变化的异同，寻求体质特性与HSP以及免疫指标三者之间的内在联系及其规律所在。同时阐明不同体质特性HSP患者转归时免疫指标变化的异同和规律性。就其结果进行如下讨论。

第一，自2010年1月至2010年12月搜集的自然就诊的患者当中赫依-希拉、巴达干-希拉、巴达干-赫依混合型体质特性患者分别为27例 （71.05%）、8例（21.05%）、2例（5.26%）、希拉体质特性患者仅遇到1例（2.64%），其余3种体质特性患者均未遇到。而正常人群中体质特性的构成比［16］是赫依-希拉体质特性者占41.39%、巴达干-希拉体质特性者占19.04%、希拉体质特性者占15.40%、巴达干-赫依体质特性者占9.60%、赫依体质特性者占8.11%、巴达干体质特性者占5.96%、聚合型体质特性者占0.55%。对比以上两组数据发现可能因某种体质特性正常人群所占比例高所以发生HSP的概率也高，换言之发生HSP的概率与蒙医体质特性无关。但这也有可能是一种偶然的巧合事件，即易患HSP的体质特性正如本课题研究结果所示一样，但这需要通过流行病调查确定确切概率而进一步证实。如果是巧合据此可认为赫依-希拉体质特性人群更易发生HSP。就其原因从蒙医学理论角度分析与构成赫依-希拉混合型体质特性的“赫依”和“希拉”的特性直接相关。因为“赫依”具有“轻、动、躁”之特性，希拉具有“锐”之特性和“轻”之功能之特效。它们对机体的作用结果就是使人体对内外环境影响因子的敏感性加剧以及使发生于人体的疾病的反应性更加剧烈。然而从诱发HSP的物质来看，如：粉尘、花粉、毛发、海鲜、辣椒、动物内脏等都具有增盛“赫依”或“希拉”的某一种或几种特性之功能，并打乱其特性内在的平衡而发生HSP。这一点也能证明“赫依-希拉”体质特性人群易发HSP。就此结果可得以下几点启示：第一，“赫依-希拉”体质特性人群是不是所有过敏性疾病的易发人群，是否就是过敏体质人群；第二，人体发生过敏反应的根源是否就是由于构成人体的“三根”之“轻、动、躁、锐”之特性过度增盛所致；第三，所有诱发过敏反应的物质是否都具有“轻、动、躁、锐”之效能之共性；第四、临床上治疗和护理HSP时在方药、疗术、饮食、起居方面应当注重与“轻、动、躁、锐”相反之效能。

从免疫指标的研究结果来看，正常的赫依-希拉与巴达干希拉混合型体质特性人群之间就存在免疫指标的差异，赫依-希拉混合型体质特性人群的IgG、CD4+T、CD8+T明显低于巴达干-希拉混合型体质特性人群。因为IgG是人体再次免疫应答的主要抗体，是机体抗感染的“主力军”。而T淋巴细胞是参与细胞免疫的主要细胞。CD4+T和CD8+T细胞相互诱导、相互制约，调节正常免疫功能。正常情况下T细胞亚群各组分之间的动态平衡是维持免疫系统内环境稳定的一个中心环节。由此可见赫依-希拉混合型体质特性人群的抗感染能力和细胞免疫能力均低于巴达干-希拉混合型体质特性人群。并且罹患HSP的赫依-希拉混合型体质特性患者的IgA、IgM、IgE、IL-4均低于正常组，而CD4+T、CD8+T高于于正常组。而巴达干-希拉混合型体质特性过敏性紫的CD8+T低于正常组，CD4+T/ CD8+T高于正常组。由此可见赫依-希拉混合型体质特性HSP免疫功能紊乱较巴达干-希拉混合型体质特性患者严重。这又从反方向证实了赫依-希拉混合型体质特性人群相对易患HSP的可能性。

第二，赫依-希拉、巴达干-希拉混合型体质特性正常组间免疫指标为什么会出现显著性差异？按常规思维似乎不合乎情理。但我们纵观人体各类生理客观指标，它本身就是一个值的范围，且正常参考值的低值和高值的跨度非常大。这是因为人类存在着个体差异，因民族、地域、性别、年龄等诸多因素就一种生理指标来说都可能出现不同的参考范围。因为本课题研究的两种体质特性人群是按蒙医学体质特性理论，依据客观量化指标分类的两组有着先天形成的各自独特生理活动的群体。与以上提到的民族、性别、年龄等分类因素相似的又一种分类方法，因此在免疫学指标方面形成各自独有的特征是完全有可能的。再者本课题的研究结果中赫依-希拉、巴达干-希拉混合型体质特性实验组间各免疫指标未出现显著性差异是因为此两种体质特性正常人群本身就存在着免疫指标的差异，患病后无差异并不是表明两组间免疫指标方面的患病特征的相同，而是表明存在很大的差异性。本课题因时间、人力、物力等因素的限制，未对此两种体质特性人群的免疫指标进行大样本检测，仅此课题的研究结果还不足以证实两种体质特性人群总体的免疫指标特征。但也足以启示我们开展更进一步的研究。

