4项联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床应用

苏燕，梁伟娟

(1、乌鲁木齐市中医医院检验科，新疆　乌鲁木齐830000；2、乌鲁木齐市中医医院内分泌科，新疆　乌鲁木齐830000)



·检验与临床·

4项联合检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床应用

苏燕1，梁伟娟2

(1、乌鲁木齐市中医医院检验科，新疆乌鲁木齐830000；2、乌鲁木齐市中医医院内分泌科，新疆乌鲁木齐830000)

摘要：目的探讨血清胱抑素C(Cys-C)、转铁蛋白（TRF）、β2-微球蛋白（β2-MG）、尿微量白蛋白（UmAlb）的联合检测对糖尿病肾病（DN）早期诊断的价值，为该病的早期诊断、早期治疗提供依据。方法回顾性分析2010年2月-2014年8月在乌鲁木齐市中医医院治疗的122例糖尿病肾病(DN)患者（观察组），和50例健康体检者（对照组），的检测资料进行比对。结果观察组4项检测结果明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；观察组男性患者和女性患者阳性率无统计学意义（P>0. 05）；病程大于10年的患者检测结果阳性率明显比0~3年，3~5年，5~10年，10年以上患者要高，差异有统计学意义(P<0. 05)；经ROC曲线分析，Cys-C敏感性84.3%，特异性86.6%；TRF敏感性76.3%特异性84.5%；β2-MG敏感性82.6%，特异性86.6%；UmALb敏感性85.6%，特异性91.2%。而几项联合检测时，其诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为88.6%、98.4%、95.6%和94.7%，均较Cys-C和UmAlb等单项检测时升高。结论血清胱抑素、转铁蛋白、β2-微球蛋白、尿微量白蛋白的联合检测比单项检测对糖尿病早期肾损害的诊断效能高，可用于临床的辅助诊断。

关键词：糖尿病肾病；血清胱抑素C；转铁蛋白；β2-微球蛋白；尿微量白蛋白；早期诊断

糖尿病是临床常见的代谢性疾病之一，患者以高血糖为主要特征，它的发病与胰岛素分泌缺陷及胰岛素生物能力损伤有关。患者往往伴有心、肾、眼、神经和血管等系统的慢性损伤，严重影响了患者的生活质量[1]。糖尿病之说以危害大，除了其原发疾病对患者的健康的影响以外，还会引起失明、肾病、高血压，冠心病，感觉神经障碍等多种并发疾病，而这些并发症往往是糖尿病患者致残、致死的主要原因[2，3]。因此糖尿病并发症的早期诊断和治疗同样要引起各界的高度重视。现将对糖尿病早期肾损伤患者相关检测结果报告如下。

1　材料与方法

1.1一般资料选取本院2010年2月至2014年8 月122例DN患者作为研究对象，其中男性68例，女性54例，年龄38~83，平均（57.8±10.8）岁，同时选择门诊健康体检者50例，作为对照组，其中男性29例，女性21例，年龄39~76岁，平均（50.6± 6.1）岁。两组各项基本资料差异无统计学意义，（P> 0.05），具有可比性。

1.2诊断标准⑴糖尿病诊断标准参照世界卫生组织（WHO）1998糖尿病的相关标准；⑵DN参照Megensem分期标准，患者连续6个月2~3次查尿微量清蛋白排泄率超过200μg/min，或尿蛋白定量超过0.5g/dl；⑶患者无原发性或继发性肾脏病病史；⑷蛋白尿非药物性肾损伤所致；⑸排除并发尿路感染、心力衰竭、慢性腹泻等可能致尿蛋白水平异常因素；⑹受试者均知情同意。

1.3标本采集空腹且禁食12h静脉采血3ml，注入不含抗凝剂的真空管，3500r/min，离心10min，分离血清，同时采集晨尿标本20ml，2000r/min，离心3min，收集上清液。

1.4仪器和试剂血清胱抑素C检测采用免疫比浊法，转铁蛋白、β2-微球蛋白检测采用胶乳增强免疫比浊，试剂由北京九强生物技术股份有限公司提供，UmAlb检测采用免疫透射比浊法，试剂由英国朗道公司提供，Urea检测采用紫外速率法，Ser检测采用Jaffe速率法，试剂由九强公司提供，仪器是贝克曼AU-2700生化分析仪，同时用标准品校准仪器，通过室内质控实行全程质量控制，保证结果的准确性，（质控品由朗道公司提供）。尿蛋白定性由迪瑞H-500尿液干化学分析仪检测，试纸条由北京迪瑞医疗科技股份有限公司提供。所有操作均严格按照试剂盒及仪器说明书进行。

