复方安神胶囊中栀子苷的质量控制研究

杨宇峰，段秀俊，裴妙荣，刘娜娜

（山西中医学院，山西太原030024）

复方安神胶囊中栀子苷的质量控制研究

杨宇峰，段秀俊，裴妙荣，刘娜娜

（山西中医学院，山西太原030024）

目的：建立复方安神胶囊中栀子苷的质量控制方法。方法：采用高效液相色谱法（HPLC），色谱柱为Diamonsil C18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇－水（15∶85）；检测波长238 nm；流速1.0mL/min；柱温30℃。结果：栀子苷进样量在0.17μg～3.4μg范围为线性关系良好，r=0.999 95，平均加样回收率为100.01%，RSD=1.60%（n=6）。结论：该方法重现性好，专属性强，结果准确，可用于复方安神胶囊中栀子苷的质量控制。

复方安神胶囊；质量控制；栀子苷；HPLC

复方安神胶囊由夜交藤、酸枣仁、栀子、当归等药味组成，具有养肝、宁心、安神、敛汗作用，可用于治疗虚烦不眠、惊悸怔忡、烦渴、虚汗等。该胶囊是医院制剂，为了控制其质量，保证临床用药效果，实验建立了栀子活性成分栀子苷的HPLC含量测定方法，现报道如下。

1 实验材料

1.1 实验仪器

Waters2695高效液相色谱仪，METTLER（梅特勒）-AB135-S十万分之一电子分析天平［梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司］、Bs2245万分之一电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限责任公司）、KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 药物与试剂

复方安神胶囊（批号110614，110615，110617，规格0.5 g/粒，自制），阴性对照胶囊为自制。栀子苷标准品（供含量测定用，批号110749-200714）购自中国药品生物制品检定所。甲醇为色谱纯（天津四友精密化学品有限公司），水为哇哈哈纯净水，其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱为Diamonsil（钻石）C18柱（150mm× 4.6mm，5μm）；流动相为甲醇－水（15∶85）；检测波长238 nm；流速1.0mL/min；柱温30℃；理论塔板数以栀子苷峰计应不少于1 500。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备精密称定栀子苷对照品，加甲醇制成每1mL含0.136 mg的溶液，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备取本品内容物0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，超声处理（功率250W，频率40 kHz）30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备按复方安神胶囊的处方比例和生产工艺制备缺栀子的阴性胶囊，并按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液［1-6］。

2.3 专属性实验

分别精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，结果阴性无干扰，结果见图1。

图1 复方安神胶囊HPLC色谱图

2.4 系统适用性考察

2.4.1 线性关系考察取栀子苷对照品，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.34 mg的溶液，做为对照品母液，精密量取母液0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.8 mL、1.0 mL、1.6mL、2.0 mL储备液于2 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。分别吸取上述对照品溶液各10μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以栀子苷的进样量（μg）为横坐标，峰面积值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为Y=609 651X-3 590，（r=0.999 95），表明栀子苷在0.17μg~3.4μg进样范围内线性关系良好。

2.4.2 精密度实验精密吸取对照品溶液（0.136 mg/mL）10μL，重复进样6次，记录峰面积值，结果RSD为0.70%，表明方法精密度良好。

2.4.3 稳定性实验精密吸取同一供试品溶液，分别于0 h、2 h、4 h、8 h、10 h、12 h各进样10μL，记录峰面积值，结果RSD为1.44%，表明供试品溶液在12 h内稳定。

2.4.4 重复性试验取同一批号样品（批号110614） 6份，精密称定，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下方法进行测定，计算含量，结果平均含量为2.42mg/g，RSD为1.62%，表明方法的重复性良好。

2.4.5 加样回收率分别取已知含量的样品（批号110614）6份，每份0.25g，精密称定，分别精密加入栀子苷对照品适量，按2.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.1项下方法进行测定，计算回收率，结果见表1，表明方法的准确度良好。

表1 栀子苷加样回收率测定

2.4.6 样品测定取3批样品（批号110614，110615，110617），每批2份，测定样品中的栀子苷含量，结果见表2。

表2 样品中栀子苷含量测定

3 讨论

因苷类成分在中药化学成分中具有典型性与广泛性的特点，实验选择了栀子苷做为含量测定的指标性成分，选择甲醇-水做为流动相系统，对流动相比例进行了筛选，结果以甲醇：水为15∶85时分离效果良好，阴性无干扰。

栀子苷属环烯醚萜苷，对酸很敏感，其苷键极易被酸水解，生成的苷元很不稳定，在提取溶剂的选择及流动相的选择过程中应尽可能避免酸性，以防止对苷稳定性的影响。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：231.

［2］伏建峰，苏春，史清海，等.HPLC法测定栀子中栀子苷的含量［J］.西北国防医学杂志，2012，33（5）：501-503.

［3］严安定，张永，高建.RP-HPLC法同时测定不同品种栀子及栀子金花丸中栀子苷［J］.中成药，2012，34（5）：965-967.

［4］王伟影，范蕾.不同采收时期及干燥方法对栀子中栀子苷含量的影响［J］.中国药师，2012，15（6）：811-813.

［5］笔雪艳，刘晓凤，张清波.HPLC法测定清开灵泡腾片中栀子苷的含量［J］.中国药房，2011，22（3）：240-241.

［6］吴红娟，王清波，谭朝阳，等.不同来源栀子中栀子苷含量测定［J］.湖南中医药大学学报，2010，30（5）：35-37.

（编辑：翟春涛）

Study of the quality control of geniposide in Fufanganshen capsules

Yang Yufeng，Duan Xiujun，PeiMiaorong，Liu Nana
（Shanxi College of TCM，Taiyuan Shanxi030024）

Objective：To establish the methods for quality control of geniposide in Fufang anshen capsulse.Methods：HPLC was used at 30℃on a Diamonsil C18column（150mm x 4.6mm，5μm）.Themobile phase consisted ofmethanol and waters（15∶85）and the flow rate was 1.0 mL/min.Results：The linear relationship was good as the injection volume at 0.17μg～3.4μg，r=0.999 95，the average recovery rate was 100.01%，RSD=1.60%（n=6）.Conclusion：The method was highly reproducible，specific and accurate and can be used to control the quality of Fufanganshen capsule.

Fufang anshen capsule；quality control；geniposide；HPLC

R285.5

A

1671-0258（2016）06-0022-02

杨宇峰，助教，E-mail：18636173685@163.com

段秀俊，副教授，硕士生导师，E-mail：dxjzhyxy@163.com