健脾化浊方对酒精性脂肪肝大鼠血脂代谢及肝功能的影响

席菊兰，杨苗，马红学，吴秋玲，李朝喧

（1.山西中医学院，山西太原030024；2.山西中医学院附属医院，山西太原030024）

健脾化浊方对酒精性脂肪肝大鼠血脂代谢及肝功能的影响

席菊兰1，杨苗1，马红学2，吴秋玲1，李朝喧1

（1.山西中医学院，山西太原030024；2.山西中医学院附属医院，山西太原030024）

目的：观察健脾化浊方对实验性酒精性脂肪肝（AFLD）大鼠血脂代谢及肝功能的影响。方法：将雄性SD大鼠采用酒精联合脂肪乳剂法制备AFLD大鼠模型，将造模大鼠随机分为模型组、联苯双酯组、健脾化浊低剂量组（10 g/kg）、健脾化浊中剂量组（20 g/kg）和健脾化浊高剂量组（40 g/kg）。正常组和模型组给予生理盐水，其余各组连续灌胃相应药物30 d，给药结束后比较各组大鼠体质量、肝重，并利用全自动生化分析仪测定各组大鼠血清中TC、TG、AST、ALT水平。结果：与正常组相比较，模型组大鼠的体质量、肝重，血清TC、TG、AST、ALT的水平明显升高（P＜0.01），表明造模成功；与模型组相比，健脾化浊方高、中、低剂量组均能显著降低AFLD大鼠体质量、肝重及血清TC、TG、AST、ALT水平（P＜0.01）。结论：健脾化浊方具有调节AFLD大鼠血脂代谢异常和保护其肝功能的作用。

酒精性脂肪肝；健脾化浊方；血脂代谢；肝功能

酒精性脂肪肝（alcoholic fatty liver disease，AFLD）是因长期大量饮酒致过量脂肪在肝内持久贮积所致的疾病。有调查显示，在肝脏疾病中AFLD的死亡率仅次于肝癌［1］。近年酒精性肝病在我国发病率也呈上升趋势，酒精已成为肝脏损伤的第二大因素。酒味苦甘辛，大热有毒，嗜酒日久，易损伤脾胃，脾失健运，湿浊内生；酒毒内侵，酿湿生痰，痰瘀阻滞，酒毒、湿热、气血及痰瘀搏结于胁下而发病［2］。健脾化浊方以五苓散为基础化裁而成，由茯苓、猪苓、桂枝、白术、泽泻、生山楂、虎杖等药物严谨配伍成方，具有健脾养肝，气血并调，痰瘀并治之功。前期临床研究已经证实，健脾化浊方治疗酒精性肝病疗效显著，总有效率达74.3%。本实验通过建立酒精性脂肪肝大鼠动物模型，观察健脾化浊方对酒精性脂肪肝大鼠模型血脂代谢及肝功能的影响，旨在为健脾化浊方治疗酒精性脂肪肝提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物SPF级雄性SD大鼠，体质量（180±20）g，购自于山西医科大学动物实验中心，饲养于山西中医学院实验中心动物房。

1.1.2 实验药物健脾化浊方主要药物：茯苓15 g，猪苓10 g，白术10 g，桂枝6 g，生山楂15 g，泽泻10 g，虎杖10 g，草决明15 g。实验用药由山西中医学院附属医院制剂室提供。按照各药材在方中比例准确称取，采用传统中药煎煮制备，将两次煎煮药液合并，浓缩为含生药1 g/mL，2 g/mL，4 g/mL的液体，灭菌，4℃冰箱储存备用，给药时水浴至常温。高脂饲料10%玉米油、1%胆固醇、5%猪油、84%基础饲料。

1.1.3 仪器与试剂血清甘油三酯（TG）、血清总胆固醇（TC）、血清谷草转氨酶（AST）、谷氨酸氨基转氨酶（ALT）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所生产），BECKMAN Synchrom CX5全自动生化分析仪（美国）。

1.2 实验方法

1.2.1 模型建立采用白酒联合脂肪乳剂灌胃法造模［3］。以每次5 g/kg作为白酒初始灌胃剂量，后根据大鼠的活动及反应情况和体质量逐步增加白酒灌胃量至8 g/（kg·次）。前后共9周造模完成。

