Snail及Survivin在卵巢癌中的表达与侵袭性相关性分析*

金爱红，周霞平，周凤珍

(广东省深圳市第二人民医院妇科　518035)



Snail及Survivin在卵巢癌中的表达与侵袭性相关性分析*

金爱红，周霞平△，周凤珍

(广东省深圳市第二人民医院妇科518035)

[摘要]目的探讨Snail及Survivin在卵巢癌中的表达与侵袭性、病理学分型的关系。方法应用免疫组织化学法检测卵巢癌组织中的Snail及Survivin蛋白表达。结果Survivin及Snail在卵巢癌组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织及正常卵巢组织中表达差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。Snail表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)；Snail及Survivin存在正相关性(r=6.82，P<0.05)。结论Snail及Survivin的增强表达与卵巢癌侵袭性增强有关。

[关键词]卵巢肿瘤；上皮间质转化；Snail；Survivin

卵巢癌是妇科常见肿瘤之一，其中上皮性卵巢癌发病率较高。病理过程与肿瘤的增殖和侵袭性相关，针对肿瘤的增殖和侵袭性进行的基因治疗非常有意义[1]。目前，有效的治疗基因尚不清楚。大量临床试验表明，上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition，EMT)在肿瘤的浸润转移过程中发挥至关重要的作用，Snail及Survivin均参与了EMT过程[2-3]。笔者利用免疫组织化学法观察了卵巢癌组织中Survivin及Snail的表达情况，探讨Snail及Survivin的表达与卵巢癌侵袭转移的关系。

1资料与方法

1.1一般资料收集2010年5月至2014年6月经本院妇产科手术治疗临床病理资料保存完整的70例卵巢癌病例为研究对象，所有患者术前未行放化疗，经病理检查确诊为上皮性卵巢癌。年龄22～74岁，平均(42.6±13.2)岁；按FIGO分类标准[3]，低度(Ⅰ、Ⅱ级)28例、高度(Ⅲ、Ⅳ级)42例；分化程度：高分化15例，中分化18例，低分化37 例；病理类型：浆液性腺癌 29 例，黏液性腺癌11 例，子宫内膜样腺癌 12例，透明细胞癌 3 例，混合性癌 1 例；淋巴结转移：有淋巴结转移47例，无淋巴结转移23例。另取20例正常宫颈组织及70例卵巢良性上皮性肿瘤组织作为对照组。

1.2方法

1.2.1免疫组织化学法收集手术切除的标本，甲醛固定，常规组织切片，采用Super Vison法进行免疫组织化学染色，兔抗人Snail及Survivin单克隆抗体购自武汉博士德生物有限公司，免疫组织化学试剂盒购自上海生工生物有限公司，严格按照试说明书操作。

1.2.2结果判定Snail及Survivin蛋白存在于细胞核，呈棕黄色或棕褐色颗粒状分布。每张切片选取连续的10个高倍视野(×400)，每个视野计数200个细胞，分别统计其中的所有阳性细胞，计算阳性率。

2结果

2.1Snail及Survivin在卵巢癌、卵巢良性上皮肿瘤组织及正常组织中的表达正常组织中Snail几乎不表达(5.0%)。而卵巢良性上皮肿瘤组织阳性率为22.9%(16/70)，二者差异有统计学意义(P<0.05)；卵巢癌组织中Snail阳性表达率为95.7%(67/70)，与正常组及卵巢良性上皮肿瘤组织组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。20例正常组织中有1例表达Survivin，阳性率为5.0%，而卵巢良性上皮肿瘤组织阳性表达率为21.7%(15/70)，卵巢癌肿瘤细胞表达率为81.4%(57/70)，三者比较差异有统计学院意义(P<0.05)，见表1。

表1　Snail及Survivin在不同组织中的表达[n(%)]

2.2Snail及Survivin的表达及与卵巢癌临床病理因素间的关系70例卵巢癌组织中，Snail表达与肿瘤的病理类型、浸润深度无关(P>0.05)，与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。Survivin表达与肿瘤病理类型无关(P>0.05)，而与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),见表2。

2.3Snail及Survivin相关性分析Pearson相关分析表明两者存在正相关性(r=6.82，P<0.05)。

表2　Snail及Survivin与卵巢癌临床病理

3讨论

研究表明，EMT在组织胚胎增殖发育、恶性肿瘤的转化过程中起到至关重要的作用。EMT可以引起上皮细胞的极性消失、细胞结构的变化、细胞之间的连接功能丧失、远处转移能力提高，促进肿瘤细胞转化为间质细胞。最近研究证实，EMT与上皮性恶性肿瘤的侵袭、远处转移有密切联系，在其发生、发展中发挥一定的作用[4]。

