金华地区婴幼儿病毒性腹泻流行病学分析

马拥军，陈真，胡少龙，郑雅萍，李小兵

金华地区婴幼儿病毒性腹泻流行病学分析

马拥军，陈真，胡少龙，郑雅萍，李小兵

目的了解1年中浙江省金华地区5岁以下儿童病毒性腹泻病原构成及流行病学特点。方法对822例5岁以下腹泻患儿进行粪便标本采集，利用多重片段分析方法对5种主要腹泻病毒进行检测。结果822例腹泻样本中检出阳性样本473例，检出率为57.5%，其中轮状病毒检出率为39.8%，诺如病毒检出率为21.4%，腺病毒检出率为9.6%，冠状病毒检出率为3.3%，星状病毒检出率为2.2%。不同性别各病毒感染率差异无统计学意义（P＞0.05）。6个月至2岁年龄段阳性检出率明显高于其他年龄段，差异有统计学意义（均P＜0.05）。轮状病毒与诺如病毒整年均可检出，其中轮状病毒在秋冬季节检出率高于春夏季（均P＜0.05）；诺如病毒夏季和秋季检出率高于春季和冬季（均P＜0.05）。结论引起婴幼儿腹泻的主要病毒是轮状病毒，高发期为秋冬季和夏秋季，且0～2岁为病毒性腹泻高发年龄段。

婴儿；幼儿；腹泻；病毒；流行病学

腹泻的发病率仅次于急性呼吸道感染，已受到WHO和各国政府的高度重视［1］，是发展中国家婴幼儿的常见病。80%婴幼儿腹泻是由病毒感染引起的，临床表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻伴全身症状，如果不能及时有效地进行治疗，身体脱水和体内电解质紊乱将可能引起死亡。因此探讨婴幼儿腹泻的流行病学特点，对于合理的预防和治疗，具有重要的意义。为系统掌握本地区病毒性腹泻的流行现状与特点，从而为病毒的防治与疫苗的研发提供指导依据。笔者对本院 822例粪便标本的 5种病毒进行检测，现将结果报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料收集2015年1—12月浙江省金华市中心医院5岁以下822例腹泻患儿的新鲜腹泻标本822份（822例患者），其中男506例，女316例，男女比例为1.6∶1。

1.2研究方法

1.2.1仪器与试剂GenomeLab GeXP遗传分析仪（A26572），购自美国贝克曼库尔特有限公司；粪便DNA/RNA提取试剂盒（20141117）（20150825），购自宁波重鼎生物技术有限公司。

1.2.2实验方法取100mg以上粪便，与0.9%氯化钠注射液按1：3比例（m/v）充分混匀后提取核酸。利用NCBI数据库设计5种腹泻病毒及内参的特异性引物；建立多重逆转录酶链式反应（mRTPCR）［2］体系：按照水（无核酸酶）605l，5×RT Buffer 220 l，RT primer mix 110 l配置RT预混液，按照10×PCR Buffer 110l，25 mmol/L MgCl2220l，DiaP PCR Primer mix 110 l，Solution×110 l配置PCR预混液，在20l反转录反应体系中加入5l待测核酸、14l RT预混液和1 l反转录酶，经过48℃1min，42℃60min，95℃5 min的孵育，将RT反应产物10.3l转移至PCR反应体系（9 l PCR预混液，0.7 LTaq聚合酶）。PCR扩增参数为94℃变性1 min后进入35个循环：94℃30 s；60℃30 s和70℃1 min，70℃延伸1 min。用GeXP遗传分析系统对PCR产物进行毛细电泳分离，从而对5种腹泻病毒进行鉴别。1.3统计方法采用SPSS 19.0软件进行统计分析，计数资料采用X2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1病毒检出率822例患者中473例检测结果阳性，其中轮状病毒阳性最多，其次为诺如病毒。见表1。

2.2病毒感染性别分布不同性别各病毒感染率差异无统计学意义（X2=0.878，P＞0.05）。见表2。

2.3病毒感染年龄分布6个月至2岁年龄段阳性检出率明显高于其他年龄段，差异有统计学意义（X2≥15.76，均P＜0.05）。见表3。

2.4病毒感染年龄分布2015年全年可见，轮状病毒与诺如病毒整年均可检出，其中轮状病毒在秋冬季节检出率均高于春夏季（X2≥22.29，均P＜0.05）；诺如病毒夏季和秋季检出率均高于春季和冬季（X2≥6.57，均P＜0.05）。见表4。

