运脾消食颗粒对厌食症大鼠模型血清瘦素、锌含量影响的研究

杜晨光，徐丁洁，丁培杰，曹颖，郑彩慧，白素芬，柳月娟，董玉山

运脾消食颗粒对厌食症大鼠模型血清瘦素、锌含量影响的研究

杜晨光，徐丁洁，丁培杰，曹颖，郑彩慧，白素芬，柳月娟，董玉山

目的探讨运脾消食颗粒对厌食症大鼠模型血清瘦素、锌含量的影响。方法采用病因模拟法建立小儿厌食症动物模型，分别对模型大鼠摄食量、体质量以及血清瘦素、锌含量进行检测。结果第7天，模型组、小剂量组、大剂量组大鼠摄食量与正常组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01），摄食量平均下降23.6%。第1、7天，各组大鼠体质量差异均无统计学意义（均P＞0.05）；第14天，模型组与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05），大、小剂量组与模型组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）；第21、28天，大、小剂量组与模型组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与正常组比较，模型组血清瘦素、锌水平均显著降低（均P＜0.05）；与模型组比较，两个治疗组血清瘦素、锌水平与其差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论运脾消食颗粒对厌食症模型具有明显治疗作用，其发挥临床疗效的作用机制可能是通过调节血清瘦素、锌含量来实现的。

瘦素；锌；运脾消食颗粒；大鼠；厌食症模型

厌食症是临床中常见的小儿消化系统疾病，表现为非疾病因素而出现较长时期的见食不贪、食欲不振、甚则拒食，多见于1～6岁的儿童；城市发病率高于农村，一年四季均可发病，尤以夏末秋初多见。厌食症对小儿的生长发育、营养状况、智力发展均有影响。长期厌食，可使小儿摄取营养物质不足，不能满足迅速生长发育的需要，导致小儿营养不良、贫血、佝偻病及免疫力低下，出现反复呼吸道感染，严重影响小儿身体健康［1］。运脾消食颗粒为治疗厌食症的经验方，笔者导师焦平教授临床应用该方20余年，疗效肯定。本实验主要探讨瘦素、锌在小儿厌食症发病过程中发挥的作用及该药的治疗机制，为新药开发和临床安全用药提供一定的科学依据。现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1实验动物选用SPF级健康SD大鼠，日龄35～40 d，体质量（60±10）g，雌雄兼用，共48只。由天津山川红实验动物科技有限公司提供，合格证号：SCXK （2009-001）。

1.2主要药品及试剂运脾消食颗粒：由焦三仙、炒白术、半夏、陈皮、鸡内金、胡黄连及佩兰等中药组成。所需中药材均购自同仁堂药店，再由河北联合大学附属医院制剂室水煎浓缩，加辅料搅拌成膏，烘干粉碎，再用滚动制粒机制成颗粒，封装机分装成袋，每袋9克。Leptin放免试剂盒（北京科美东雅生物技术有限公司提供，批号20140525）。血清锌试剂盒（上海信裕生物科技有限公司提供，批号20140801）。

1.3特制高蛋白高脂饲料（以下简称特制饲料）用奶粉、鱼松、豆粉、玉米粉、白糖、鲜鸡蛋、鲜肥肉，按1∶1∶2∶1∶1∶2∶2比例配制，所用配料均购自家乐福超市。

1.4实验仪器放射免疫分析仪、半自动生化分析仪、台式高速低温离心仪、电子分析天平、常用手术器械及试管等。

1.5方法将48只SD大鼠适应性喂养3 d，然后随机分为正常组、模型对照组（简称模型组）、运脾消食颗粒小剂量组（简称小剂量组）、运脾消食颗粒大剂量组（简称大剂量组），每组12只。采用病因模拟法造模［2］，正常组用常规鼠饲料喂养，其他3组用特制饲料喂养。所有动物均单笼喂养，自由进食饮水，每天记录摄食量及体质量。以造模大鼠平均摄食量低于正常组20%～30%为造模成功。造模成功后，各组开始灌胃，1次/d，连续灌胃20 d。正常组和模型组灌服等体积（均为2 ml）蒸馏水，小剂量组和大剂量组分别灌服运脾消食颗粒12.5g· kg—1·d—1、25 g·kg—1·d—1。于末次给药后次日，断颈采全血2ml盛于一次性塑料试管内，每只试管采血前均按组做好标记。待4组大鼠采血完毕，将盛血的试管分别置于离心机中以3000 r/min离心15 min，取血清，—20℃保存待测。采用放免法检测瘦素含量，半自动生化分析仪检测锌含量。

1.6统计方法所有数据均采用均数±标准差表示，采用SPSS 16.0统计软件进行统计学分析，计量资料采用均数±标准差表示，采用单因素方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1各组动物摄食量、体质量变化比较

第1天，各组大鼠摄食量差异均无统计学意义（P＞0.05）；第7天，模型组、小剂量组、大剂量组大鼠摄食量与正常组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05），摄食量平均下降23.6%，而模型组、小剂量组、大剂量组大鼠摄食量3组差异无统计学意义（P＞0.05），造模成功。给药第14天，大、小剂量组与模型组的摄食量差异均无统计学意义（均P＞0.05）；第21、27天，大、小剂量组与正常组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表1。