Snail是锌指转录抑制因子之一。它与E-cadherin的E-box区域不可逆的结合后进而抑制 E-cadherin基因的表达，而E-cadherin不但能起到抑癌因子的功能，还可以促进癌细胞的增值[5]。大量试验证实，E-cadherin基因的表达受到抑制，能导致癌细胞转化为间充质细胞，进而引起癌细胞移行、侵袭及转移[6]。有研究表明，卵巢癌病灶中Snail表达水平升高，E-cadherin表达水平降低，并且二者的表达与卵巢癌的临床病理分期及预后呈正相关[7]。本文研究结果与其一致，随着病情进展，Snail 的阳性表达率逐渐递减，Snail 在卵巢正常组织中的阳性表达率明显低于卵巢良性上皮肿瘤及卵巢恶性肿瘤，差异有统计学意义(P<0.05)，与其他文献报道一致。这些结果都显示，Snail可能与上皮性卵巢癌发生、发展有密切联系，它可能是鉴别卵巢癌和卵巢良性肿瘤的标志物之一。张莉丽等[4]研究表明，Snail 在人胃黏膜组织中不表达或低度表达，而在胃癌组织中高表达，同时研究发现胃癌的分化程度越低、临床分期越高，其表达的含量越高，而且有淋巴结转移、血管侵犯的胃癌的表达量高于无淋巴结转移及血管侵犯的胃癌组织。本研究结果显示，Snail表达与肿瘤的病理类型、浸润深度无关(P>0.05)，与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。上述结果提示Snail表达与卵巢癌的浸润转移及不良预后紧密有关。Snail有可能预测卵巢癌预后的标志物之一。

Survivin为最近发现的抑制凋亡因子之一，它不但能阻止肿瘤的凋亡过程，还可以加速肿瘤细胞的无限增值和向恶性分化[8]。Survivin主要在胚胎性未发育组织器官及恶性肿瘤组织中表达，而健康人体组织中很少表达。本研究结果提示，正常卵巢组织中Survivin蛋白表达率较低，卵巢良性上皮肿瘤及卵巢癌Survivin蛋白明显升高，癌组织较良性上皮肿瘤更高，与国内外研究结果一致[9]，提示Survivin在上皮性卵巢癌发生、发展过程中起到至关重要的作用。有研究表明，Survivin与肿瘤的病理分级、淋巴结转移、有无腹腔积液、临床分期等因素有关[10]。笔者回顾性分析Survivin蛋白与卵巢癌各临床参数及预后的关系，结果显示Survivin蛋白与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。但随着组织学分级和病理分期、分级的增加，Survivin过表达也随之升高，差异有统计学意义(P<0.05)。上述结果提示，Survivin蛋白的表达程度与肿瘤恶性程度密切联系，Survivin有可能预测卵巢癌预后的标志物之一。 Spearman 相关分析结果显示，Snail及Survivin相关性表达的相关性明显，此结果可能与某些潜在的未知因素存在有关。

综上所述，上皮性卵巢癌的发生、转化是一种复杂的过程，Snail及Survivin在上皮性卵巢癌的转化过程中发挥至关重要的作用，但其中的机制尚需进一步研究。

参考文献

[1]Ahmed N,Abubaker K,Findlay J,et al.Epithelial mesenchymal transition and cancer stem cell-like phenotypes facilitate chemoresistance in recurrent ovarian cancer[J].Curr Cancer Drug Targets,2010,10(3):268-278.

[2]Vuoriluoto K,Haugen H,Kiviluoto S,et al.Vimentin regulates EMT induction by Slug and oncogenic H-Ras and migration by governing Axl expression in breast cancer[J].Oncogene,2011,30(12):1436-1448.

[3]Klymkowsky MW,Savagner P.Epithelial-mesenchymal transition:a cancer researcher′s conceptual friend and foe[J].Am J Pathol,2009,174(5):1588-1593.

[4]张莉丽，张布衣，姚根有．组织芯片检测snail mRNA的表达及其与胃癌的关系[J]．浙江临床医学，2008，10(8)：1014-1015．

[5]Vergara D,Merlot B,Lucot JP,et al.Epithelial-mesenchymal trailsition in ovarian cancer[J].Cancer Lett,2010,291(1):59-66.

[6]Jin H,Yu Y,Zhang T,et al.Snail is critical for tumor growth and metastasis of ovarian carcinoma[J].Int J Cancer,2010,126(9):2102-2111.

[7]郑艳萍，姚爱香，鄢学菊．Snail和E-cadherin在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与上皮-间叶转化的关系[J]．武汉大学学报(医学版)，2011，32(3)：385-387．

[8]宣樟标，洪丽华．FHIT、survivin、PTEN在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义[J]．医学研究杂志，2011，40(7)：133-136．

[9]Wang Jj,Zheng Y,Yang F,et al.Survivin small interfering RNA transfected with a microbubble and ultrasound exposure inducing apoptosis in ovarian carcinoma cells[J].Int J Gynecol Cancer,2010,20(4):500-506.

[10]Takai N,Miyazaki T,Nishida M,et al.Expression of survivin is associated with malignant potential in epithelial ovarian carcinoma[J].Int J Mol Med,2002,10(2):211-216.

doi:·经验交流·10.3969/j.issn.1671-8348.2016.16.027

*基金项目：深圳市科技计划项目(200902056)。

作者简介：金爱红(1976-)，副主任医师，硕士，主要从事妇科肿瘤工作。△通讯作者，Tel:13714276829;E-mail：aocziaouxiaping@163．com。

[中图分类号]R737.31

[文献标识码]B

[文章编号]1671-8348(2016)16-2244-02

(收稿日期：2015-12-14修回日期：2016-02-28)