离心法和虹吸法制备冷沉淀凝血因子的比较

王振财

（朝阳市中心血站，辽宁 朝阳 122000）



离心法和虹吸法制备冷沉淀凝血因子的比较

王振财

（朝阳市中心血站，辽宁 朝阳 122000）

【摘要】目的 研究比较离心法和虹吸法制备冷沉淀对凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纤维蛋白原）含量。方法 将我站2015年1月至2015年6月收集的新鲜冰冻血浆200袋按照统计学原理袋数相同对照组和观察组。对照组冰冻血浆使用离心法监测凝血因子，观察组冰冻新鲜血浆使用虹吸法进行检测，比较两种检测方法结果。结果 检测结果显示，虹吸法制备的Ⅷ因子含量多余离心法制备的含量，数据符合统计学差异（P ＜0.05）；与此同时，离心法检测制备的Fbg含量均多于虹吸法制备的含量，数据符合统计学差异（P＜0.05）。结论 在检测冷冻血浆凝血因子的时候，采用虹吸方法进行制备，质量标准更优于离心制备方法。虹吸制备方法操作简单，受到人为因素比较少，仪器操作少，因而虹吸制备冷沉淀将取代离心方法，质量更值得信赖。

【关键词】离心法；虹吸法；凝血因子

在医学逐步发展的过程中，冷沉淀因子制备越来越受到重视，同时临床使用量也在不断增多。在治疗甲型血友病、纤维蛋白原与血管型血友病方面具有明显的效果。临床所指的冷沉淀凝血因子是新鲜冰冻血浆在3 ℃左右融化后产生的血浆冷沉淀蛋白部分而冷上清则是冷沉淀制备过程中应当去除掉的血浆上清［1］。受到多种因素的影响，Ⅷ因子活性不强，半衰期非常容易失活。因而，选用较为可靠的制备方法非常重要。本文将我站2015年1月至2015年6月收集的新鲜冰冻血浆200袋为研究对象。研究比较离心法和虹吸法制备冷沉淀对凝血因子Ⅷ因子、Fbg（纤维蛋白原）含量。

1 资料与方法

1.1 一般资料：将我站2015年1月至2015年6月收集的新鲜冰冻血浆200袋为研究对象。按照统计学原理袋数相同对照组和观察组。两组新鲜冰冻血浆并存在差异。

1.2 方法。虹吸法：观察组血浆使用虹吸方法进行检测。将新鲜冰冻的冷冻血浆放置在4T.6C型低温恒温循环水浴槽中，将空联袋悬挂在箱的外面，并且要保持两袋之间有一定的距离。在冰冻新鲜血浆逐渐融化的时候，受到虹吸的作用，融化的血浆会逐渐流向空袋中，随后就会剩余（42±7）mL的白色结晶颗粒，而这些就是冷沉淀。在经过热合后将其低温保存进行备用。

离心法：对照组血浆采用离心的方法。将冰冻新鲜血浆放置在4 ℃冰箱中逐渐融化12～15 h。血浆在血浆袋中逐渐融化直至有小冰块的时候将其取出，随后采用低温离心。离心操作10 min，离心转速保持每分钟2500转，温度控制在2 ℃。使用转移袋经过无菌操作后将上层冷上清血浆分出，留下25 mL的血浆进行冷沉淀，经过热合后进行低温储存使用。

1.3 统计学分析：本次实验操作中所产生的数据都经过SPSS17.0的统计学处理。采用t检验原理来对资料比进行分析，产生的数据统一用χ2检验，检验结果的数据P＜0.05，差异具有统计学意义。

2 结 果

见表1。

表1 离心法与虹吸法制备冷沉淀凝血因子结果比较（±s）

表1 离心法与虹吸法制备冷沉淀凝血因子结果比较（±s）

离心法　　虹吸法　t　PⅧ因子含量　82.38±2.81　105.97±15.71　17.89　　＜0.05 Fbg 含量　149.97±4.12　92.56±3.79　4.25　　＜0.05

3 讨 论

对临床诊疗来说，冷沉淀制品质量的优劣将直接影响临床治疗效果。因而，在临床治疗的过程中选用合适的制备方法非常重要。从近年来临床研究比较两种方法的检测结果与分析，就会发现虹吸制备方法相对比离心制备方法更具有优势。在比较两种方法检测指标的时候发现，虹吸法制备的Ⅷ因子含量多余离心法制备的含量，数据符合统计学差异（P＜0.05）；与此同时，离心法制备的Fbg含量均多于虹吸法制备的含量，数据符合统计学差异（P＜0.05）。在分析的时候就会发现，离心方法制备冷沉淀是制备出速冻的血浆，随后将新鲜冰冻血浆放到一定温度范围的冰箱过夜，在冷沉淀结晶后，进行离心分层。随后就将血浆排除，剩下的就是结晶冷沉淀。血站制备冷沉淀的时候使用该种方法的不足之处表现在冰箱内温度并不是恒定不变的，很难保证在制备的过程中，冰箱温度一直都处于该范围。温度不断波动，促使凝血因子活性降低，致使得出率下降。将冰冻血浆放置在冰箱过夜，时间较长就会有蛋白析出，这样也会降低凝血因子得出率，同时还会对其活性造成一定影响。而虹吸法制备冷沉淀保证例在恒温的状态下，并且整个融化的过程中保证水分与血浆的充分接触。CT-4T.6C水浴式低温融化箱使用独特循环水流在保证温度均匀的情况下，还可以快速溶解。因为冷沉淀会在2～6 ℃会结晶，析出特性。因而，虹吸法就是利用这一特点，从新鲜冰冻血浆中进行提取沉淀。正是基于此，对于析出的沉淀而言，恒定温度就是关键性的因素。与此同时，由于冷沉淀凝血因子并不是非常的稳定。因而在提取的时候时间越短越好［2］。

综上所述，在制备冷冻血浆凝血因子的时候，采用虹吸方法进行制备，质量标准更优于离心制备方法。虹吸制备方法操作简单，受到人为因素比较少，仪器操作少，因而虹吸制备冷沉淀将取代离心方法，质量更值得信赖。

参考文献

［1］ 徐利强，李建，周忠英，等.冷沉淀凝血因子制备工艺改良［J］.中国生化药物杂志，2011，32（12）:145-146.

［2］ 杨江存，理芒会，于青，等.新鲜冰冻血浆融化后不同放置时间凝血因子的变化［J］.中国输血杂志，2013，18（22）:211-212.

中图分类号：R457.1

文献标识码：B

文章编号：1671-8194（2016）02-0031-01