表1 各种病毒检出情况

表2　不同性别患儿病毒检查阳性检出率比较例（％）

表3　轮状病毒、诺如病毒阳性检出率年龄构成　例（%）

表4　轮状病毒、诺如病毒检出率

3　讨论

婴幼儿腹泻是婴幼儿期的一种胃肠道功能紊乱，以腹泻、呕吐为主的综合征［3］，而病毒性腹泻已经成为许多发展中国家婴幼儿死亡的主要原因之一。因此对婴幼儿腹泻患者进行病毒检测对于病毒性腹泻的诊断与及时治疗显得尤为重要。国内对不同病毒引起腹泻的流行病学报道较少，为了解不同病毒引起婴幼儿腹泻的重要性。本文收集了2015年5岁以下822例腹泻患儿的新鲜腹泻样本，同时对轮状病毒、诺如病毒、肠道腺病毒、冠状病毒、星状病毒5种病毒进行检测。共检出阳性样本473例，检出率为57.5%，混合感染93例，占11.3%，其中轮状病毒检出率为39.8%，诺如病毒检出率为21.4%，腺病毒检出率为9.6%，冠状病毒检出率为3.3%，星状病毒检出率为2.2%。因此在临床上遇到患儿腹泻，应充分考虑到病毒性腹泻的可能性，不应只考虑到细菌性腹泻，运用科学的检测方式可避免抗生素的滥用。

本次研究发现病毒性感染的男患儿人数多于女患儿，可能是由于腹泻就诊的男患儿多于女患儿所致，但性别因素在病毒感染率差异上并无统计学意义。轮状病毒仍是目前引起婴幼儿腹泻的最主要病原体，高发于秋冬季节，诺如病毒检出率仅次于轮状病毒，这与国内外多数报道相一致［4-6］，但本次调查发现诺如病毒在8、9月份检出率较高，这与北方地区所报道的流行时间相比靠前［7］，可能与南北方气候环境差异有关。在流行高发季节室内注意通风换气，勤洗手，注意饮食卫生。对患儿使用过的物品进行消毒，应少带孩子去公共场所，尤其是防止在医院发生交叉感染。针对这两大腹泻病毒，本研究发现6个月至2岁的婴幼儿病毒检出率最高，与我国其他地区研究报道结果一致［8］。这与婴幼儿本身免疫系统未发育完善，且此年龄段的婴幼儿正处于或已完成断奶，来自母体的获得性免疫在逐步消失有关。该统计可为疫苗接种年龄段提供参考。其余病毒由于病例数较少，是否具有明显的易感年龄段及季节性发病高峰还需要进一步观察研究。

［1］ ParasharUD，BreseeJS，GlassRI.The global burdenofdiarrhoealdiseaseinchildren ［J］.Bull World Health Organ，2003，81（4）：236.

［2］王琼，林广裕，高珺，等.应用GeXP遗传分析系统检测病毒性脑炎患儿脑脊液中的人类鼻病毒［J］.检验医学与临床，2015，12（13）：1828-1831.

［3］梁连锦.小儿腹泻病的治疗进展［J］.中外医学研究，2011，（23）：155-156.

［4］NguyenTA，YagyuF，OkameM，eta1.Diversityofvirusesassociatedwithacutegastroenteritisinchildrenhospitalizedwithdiarrhea inHoChi Minh City，Vietnam［J］.Med Virol，2007，79（5）：582-590.

［5］Parashar UD，Hummelman EG，BreseeJ S，et al.Global illness and deaths caused by rotavirus disease in children［J］.Emerging Infectious Diseases，2003，9（5）：565-572.

［6］Moreno S.Human caliciviruses and pediatric gastroenteritis.［J］.Seminars in PediatricInfectiousDiseases，2004，15（4）：237-245.

［7］吴疆，高志勇，刘桂荣，等.北京地区诺如病毒感染的流行病学调查［J］.中华流行病学杂志，2007，28（7）：667-670.

［8］方肇寅，谢华萍，吕红霞，等.1999～2005年我国婴幼儿人杯状病毒腹泻研究 ［J］.病毒学报，2007，23（1）：9-15.

10.3969/j.issn.1671-0800.2016.07.011

R725.7

A

1671-0800（2016）07-0865-02

金华市科技局重点项目（2013-3-011）

321000浙江省金华，金华市中心医院（马拥军、胡少龙、郑雅萍、李小兵）；宁波海尔施基因科技有限公司（陈真）

马拥军，Email：jhmyj71@ sina.cn

2016-04-01（本文编辑：姜晓庆）