HPLC法测定贝诺酯分散片的含量

程　正，尤昱州，邢建辉，刘　虎

(1 安徽省铜陵市食品药品检验中心，安徽　铜陵　244000；2 安徽中医药大学，

安徽　合肥　230038；3 安徽安科恒益药业有限公司，安徽　铜陵　244000)



HPLC法测定贝诺酯分散片的含量

程正1,2，尤昱州1，邢建辉1，刘虎3

(1 安徽省铜陵市食品药品检验中心，安徽铜陵244000；2 安徽中医药大学，

安徽合肥230038；3 安徽安科恒益药业有限公司，安徽铜陵244000)

建立了HPLC法测定贝诺酯分散片的含量。采用Ultimate XB-C18(250 mm×4.6 mm×5 μm)色谱柱，甲醇:水(60:40)为流动相，检测波长为240 nm，柱温为30 ℃，流速为1.0 mL/min。结果显示，贝诺酯在4.96～118.92 μg/mL浓度范围内线性关系良好，r=0.99989，平均回收率为99.47%，RSD为0.21%(n=6)。该方法具有操作简便、结果准确的优点，可用于贝诺酯分散片的质量控制。

HPLC法；贝诺酯分散片；含量测定

贝诺酯为对乙酰氨基酚和阿司匹林的酯化产物，是新型抗炎、解热镇痛药。主要用于类风湿性关节炎、急慢性风湿性关节炎、风湿痛、感冒发烧、头痛、神经痛及术后疼痛等[1]。由于贝诺酯在水中的溶解性差，其普通口服制剂起效慢，生物利用度低。分散片吸收快，生物利用度高，服用方便，尤其适合老、幼和吞服固体困难的患者[2]。现行国家标准[3]中含量测定为紫外-可见分光光度法。为了进一步提高完善该品种质量标准，本文成功建立了用HPLC法测定贝诺酯分散片的含量。该方法操作简便、结果准确，可以作为贝诺酯分散片的鉴别和含量测定用。

1　实验部分

1.1仪器与试药

1.1.1仪器

UltiMate3000高效液相色谱仪，Thermo scientific；DAD检测器；Chromeleon 7工作站；TU-1901紫外-可见分光光度计，北京普析通用；XS105DU电子天平，梅特勒托利多。

1.1.2试药

贝诺酯分散片(0.2 g)，安徽某厂(批号：131201、140201、140202)；贝诺酯对照品,中国食品药品检定研究院(批号：100225-201303)；甲醇(色谱纯)；水为重蒸水。

1.2实验方法

1.2.1色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Ultimate XB-C18(250 mm×4.6 mm×5 μm)，流动相：甲醇-水(60:40)，检测波长：240 nm，柱温：30 ℃，流速：1.0 mL/min；进样量10 μL；理论板数按贝诺酯对照品峰计算不低于3000[4-6]。

1.2.2对照品溶液

分别精密称取105 ℃干燥2 h的贝诺酯对照品，用甲醇溶解，制成每1 mL中含495.5 μg/mL的溶液，作为对照品贮备液。精密量取贮备液5 mL，置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

1.2.3供试品溶液

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于贝诺酯0.1 g)，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得。

1.2.4阴性对照溶液的制备

按处方组成比例及工艺要求，取其他成分制成阴性对照供试品，再按供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。

2　结果与讨论

2.1峰纯度检查和检测波长的确定

分别取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液，注入液相色谱仪，按“2.1”项下条件测定，以DAD检测器在200～400 nm波长处记录紫外吸收图，图示贝诺酯在240 nm的波长处有最大吸收，故选择240 nm作为检测波长。经峰纯度检查，色谱图中贝诺酯主峰为一纯物质峰。如图1和图2。

图1　紫外光谱图

图2　HPLC色谱图

2.2线性关系

精密吸取对照品贮备液0.5、1、3、5、7、9、12 mL，分别置50 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，照上述色谱条件测定，记录色谱图，以主成份峰面积A为纵坐标，进样浓度C(mg/mL)为横坐标，绘制标准曲线。结果显示贝诺酯在所选浓度范围内线性关系良好。结果见表1。