第三，本课题的研究结果表明赫依-希拉混合型体质特性HSP的IgA、IgM、IgE、IL-4均低于相应体质特性的正常组，而CD4+T、CD8+T高于正常组。巴达干-希拉混合型体质特性HSP的CD8+T低于相应体质特性正常组，而CD4+T/CD8+T低于正常组。那么其原因何在呢？从现代医学HSP与免疫指标的相关性研究结果来看，HSP急性期患儿的血清IgA显著增高，血清中可测出含IgA的循环免疫复合物，90%以上病例肾小球毛细血管壁、系膜区和皮肤小血管壁有IgA免疫复合物沉积［8］。但另外有学者研究提示IgA在血管壁的沉积是非特异性的，而且部分HSP患者血管壁无IgA沉积［9］。因为IgA参与黏膜局部免疫，在局部抗感染中发挥重要作用，被称作机体抗感染的“边防军”［15］，且以分泌型IgA的作用为主，因此对IgA分泌细胞的检测也显得非常重要。再者HSP患儿的血清IgE也普遍升高，并证实皮肤的朗格汉斯细胞可见IgE的沉积［10］。且IgE水平增高的HSP患儿免疫病理损伤以皮肤紫癜为主。而对关于HSP患者IgG和IgM的变化目前尚无一致结论。HSP与T细胞相关性研究表明HSP发病与T细胞亚群功能紊乱有关。有研究显示［11-12］HSP患者的，CD4+T淋巴细胞数量降低，CD8+T淋巴细胞数量增高，CD4+T/CD8+T比值降低，与正常对照组有显著性差异。但目前HSP患儿T细胞亚群功能紊乱引起HSP的发病机制仍未明确，并有文献报道［13］正常人群及HSP患者中CD3+、CD4+及CD8+T细胞数值的变异范围较大，彼此之间有重叠之处，判断某一个体T细胞亚群是否正常较困难。由以上的研究结果可以推断赫依-希拉混合型体质特性HSP免疫指标的变化特征可能是由于患病初期IgA、IgM、IgE、IL-4（因为IL-4是促进IgE分泌的，所以IgE升高有可能也意味着IL-4的升高）都是普遍升高的，但由于CD4+T、CD8+T都具有间接或直接的免疫负调节作用，从而检测的结果可能显示IgA、IgM、IgE、IL-4、IgM、IgE、IL-4普遍下降。为了进一步证实，有待对HSP进行动态免疫指标检测研究。但也有中医学HSP易患儿体质与体质液的相关性研究表明肺脾质、肺肾质患儿血清IgA和肺脾质分泌IgA均低于均衡质，表明易患儿IgA的功能降低。脾肾质患儿IgG降低表明疾病已影响到全身抗感染能力［14］。由此可推断赫依-希拉混合型体质特性HSP免疫指标的变化可能就是一种客观存在的结果。是此体质特性HSP患者所固有的免疫指标特征。但有待大样本的验证。

而巴达干-希拉混合型体质特性HSP的发生可能是因CD8+T介导的细胞免疫功能低下而导致T细胞亚群的细胞免疫功能紊乱所致。但这是不是巴达干-希拉混合型体质特性HSP这一总体所特有的免疫指标变化特征，还有待进一步验证。在本课题的研究结果中未观察到两种体质特性HSP患者转归时的免疫指标的显著性变化，有可能是因观察时间短（14±2）d的原故，有待延长观察时间或分期观察而阐明其变化特征。

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Research of Correlated Seroimmunological Indexes Changes about Henoch-Schonlein Purpura in Different Physique Characteristics

Wuritunashun，Burenbatu；GONG Cuiqin，et al.Affiliated Hospitaljnner Mongolia University for Nationalities，Inner Mongolia，Tongliao 028007，China

R554+6 文献标志码：A

1004-745X（2016）08-1503-05

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.08.014

内蒙古自治区医疗卫生科研计划项目（200305）

（电子邮箱：mmbrbt8989@yeah.net）

2016-04-24）