某院主要革兰阴性菌分布及耐药性5年动态变化

陈肖华（CHEN Xiao-hua），刘 卫（LIU Wei），蒋连强（JIANG Lian-qiang），凌宙贵（LING Zhou-gui）（广西医科大学第四附属医院，广西柳州 545005）（Fourth Affiliated Hospital，Guangxi Medical University，Liuzhou 545005，China）

某院主要革兰阴性菌分布及耐药性5年动态变化

陈肖华（CHEN Xiao-hua），刘 卫（LIU Wei），蒋连强（JIANG Lian-qiang），凌宙贵（LING Zhou-gui）
（广西医科大学第四附属医院，广西柳州 545005）
（Fourth Affiliated Hospital，Guangxi Medical University，Liuzhou 545005，China）

目的 了解常见革兰阴性（G—）菌菌群分布及耐药性变化，为临床合理使用抗菌药物提供可靠依据。方法 采用回顾性调查方法，分析某院2009—2013年临床标本分离的主要G—菌及其耐药性。结果 临床分离的主要G—菌数由2009年的1 189株增加至2013年的2 364株，常见居前4位的G—菌依次为大肠埃希菌3 331株（37.38%）、肺炎克雷伯菌1 623株（18.22%）、铜绿假单胞菌1 566株（17.58%）、鲍曼不动杆菌1 057株（11.86%）。2009—2013年产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌检出率分别为47.84%（144/301）、56.90% （301/529）、59.49%（395/664）、55.05%（469/852）、52.49%（517/985）；产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率分别为35.68%（76/213）、41.00%（139/339）、36.75%（122/332）、41.78%（155/371）、36.96%（136/368）。产ESBLs大肠埃希菌耐药率较高，对大多数抗菌药物的耐药率＞50%；产ESBLs肺炎克雷伯菌对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦较敏感。铜绿假单胞菌对氨基糖苷类、喹诺酮类、头孢吡肟、头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦保持较强的抗菌活性，耐药率＜20%；鲍曼不动杆菌对喹诺酮类、氨基糖苷类、头孢吡肟耐药率均＞40%，5年间耐药趋势变化不大。结论 该院G—杆菌耐药性强且多重耐药，必须加强合理使用抗菌药物，预防感染。

病原菌；抗药性，微生物；耐药性；抗菌药物

近年，随着抗菌药物的广泛及不合理应用，细菌耐药率不断升高，且细菌对抗菌药物的耐药性地区差异大。本研究对某院5年分离的革兰阴性（G—）菌分布及其耐药性进行回顾性动态分析，为指导临床合理应用抗菌药物提供可靠依据。

1　对象与方法

1.1对象 收集2009年1月—2013年12月某院临床送检的各类标本，按常规方法培养分离。质控菌株为大肠埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.2方法 对菌株进行鉴定，同时进行药物敏感性测定，药敏检测方法为微量稀释法测定最低抑菌浓度（MIC），受检细菌的菌液浓度为0.5麦氏单位，结果参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）标准对抗菌药物进行耐药（R）、中介（I）或敏感（S）判读。采用复合纸片法检测是否产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）。测试抑菌环直径，对高度怀疑产ESBLs的菌株进行确认试验。比较头孢他啶、头孢噻肟在有/无克拉维酸时，对待测菌的抑菌效果，两种药物中任何一种含酶抑制剂药物的抑菌环与其单药的抑菌环相比≥5 mm，即判定为ESBLs阳性。

1.3主要仪器和试剂 美国德灵（DADE BEH-RING）公司的MicroScanAutoScan-40半自动微生物鉴定仪和药敏系统，以及配套Negative Combo Panel Type21（NC21测试板）和Positive Combo Pane Type11（PC11）。