表1　线性关系试验

2.3精密度试验

精密吸取对照品溶液，重复进样6次，进样量10 μL，分别测定贝诺酯的峰面积，RSD为0.09%，表明精密度良好。结果见表2。

表2　精密度试验

2.4重复性试验

取同一批号(140202)供试品6份，按供试品溶液制备方法处理，在上述色谱条件下测定，平均含量为100.29%，RSD为0.81%，表明本法重复性良好，结果见表3。

表3　重复性试验

注：平均片重=0.4127 g。

2.5稳定性试验

取制备好的供试品溶液(140202)，在上述色谱条件下测定，每间隔4 h测定色谱峰面积，RSD为0.45%，表明供试品溶液在24 h内基本稳定，结果见表4。

表4　稳定性试验

2.6回收率试验

取已知含量的供试品(140202)，共6份，精密称定，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取5 mL，置50 mL量瓶中，加对照品贮备液2 mL，加甲醇稀释至刻度，在上述色谱条件下测定，平均回收率为99.47%，RSD为0.21%。结果见表5。

表5　回收试验结果

2.7供试品含量测定

分别取上述3批贝诺酯分散片供试品，按上述方法及条件测定。按外标法计算贝诺酯的标示量的百分含量，同时用紫外-可见分光光度法测定上述供试品，两法测得结果比较，结果见表6。

表6　供试品含量测定结果(n=3)

2.8讨论

已有文献对流动相进行了试验，当甲醇-水系统pH值在4.5以下和4.5以上时，主峰峰形差别不大，满足分析要求，且甲醇-水系统即能满足实验要求，无需使用缓冲盐或离子对试剂[7-8]。

原质量标准采用的是紫外分光光度吸收系数测定法测定组分含量，专属性不强，误差也较大；且笔者在日常实验中曾发现不同厂牌的乙醇溶剂检查结果不同。因原质量标准没有使用对照品法进行校正，所以若溶剂紫外吸收过大，则对本品含量测定结果有一定的影响。

3　结　论

本文采用HPLC法测定贝诺酯分散片的含量，取得了较为满意的结果，同时还可提高鉴别的专属性，方法快速、简便、准确、专属性强，可为贝诺酯分散片的质量标准提高提供参考。

[1]郑虎.药物化学.4版[M].北京:人民卫生出版社,2001:470.

[2]张华,许玉华,王晓娜,等.贝诺酯分散片的制备及质量控制[J].中国药业,2011,20(18):38-40.

[3] WS1-(X-043)-2006Z 国家药品标准新药转正标准:第70册[S].

[4]陈庆先,朱晶,刘鹏飞,等.HPLC法测定小儿贝诺酯散中贝诺酯的含量[J].中国医药指南,2011, 29(09):236-237.

[5]张涛.高效液相色谱法测定贝诺酯颗粒的含量[J].中国医药导报,2009, 26(6):44-45.

[6]中国药典:二部[S].2015:76.

[7]晁若冰,陈涛.RP-HPLC法测定贝诺酯及其有关物质[J].药学学报,1999,34(10):782-785.

[8]陈秀琳,林梅玉.HPLC法测定小儿复方贝诺酯片中贝诺酯的含量[J].海峡药学,2002,14(3):27-29.

Determination of Benorilate Dispersible Tablets by HPLC

CHENGZheng1,2,YOUYu-zhou1,XINGJian-hui1,LIUHu3

(1 Tongling Institute for Food and Drug Control,Anhui Tongling 244000;2 Anhui University of Chinese Medicine,Anhui Hefei 230038;3 Anhui Ankehengyi Pharmaceutical Co.,Ltd., Anhui Tongling 244000, China)

A method for determination of Benorilate Dispersible Tablets by HPLC was established. Ultimate XB-C18column(250 mm×4.6 mm×5 μm)was used, the mobile phases consisted of methanol and water(60:40),the detection wavelength was at 240 nm,the column temperature was 30 ℃,the flow rate was 1 mL/min. Results showed that the linear range of benorilate was at 4.96～118.92 mg/mL, r=0.99989.The average recovery was 99.47%. RSD=0.21%(n=6). The method was accurate.It could be used for determination of Benorilate Dispersible Tablets.

HPLC; Benorilate Dispersible Tablets;content determination

程正(1982-)，男，主管药师，主要从事食品药品检验研究。

R927.2

A

1001-9677(2016)03-0115-03