1.2.2 分组及给药选取60只SPF级雄性SD大鼠，体质量（180±20）g，适应性喂养1 w，随机取10只为正常组，50只作为造模组。动物造模成功后，随机分为模型组、联苯双酯组、健脾化浊方低剂量组10 g/kg、健脾化浊方中剂量组20 g/kg和健脾化浊方高剂量组40 g/kg。正常组和模型组灌胃生理盐水，其余各治疗组给药剂量按1mL/100 g体积连续灌胃相应药物30 d。

1.3 观察指标

末次给药后，所有大鼠均禁食12 h，称取体质量，并摘取各组大鼠肝脏称重；血清指标测定：眼眶静脉取血，静置30min，离心分离血清，全自动生化分析仪测定TC、TG、AST、ALT水平，按照试剂盒说明书进行操作。

1.4 统计学方法

采用SPSS18.0统计软件进行统计学处理，实验数据以均数±标准差（s）表示，采用单因素方差分析处理实验数据，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 实验各组大鼠一般情况、体质量及肝重的比较

造模过程中，正常组大鼠较造模大鼠一般状态好，毛发有光泽，食欲佳，无嗜睡，大便未见异常。与正常组相对比，模型组大鼠体质量和肝重明显升高，表明酒精性脂肪肝模型已复制成功；与模型组相比，联苯双酯组及健脾化浊方低、中、高剂量组均能降低模型大鼠的体质量和肝重，差异有统计学意义（P＜0.01）。结果见表1。

表1 各组大鼠体质量及肝重比较（g，s）

表1 各组大鼠体质量及肝重比较（g，s）

注：与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01

组别体质量肝重正常组306.08±17.22 7.99±1.01模型组399.54±20.991）9.88±0.771）联苯双酯组376.24±24.182）9.06±1.332）健脾化浊低剂量组383.69±19.452）9.18±1.532）健脾化浊中剂量组380.77±18.612）9.11±0.992）健脾化浊高剂量组369.33±17.382）8.96±1.382）

2.2 各组大鼠血清TC、TG、AST及ALT水平比较

模型组大鼠血清TG、TC、AST、A LT水平较正常组有显著升高，说明其出现了血脂代谢异常及肝功能受损；与模型组相对比，各给药组大鼠血清指标水平显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。结果提示健脾化浊方在调节大鼠血脂代谢和保护酒精性脂肪肝大鼠肝脏功能方面具有显著作用。结果见表2。

表2 各组大鼠血清TC、TG、AST及ALT水平比较（±s）

表2 各组大鼠血清TC、TG、AST及ALT水平比较（±s）

注：与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01

组别TC（mmol/L）TG（mmol/L）AST（U/L）ALT（U/L）正常组38.17±0.44 0.72±0.23 69.36±11.72 41.25±11.07模型组90.79±5.331）3.26±0.561）170.11±27.001）118.83±10.991）联苯双酯组78.56±1.982）2.18±0.132）92.66±22.022）85.96±13.042）健脾化浊低剂量组81.36±2.212）2.76±0.172）94.24±22.982）90.59±13.002）健脾化浊中剂量组77.17±1.762）2.29±0.232）91.33±21.862）83.27±10.362）健脾化浊高剂量组72.62±1.922）2.08±0.182）87.75±20.512）81.05±10.102）

3 讨论

正气不足是酒精性脂肪肝发病的重要内因，脾失健运、湿浊内停、肝失条达是本病的主要病机，而气虚则是其病理基础，正气亏虚尤其是脾气虚衰在本病发生发展过程中有重要地位：一方面，脾气虚，水湿不运，脂膏不化，痰浊易生；另一方面，痰瘀交阻，肝气郁结，日久必然有损脾胃。可以说，脾气亏虚贯穿并影响了疾病的始终。因此在治疗酒精性脂肪肝时必然要抓住健脾这一中心，配以疏肝、化痰等法，正盛则不受邪，亦可祛邪外出，最终疾病向愈。健脾化浊方由茯苓、猪苓、泽泻、桂枝、生山楂、白术、虎杖、草决明组成，本方谨守脂肪肝的脾虚郁滞的病机之本，从脾论治，方中以茯苓和白术益气健脾，桂枝温化水饮，兼以通阳，泽泻配伍茯苓、猪苓以加强利水，导湿下行，化痰消浊，也体现“见肝之病，当先实脾”的法则；生山楂消积化食、化滞散瘀、化痰行气，虎杖活血散痰、祛风解毒、消炎止痛、去湿热黄疸，本方在健脾和胃的同时，祛除积滞，解郁疏肝，从而做到祛邪不忘扶正，补虚不碍泄实，契合病机，用药既顾及到醒脾保肝之功，又重点突出了消除积滞之效。