第1、7天，各组大鼠体质量差异均无统计学意义（均P＞0.05）；第14天，模型组与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05），大、小剂量组与模型组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）；第21、28天，大、小剂量组与模型组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。2.2各组动物血清瘦素、锌含量变化比较与正常组比较，模型组血清瘦素、锌水平均显著降低（均P＜0.05）；与模型组比较，两个治疗组血清瘦素、锌水平与其差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表3。

表1　各组动物摄食量变化比较（=12）　g

表2　各组动物体质量变化比较（=12）　g

表3　各组动物血清瘦素、锌含量变化比较 （ =12）

3　讨论

治疗厌食症的关键在于运脾和胃、消食导滞。运脾消食颗粒是在中医理论指导下，结合长期临床经验和现代药理研究，在朱丹溪保和丸基础上加减化裁而来。其主要方药包括焦三仙、炒白术、半夏、陈皮、鸡内金、胡黄连及佩兰等。具有运脾和胃、消食化滞之功，经多年临床应用，对小儿厌食症疗效良好。方中焦三仙为消食化滞之要药；白术，燥湿和中，补脾益胃消食，与焦三仙共为君药，取其消补兼施之意。鸡内金，具有和胃健脾，宽中消食之作用。陈皮，有理气降逆，调中开胃之功效，善治中焦脾胃气滞湿阻之证。半夏，具有燥湿化痰，降逆止呕，消痞散结之功。以上三药，共为臣药，收行气化滞，健脾消食止呕之效。胡黄连可清小儿疳积之热，佩兰芳香化湿醒脾，共为佐使，辅助君、臣之药达运脾和胃、消食化滞之功［3］。该方消补并举，标本同治，补而不滞，消导而不伤正，故对厌食症有较满意的疗效。

本文结果显示，给药第14天，大、小剂量组与模型组的摄食量差异均无统计学意义（均P＞0.05），表明运脾消食颗粒开始显效；第21、27天，大、小剂量组与正常组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），这表明两组大鼠的摄食量已经恢复至正常水平。

本文结果还显示，第1、7天，各组大鼠体质量差异无统计学意义（P＞0.05）；第14天，模型组与正常组比较差异均有统计学院意义（均P＜0.05），大、小剂量组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05），说明运脾消食颗粒可促进营养物质的吸收，增加大鼠体质量；第21、28天，大、小剂量组与模型组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05），说明该药物能促使厌食大鼠体质量增加。

瘦素由脂肪细胞分泌进入血液循环，可与下丘脑饱食中枢的相关受体结合，抑制弓状核神经元合成和释放神经肤Y，降低食欲。同时，也可与POMC神经元上的相应受体结合，增加促黑激素（a-MSH）的释放，引起食欲降低，通过这两条通路，瘦素在中枢食欲抑制中起到了比较重要的作用［4］。根据瘦素的这一系列作用，可以推测厌食患者血清瘦素水平应该高于正常者，但本实验结果却恰恰与之相反，模型组大鼠瘦素水平明显低于正常组。因此笔者推测，实验大鼠瘦素水平的降低可以减少机体能量消耗，是机体在饥饿、消瘦状态下的一种应激性的自我保护，以此来保存能量，维持基本生命活动，说明其水平的变化可能不是厌食症的病因，而是厌食症的一种结果［5-6］。与模型组比较，运脾消食颗粒可提高模型大鼠血清瘦素水平，提示该药促进摄食的机制与其对瘦素的良性调节作用有关。

现代医学研究证明，儿童食欲正常与否与人体微量元素锌密切相关。正常人唾液中每分子味觉素含2个锌离子，体内锌缺乏时味觉素作用减弱，缺锌还可以引起舌黏膜增生和角化不全，阻塞味蕾小孔使味觉敏感度下降，从而引起厌食［7］。本次实验结果提示，模型组大鼠血清锌明显低于正常水平，治疗后，血清锌的含量增加，与临床研究结果一致，为治疗小儿厌食症提供了一定的实验依据。

［1］汪受传，虞坚尔.中医儿科学（全国中医药行业高等教育十二五规划教材）［M］.北京：中国中医药出版社，2013：134-137

［2］王海云，石君杰.开胃增食汤治疗厌食症模型大鼠作用机制研究［J］.中国中西医结合消化杂志，2013，21（3）：137-139.

［3］杜晨光，丁培杰，曹颖，等.运脾消食方对厌食症儿童唾液淀粉酶活性、血红蛋白含量影响的研究［J］.中国实验方剂学杂志，2013，19（12）：315-318.

［4］Meduffie JR，Riggs RA，Calis KA，et al. Effeets of exogenous leptin on satiety and satiation in patients with lipodystrophy andLeptinInsuffieieney［J］.JClinEndoerinol Metab，2004，89（9）：4258-4263.

［5］苏春伟，郑军，王晖.瘦素对能量代谢及儿童生长作用的研究进展［J］.医学综述，2015，21（1）：9-12.

［6］宋钦兰，姜萍，张佳琪，等.补脾与醒脾药物对饮食诱导肥胖大鼠瘦素抵抗的调节作用［J］.时珍国医国药，2015，26（1）：1-3.

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10.3969/j.issn.1671-0800.2016.07.010

R289.5

A

1671-0800（2016）07-0863-03

唐山市科技局指导项目（13130216b）；河北省中医药管理局指令项目（2014054）

063000河北省唐山，河北联合大学中医学院

董玉山，Email：dys6507 06@163.com

2016-03-05（本文编辑：姜晓庆）