1.5统计学处理采用SPSS 19.0软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1健康对照组与观察组的基本情况比较两组研究对象的性别、年龄等进行比较，差异无统计学意义，P>0.05，健康对照组与观察组的Cys-C、Urea、Ser、β2-MG、TRF、UmAlb检测结果，差异有统计学意义，P<0.05，相互之间有较好的正相关性，见表1。2.2不同病程患者的Cys-C、β2-MG、UmAlb、TRF检测结果差异有统计学意义，P<0.05，见表2。 2.3 Cys-C、β2-MG、UmAlb、TRF敏感性和特异性比较 经ROC曲线分析，Cys-C敏感性84.3%，特异性86.6%；TRF敏感性76.3%，特异性84.5%；β2-MG敏感性82.6%，特异性86.6%；UmAlb敏感性85.6%，特异性91.2%。联合检测后，其诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为88.6%、98.4%、95.6%和94.7%，均较Cys-C和U-mAlb等单项检测时升高，表明诊断的效能有较大提升。见图1。

表1　两组研究对象基本检测数据比较（±s）

表1　两组研究对象基本检测数据比较（±s）

注：与健康对照组比较，P<0.05。

Cys-C（mg/L）β2-MG(mg/L) UmAlb(mg/L) TRF(mg/dl) Urea(mmol/L) Ser(μmol/L) 3.16±1.29 0.82±0.52 2.67 <0.05 4.1±1.6 1.1±0.8 3.54 <0.05 43.8±5.3 11.1±3.2 3.21 <0.05 376±18.1 162±11.1 5.84 <0.05 7.84±2.19 5.12±1.01 7.01 <0.05 78.1±5.2 42.1±3.3 6.37 <0.05年龄（岁）57.8±7.8 50.6±6.2组别　n　性别（男/女）观察组健康对照组tP 122 50 68/54 29/21

表2　不同病程患者的各项检测数据比较（±s）

表2　不同病程患者的各项检测数据比较（±s）

注：不同病程组之间比较，P<0.05。

Cys-C（mg/L）　β2-MG(mg/L)　UmAlb(mg/L)　TRF(mg/dl)　Urea(mmol/L)　Ser(μmol/L) 0.82±0.51 2.1±1.05 3.16±1.29 4.8±2.14 4.62 <0.05 1.1±0.6 2.12±1.5 3.65±2.7 4.76±2.8 6.60 <0.05 11.2±3.2 24.5±4.3 33.89±5.36 88.6±7.4 5.41 <0.05 162±11.1 296±22.5 336±18.7 450±16.7 3.89 <0.05 5.19±1.71 5.47±1.32 7.84±2.22 9.12±2.02 5.69 <0.05 52.11±3.6 67.57±4.1 76.16±5.2 88.6±7.4 2.75 <0.05病程（年）　n 0~3 3~5 5~10 >10 tP 11 36 43 32

图1　Cys-C、UmAlb、β2-MG及TRF的ROC曲线

3　讨论

DN是糖尿病常见的并发症之一，它主要的病理基础是肾脏的微血管病变[4]。当糖尿病患者长期处于高血糖状态，HbAlc合成增加，氧合血红蛋白减少，致红细胞携氧能力下降，加上血糖升高，使血液的粘稠度增加，微血管的灌注不良，引起组织细胞缺血、缺氧，损伤内皮细胞，致使内皮细胞合成增多，肾血管收缩剧烈，血管阻力增加，降低了肾血流量，同时激活蛋白激酶C，使糖基化产物增加，致使血液的动力学发生改变，肾小球超滤过，产生微量蛋白尿及肾血管切应力变化，使肾小球细胞多基质蛋白沉积增加，肾小球基底膜肿胀、增厚，肾小管萎缩、纤维化、狭窄，导致供血不足引起肾功能破坏，若不及时治疗，会进一步破坏残余的肾功能，最后可发展为肾功能不全至终末期，导致尿毒症[5]，所以，对该病的临床诊断和治疗已引起国内外专家学者的广泛关注，糖尿病患者是发展为DN的高危人群，因此，如何通过某些相关指标的检测来评估早期DN显得极其关键，寻找DN的发病机制以及早期干预的指标也成为预防和治疗DN的新思路[6]。

