RP-HPLC法测定西咪替丁注射液的含量

逯小萌



RP-HPLC法测定西咪替丁注射液的含量

逯小萌

河南省濮阳市食品药品检验所(濮阳 457000)

摘要：目的建立西咪替丁注射液含量的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为Thermo-C18(4.6mm×250mm，5μm),流动相：甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸调节pH值至5. 8±0.1)(24:76),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为219nm。结果西咪替丁进样量在0.1508～1.5075μg范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.9997，平均回收率为99.72%，RSD=0.33%(n=9)。结论该方法准确度、灵敏度及重复性均较好，可作为西咪替丁注射液的含量测定。

关键词：西咪替丁注射液；反相高效液相色谱法；含量测定

本品的主要成分为西咪替丁,辅料为盐酸与注射用水, 主要作用于壁细胞上H2受体，起竞争性抑制组胺作用，抑制基础胃酸分泌，也抑制由食物、纽胺胃泌素、咖啡因及胰岛素等刺激所引起的胃酸分泌，临床适应症为消化道溃疡。收载于《国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第四册》，标准中含量测定项使用了紫外分光光度分析方法进行测定.本人建立反相高效液相色谱法测定西咪替丁注射液的含量,试验结果表明本法简便准确、专属性强、重现性好。

1　仪器和试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；G1314B型Agilent 1200可变波长检测器(美国安捷伦公司)；H4033A型色谱工作站(美国安捷伦公司)；Precisa 92SM-202A型电子天平(瑞士普利赛斯公司)；UVIKON XL型双光束扫描紫外/可见分光光度计(法国赛克曼公司)；0.45μm微孔滤膜(天津市津腾实验设备有限公司)；西咪替丁对照品(中国食品药品检定研究院，批号：100158-201406，供含量测定用)；西咪替丁注射液(山东方明药业集团股份有限公司：批号1412143；上海现代哈森(商丘)药业有限公司：批号14061212；海南制药厂有限公司：批号150104。规格均为2ml：0.2 g)；甲醇为色谱纯；水为纯化水；其他试剂均为分析纯。

2　方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：Thermo-C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸调节pH值至5.8±0.1)(24:76)；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；检测波长：219nm；进样量：20μl。理论板数不低于10000。按此色谱条件进样测定，色谱图见图1。

2.2溶液的制备精密量取本品1ml(约相当于西咪替丁0.1 g)，置100ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml于100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密称取西咪替丁对照品10.05mg，用流动相稀释至浓度为10μg/ml的溶液，作为对照品溶液；按供试品溶液制备方法制备不含西咪替丁的溶液，即得阴性对照溶液。

2.3方法学考察

2.3.1专属性试验分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。由图1可见，供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上有相同保留时间的色谱峰，阴性对照溶液无干扰，证明方法可行。

2.3.2线性关系考察精密吸取对照品溶液3、5、10、15、20、25、30μl注入液相色谱仪，以对照品进样量为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程：Y=46.724X-7.1259 r=0.9998 (n=7)。结果表明，西咪替丁在0.1508～1.5075μg范围内线性关系良好。

图1　高效液相色谱图

2.3.3精密度试验精密吸取同一供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，重复6次。结果峰面积平均值为935.78，RSD=0.22%(n=6)，表明仪器精密度良好。

2.3.4稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、10、12、24h进样20μl，结果峰面积的平均值为941.67，RSD= 0.31% (n=8)。表明供试品溶液在24h内基本稳定。

2.3.5重复性试验取同一批样品，按拟定方法平行制备6份供试品溶液，分别进行测定。结果得RSD=0.25%(n=6)表明该方法重复性良好。

2.3.6加样回收率试验精密量取已知含量的同一批号的样品(山东方明药业集团股份有限公司，批号1412143，规格：2ml:0.2 g)9份各1ml,分别置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，分别加入0.8ml、1.0ml、1.2ml的浓度为1.0406mg/ml的对照品溶液，用流动相定容至200ml，配成高(120%)、中(100%)、低(80%)3个量级的样品溶液，过0.45μm微孔滤膜,按2.1条件进行测定，计算回收率和RSD值，结果见表1。

表1　西咪替丁加样回收实验结果

注：n=9

2.4样品含量测定

分别精密量取3批样品适量，依法制备供试品溶液并进样测定，用外标法计算西咪替丁注射液的含量。结果见表2。

表2　样品含量测定结果

注：n=3

3　讨论

在试验波长的选择上，取对照品溶液在UVIKON XL型双光束扫描紫外/可见分光光度计200～300nm波长范围内进行扫描，测得在219nm的波长处有最大吸收，故选择219nm为检测波长。在流动相的选择上分别选择了甲醇：水(24:76)、甲醇：水(240:760)(每1000ml溶液中含0.3ml磷酸和己烷磺酸钠0.94)、乙腈：水(24:76)与甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸调节pH值至5.8±0.1)(24:76)等进行试验，结果显示甲醇：0.1%三乙胺溶液(磷酸调节pH值至5.8±0.1)(24:76)作为流动相无论是保留时间还是峰型均达到理想效果，故选择为流动相作为试验条件。本方法结果表明样品主成分峰与相邻溶剂及杂质峰达到基线分离，并且阴性对照溶液峰对其无干扰，分离效果满意。此外方法学考察的内容均达到了相应的标准要求，说明该方法准确、专属性强，受客观因素的影响较少，故此法可作为西咪替丁注射液含量的测定。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京：中国医药科技出版社，2010：257-258.

[2]国家药典委员会. 国家药品标准化学药品地方标准上升国家标准第四册[S].北京：中国医药科技出版社，2002：88.

[3]邵超.HPLC法测定西咪替丁胶囊的含量[J].江西医药，2011，46(7):605-606.

[4]刘洪海，魏巍，李宇.高效液相色谱法测定西咪替丁片的含量[J].中国药业,2006,15(12):15-16.

[5]邵雪力，闫韶华.高效液相色谱法测定西咪替丁注射液的含量[J].数理医药学杂志，2010，23(5)：586-588.

[6]陈国友，陈立柱.HPLC法测定西咪替丁片的含量 [J].齐齐哈尔医学院学报，2007，28(17)：2101-2102.

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.04.022

文章编号：1003-8914(2016)-04-0500-02

收稿日期：(本文校对：王世清2015-06-15)

Content Determination of the Cimetidine Injection by RP-HPLC

LU Xiaomeng

(Puyang Institute for Food and Drug Control, Henan, Puyang 457000, China)

Abstract：ObjectiveTo establish a RP-HPLC method for content Cimetidine injection. MethodThe column was Thermo-C18 (4.6mm×250mm, 5 m). The mobile phase: methanol: 0.1% three triethylamine solution (phosphoric acid to adjust the pH value to 5.8±0.1) (24:76). The flow rate was 1.0ml/min, column temperature 30℃, and detection wavelength was 219nm. ResultCimetidine in 0.1508～1.5075μg range and peak area showed a good linear relationship, r=0.9997. The average recovery rate was 99.72%, RSD=0.33% (n=9). ConclusionThe method has good accuracy, sensitivity and repeatability, and can be used for content determination of Cimetidine injection.

Key words：Cimetidine injection; RP-HPLC; Content determination