高脂血症是脂肪肝形成的病理基础，一方面，机体内过多的游离性脂肪酸会直接损伤肝细胞；另一方面，堆积在肝脏内的甘油三酯会导致肝血窦受到压迫，逐渐缺血变性坏死；此外，高脂血症还可通过脂质过氧化而引起脂肪肝。因此，降低血脂、清除肝脏中堆积过多的脂肪也是治疗脂肪肝的重要方法之一。本实验中观察到：模型组大鼠血清TC、TG均出现显著升高，这可能是造成模型组大鼠肝脏转氨酶升高的原因之一，而健脾化浊各剂量组均能够降低模型大鼠血清TC、TG水平，说明其具有调节酒精性脂肪肝大鼠血脂代谢异常的作用。ALT和AST是反映肝细胞损害的常用的酶学检查指标，是肝细胞损伤的敏感标志，也是乙醇所致肝损伤最敏感的指标，能直接反映肝细胞坏死的程度，其严重程度直接关系到酒精性肝病的发展转归与预后。酒精性脂肪肝引起AST升高比较明显，正如本实验中所观察到的一样，模型组大鼠血清AST较ALT水平高，提示AST、ALT可能是鉴别酒精性脂肪肝与非酒精性脂肪肝的一项指标。本实验中观察到：健脾化浊低、中、高剂量组均能够降低模型大鼠的AST及ALT水平，说明健脾化浊方能有效保护肝功能，减轻肝细胞变性、坏死及炎性细胞浸润，降低肝细胞膜的通透性，减少胞浆中过多的ALT、AST释放入血。

综上所述，健脾化浊方不仅能够降低酒精性脂肪肝大鼠体质量和肝重，还能调节模型大鼠血脂代谢，降低血清TC、TG水平，改善肝损伤，保护肝细胞，促进肝细胞损伤修复，降低AST和ALT，维护肝功能正常，对酒精性脂肪肝具有治疗作用。

［1］刘丰，赵喜颖.中医药治疗酒精性脂肪肝的研究进展［J］.中医临床研究，2012，4（14）：119-120.

［2］梁卫，梁涛，张丽玲，等.解酒消脂汤对酒精性脂肪肝保护作用的实验研究［J］.中国临床药理学杂志，2014（6）：534-536，549.

［3］杨莲芳，石敏娟，高锦诚，等.苦丁茶对酒精性脂肪肝模型大鼠脂质代谢的影响［J］.中国药业，2014（19）：30-32.

（编辑：翟春涛）

Effect of Jianpi Huazhuo decoction on blood lipid metabolism and liver function in experimental alcoholic fatty liver（AFLD）rats

Xi Julan1，Yang Miao1，Ma Hongxue2，Wu Qiuling1，Li Zhaoxuan1
（1.ShanxiCollege of TCM，Taiyuan Shanxi030024；2.Affiliate Hospital of Shanxi college of TCM，Taiyuan Shanxi030024）

Objective：To observe the effect of Jianpi Huazhuo decoction on blood lipid metabolism and liver function in experimental alcoholic fatty liver（AFLD）rats.Methods：To prepare themale SD rats into AFLD ratmodels by alcohol and fat emulsion，the rats were randomly divided into five groups：model group，biphenyl diester group，Jianpi Huazhuo low dose group（10 g/kg），JianpiHuazhuomedium dose group（20 g/kg）and JianpiHuazhuo high dose group（40 g/kg）.The rats in normal group and model group are given normal saline，other groups are intragastric administration with corresponding drugs for 30 days，compare body weight and liver weight among groups，and determine TC，TG，AST，ALT level of rats in the serum with automatic biochemical analyzer.Results：Compared with the normal group，body weight，liver weight，serum TC，TG，AST and ALT levels increased significantly of the rats in the model group（P＜0.01），indicating that the model building is successful；compared with the model group，high，medium and low dose group jianpi huazhuo recipe can significantly reduce the body weight，liverweight and serum TC，TG，AST，ALT level（P＜0.01）of AFLD rats.Conclusion：Jianpihuazhuo recipe can regulate the abnormal blood lipid metabolism and protect the liver function of AFLD rats.

alcoholic fatty liver；Jianpihuazhuo decoction；lipidmetabolism；liver function

R285

A

1671-0258（2016）06-0013-03

山西中医学院基础与临床研究计划（2011jc09）

席菊兰，实验师，E-mail：1048374562@qq.com

李朝喧，副教授，E-mail：iamlizhaoxuan@163.com