血清胱抑素C（Cys-C）是目前反映GER较为理想的一种内源性标志物[7]，肾脏是清除循环中血清Cys-C的唯一器官，机体内几乎所有的有核细胞都产生，并参与细胞内肽和蛋白质的代谢调节，可以自由通过肾小球滤膜，几乎全部在肾小管被吸收分解代谢，当肾功能有轻度损伤时，血循环中的Cys-C水平就明显增加，对肾小球滤过膜的通透性变化要比尿素、肌酐更为敏感，几乎不受患者性别、年龄，生理病理等因素干扰[8]，检测方法简便，对仪器要求不高，是一种反映肾小球滤过变化理想可靠的内源性标志物，也逐渐成为临床检测肾小球滤过功能的核心指标[9]。近年来，国内外大量报道认为Cys-C能有效反映肾小球GFR的变化，以其特有的灵敏性在DN的早期诊断中有更重要的临床意义[10]。

β2-MG是由100多个氨基酸残基组成的单链多肽，相对分子质量为（11.6~11.8）102存在于有核细胞膜上，是细胞中完整的人类白细胞抗原（HLA）分子的一部分，在代谢过程中，β2-MG与HLA分离，释放到体液中，被肾小球自由滤过，99%被近曲小管上皮细胞重吸收，并进行分解代谢，不再返流入血，最后由肾小管内皮细胞降解为氨基酸，当肾小球滤过功能受损或滤过负荷增加时，外周血β2-MG的水平相对升高[11]。

UmAlb是肾脏异常渗漏蛋白质，正常情况下，绝大多数的UmAlb不能通过滤过膜，在糖尿病的早期UmAlb在尿中排出量较少，但随着病情的不断发展，肾脏排泄蛋白的量也逐渐增加，最终导致微量清蛋白尿的发生[12，13]，此时已经可以检测到U-mALb，它是DN早期以及肾损伤程度的灵敏指标，在检测糖尿病患者肾脏损伤时，UmAlb的意义比尿蛋白更大，且根据UmAlb含量可知，如果患者尿蛋白检测结果为阳性，其UmAlb量必将远远高于尿蛋白阴性的患者及健康人群，如果患者尿蛋白检测结果为阴性，其尿微量蛋白含量未必为阴性，所以，在糖尿病肾病的早期诊断中，UmAlb检测具有积极的临床意义[14]因此糖尿病患者如果出现肾脏损害而有蛋白尿时，应及早提前干预治疗，以控制病情发展。

TRF是一项反映肾小球滤膜损伤的灵敏指标，它是由多个氨基酸构成的糖蛋白，主要在肝脏合成，为转运Fe3+的主要蛋白，TRF是很难通过肾小球滤膜，当肾小球的电荷屏障发生早期损害时，血中的TRF含量先升高[15]，随着其基底膜内外疏松层硫酸肝素糖蛋白水平的减低，使负电荷位点明显减少，使带负电荷（pH＝5.7）的循环中分子蛋白TRF自肾小球滤过膜滤过，出现在尿中，尿中的TRF含量也会逐渐上升[16]。

Urea、Ser和Cre是评估肾小球滤过功能的传统指标，但易受蛋白质分子代谢、血容量、胃肠道出血；以及患者体质、肌肉水平等多种因素影响，而且，只有在肾功能损伤较严重时，血液中Urea、Ser和Cre的含量才会升高，难以对DN早期提供有价值的诊断依据。目前临床用尿清蛋白排泄率作为DN分期的指标，也用过24h尿蛋白定量作为参考[17]，但是这些检测值受患者饮食、运动、药物、饮水的多少等影响因素较多，作为一个指标来讲稳定性不够理想，也不够全面。

本研究显示，观察组Cys-C、UmAlb等检测结果明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），观察组男性患者和女性患者阳性率无统计学意义（P>0.05）；病程大于10年的患者检测结果阳性率明显比0~3年、3~5年、5~10年及10年以上患者要高，差异有统计学意义(P<0.05)；Cys-C敏感性86.3%，特异性88.6%；TRF敏感性76.3%，特异性84.5%；β2-MG敏感性82.6%，特异性86.6%；U-mAlb敏感性85.6%，特异性91.2%。而在联合检测时，其诊断的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为87.6%、98.4%、95.6%和94.7%，均较Cys-C和UmAlb等单项检测时升高。

综上所述，Cys-C、UmAlb等联合检测具有互补作用，准确率也显著高于单一项目检测，使诊断的效能大为提高，既可以早期发现DN患者，又可以较综合地判断病损的程度，早期干预治疗，从而更有效地防治或延缓DN患者损伤情况，进一步提高患者的生活质量。

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·调查报告·

中图分类号：R587.1

文献标识码：A

文章编号：1674-1129(2016)03-0379-03

DOI：10.3969/j.issn.1674-1129.2016.03.039

基金项目：乌鲁木齐市科学技术项目（Y09132002）

通信作者：苏燕，E-mail：1509082764@qq.com。

(收稿日期2015-11-09；修回日期2016-03-20)