1.4数据分析 原始数据应用世界卫生组织（WHO）细菌耐药性检测网提供的WHONET5.0软件以及SPSS 19.0统计软件进行分析，计数资料采用χ2检验和线性趋势χ2检验，P≤0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1主要G—菌检出情况 共检出G—菌8 910株，2009—2013年检出的G—菌依次为1 189、1 547、1 701、2 109及2 364株。居前4位的G—菌依次为大肠埃希菌3 331株（37.38%）、肺炎克雷伯菌1 623株（18.22%）、铜绿假单胞菌1 566株（17.58%）、鲍曼不动杆菌1 057株（11.86%）。2009—2013年大肠埃希菌在G—菌中所占比例，呈逐年上升趋势（χ2=91.615，P＜0.001）；2009—2013年铜绿假单胞菌在G—菌中所占比例，呈下降趋势（χ2=42.517，P＜0.001）。见表1。

表1　2009—2013年某院G—菌分布情况（株数，%）

2.2主要G—菌耐药情况

2.2.1大肠埃希菌 2009—2013年临床分离的大肠埃希菌中产ESBLs菌检出率依次为47.84% （144/301）、56.90%（301/529）、59.49%（395/664）、55.05%（469/852）、52.49%（517/985）。产ESBLs大肠埃希菌耐药率均高于非产ESBLs大肠埃希菌；产ESBLs大肠埃希菌对大多数抗菌药物的耐药率＞50%，对亚阿培南高度敏感，耐药率为0。各年度产ESBLs大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、左氧氟沙星、阿米卡星、妥布霉素、复方磺胺甲口恶唑耐药率比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），对其余抗菌药物的耐药率变化差异均无统计学意义（均P＞0.05）。非产ESBLs大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星、亚胺培南的耐药率均＜10%。各年度非产ESBLs大肠埃希菌对亚胺培南、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、妥布霉素、复方磺胺甲口恶唑、头孢吡肟的耐药率比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。

2.2.2肺炎克雷伯菌 2009—2013年产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率依次为35.68%（76/213）、41.00%（139/339）、36.75%（122/332）、41.78%（155/371）、36.96%（136/368）。2013年产ESBLs菌对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦较敏感，耐药率均＜10%。5年间产ESBLs肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星、环丙沙星、头孢他啶、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素、复方磺胺甲口恶唑和阿米卡星的耐药率比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。非产ESBLs肺炎克雷伯菌株对哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南和阿米卡星较敏感，耐药率均＜10%。见表3。

2.2.3铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌 铜绿假单胞菌对氨基糖苷类、喹诺酮类、头孢吡肟、头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦保持较强的抗菌活性，耐药率均＜20%。5年间铜绿假单胞菌对氨基糖苷类、头孢他啶、亚胺培南、环丙沙星的耐药率比较，差异无统计学意义（均P＞0.05），对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率呈逐年下降趋势（P＜0.001）。5年中鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率有统计学意义，呈逐年上升趋势（χ2=221.888，P＜0.001）。2009—2013年鲍曼不动杆菌对喹诺酮类、氨基糖苷类、头孢吡肟耐药率均＞40%，耐药趋势变化不大（均P＞0.05）；对头孢他啶的耐药率呈上升趋势（均P＜0.05）。详见表4。

表2　2009—2013年某院大肠埃希菌耐药率（%）

表3　2009—2013年某院肺炎克雷伯菌耐药率（%）

表4　2009—2013年某院铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌耐药率（%）

3　讨论

连续5年该院常见G—菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌，与文献［1—2］报道的最常见G—菌相同，次序略有不同。临床分离的主要G—菌由2009年的1 189株增加至2013年的2 364株，2009—2013年大肠埃希菌在G—菌中所占比例，呈逐年上升趋势（P＜0.001）。

2009—2013年1 826株产ESBLs大肠埃希菌药敏试验结果显示，其对左氧氟沙星、环丙沙星的活性较差，耐药率＞50%，对加酶抑制剂复方制剂、碳青霉烯类、阿米卡星等耐药率较低（＜15%），对亚胺培南高度敏感。非产ESBLs大肠埃希菌对多数抗菌药物敏感，但对左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率＞28%，可能与近年该院临床广泛应用或滥用喹诺酮类药物有关。除碳青霉烯类、β-内酰胺酶抑制剂复合物、阿米卡星外，产ESBLs肺炎克雷伯菌对其他药物敏感率相对较低，尤其对头孢菌素、氟喹诺酮类药物的耐药率较高，因此，临床需按药敏结果慎重选药，建议产ESBLs的肺炎克雷伯菌不宜选用头孢菌素、氟喹诺酮类药物。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产ESBLs菌总检出率分别为54.82%（1 826/3 331）、38.69%（628/1 623），略低于文献报道［3—4］。铜绿假单胞菌耐药机制较多，其多重耐药性已成为患者反复感染及医院感染的常见原因之一。2009—2013年铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率为7.02%～11.40%，较2011年卫生部细菌耐药监测网的耐药率（24.8%）低［5］。2009—2013年铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率呈逐年下降趋势（P＜0.001）；对大多数抗菌药耐药率＜20%，低于文献报道［6—8］，这可能与不同地区、不同医院对抗菌药物的限制使用有关。由于铜绿假单胞菌对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、第一/二代头孢菌素、头孢噻肟、头孢曲松、萘啶酸、甲氧嘧啶等具天然耐药性，药物敏感试验的报告中已剔除了以上天然耐药的药物。鲍曼不动杆菌对抗菌药物耐药性普遍较高，对左氧氟沙星、妥布霉素、头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、复方磺胺甲口恶唑的耐药率＞45%；对亚胺培南抗菌药物的耐药率上升至51.23%，超过2011年全国细菌耐药监测网发布的耐药率（49.50%）［5］，给临床感染治疗带来巨大困难。因此，临床需要关注常见G—菌耐药性，合理应用抗菌药物。

［1］ 王辉，侯万乐，龚志伟.医院感染革兰阴性杆菌的分布及耐药性分析［J］.中华医院感染学杂志，2010，20（3）：414—416.

［2］ 鲁艳.医院感染革兰阴性杆菌的分布及耐药性调查分析［J］.中华医院感染学杂志，2012，22（2）：383—385.

［3］ 李德保，任冬梅，田春梅.2008—2010年某院临床主要病原菌分布及耐药性变迁［J］.中国感染控制杂志，2013，12（1）：54—58.

［4］ 杨启文，王辉，徐英春，等.2009年中国13家教学医院院内感染病原菌的抗生素耐药性监测［J］.中华检验医学杂志，2011，34（5）：422—430.

［5］ 薛峰，吕媛.卫生部全国细菌耐药监测网2011年度非ICU住院感染患者细菌耐药监测［J］.中国临床药理学杂志，2012，28 （12）：910—915.

［6］ 孙迪迪，张亚琴，杨雪华.647株医院感染病原菌分布及耐药性分析［J］.中国感染控制杂志，2008，7（2）：132—174.

［7］ 李露池，沈晖.某三级综合医院多重耐药菌临床分布［J］.中国感染控制杂志，2014，13（4）：242—245.

［8］ 沈萍，魏泽庆，陈云波，等.Mohnarin 2011年度报告：非ICU住院患者细菌耐药性监测［J］.中华医院感染学杂志，2012，22 （24）：5477—5487.

（本文编辑：左双燕）

5-year dynamic changes in distribution and antimicrobial resistance of gram-negative pathogens in a hospital

R181.3+2

B

1671—9638（2016）04—0277—04

10.3969/j.issn.1671-9638.2016.04.015

2015—06—12

广西壮族自治区卫生与计划生育委员会科研课题（Z2014380）

陈肖华（1985—），女（汉族），广西壮族自治区柳州市人，主治医师，主要从事细菌耐药性监测及抗菌药物合理使用研究。

陈肖华 E-mail：qinqingshuok@163.com