16种杀菌剂及其复配对番茄晚疫病的室内毒力测定及温室防效

张雪王晓梅逯忠斌王岩侯志广赵晓峰王鑫宏张浩*

（1.*吉林农业大学资源与环境学院　长春　130118）（2.吉林农业大学农学院　长春　130118）



16种杀菌剂及其复配对番茄晚疫病的室内毒力测定及温室防效

张雪1王晓梅2逯忠斌1王岩1侯志广1赵晓峰1王鑫宏1张浩1*

（1.*吉林农业大学资源与环境学院长春130118）（2.吉林农业大学农学院长春130118）

摘要：采用生长速率法测定16种杀菌剂单剂药效并筛出对番茄晚疫病增效作用较好的混剂配比。结果表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰吗啉的EC50值分别为0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，抑菌效果均较好。将氰霜唑分别于其他四种杀菌剂复配，其中咯菌腈和氰霜唑以质量比为1∶1混配时，EC50值为0.08mg/L，增效系数为3.38，增效作用明显。在温室防效试验中，采用常规喷雾法，质量分数为40%咯菌腈·氰霜唑在100g.a.i/hm2剂量下防效最好，达到93.66%,可为农业生产提供有效的科学理论指导。

关键词：番茄晚疫病；杀菌剂；毒力测定

张雪，吉林农安人，硕士，主要从事有害生物抗药性及综合治理研究。

E-mail：529562839@qq.com

地址：（130118）吉林省长春市新城大街2888号吉林农业大学资源与环境学院，E-mail：haozhang100@163.com。

番茄晚疫病菌是由卵菌中的致病疫霉引起的，是一种常见的植物病原真菌，侵染番茄等茄科植物。我国多数省份都有番茄晚疫病的发生现象,尤其是连续阴雨天气、日夜温差较大的地区影响番茄的正常生长。对于北方保护地栽培条件来看,也较容易发生此病害[1-2]。

对该病害的防治主要采用化学药剂[3]，主要有甲霜灵、苯霜灵等，但通过试验可知，许多国家已对此类药剂产生抗性［4-6］。本文通过对常用防治番茄晚疫病的各种杀菌剂进行室内毒力试验，筛选出抑菌效果较好的单剂按照不同比例进行混配，选择增效作用最好的药剂复配并对其进行温室防效试验，从而在农业生产上为防治该类病害提供科学依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1供试菌株

番茄晚疫病菌，由吉林农业大学农药生物测定实验室分离鉴定并保存。

1.1.2供试药剂

95%氰霜唑原药（Cyazofamid，TC），诺农(北京)国际生物技术公司；97%咯菌睛原药（Fludioxonil，TC），河北冠龙农化有限公司；90%氨基寡糖素原药（Chitosam-oligosacchrins，TC），青岛博智汇力生物科技有限公司；95%吡唑醚菌酯原药（Pyrazole kresoxim，TC），京振农化工有限公司，98%烯酰吗琳原药（Dimethomorph，TC），98%甲霜灵原药（Metalaxyl，TC），广州瑞丰生物科技有限公司；90%烯肟菌酯原药（Enestroburin，TC），沈阳科创化学品有限公司；95%咪鲜胺原药（Prochloraz，TC），江苏辉丰农化股份有限公司；90%多抗霉素原药（Polyoxin，TC），绩溪农华生物科技有限公司；95%甲基硫菌灵原药（Thiophanate-methyl，TC），江苏百灵有限公司；1万亿活芽孢/g枯草芽孢杆菌母药（Bacillus subtilis，TC），德强生物股份有限公司；96%异菌脲原药（Iprodione，TC），湖北佳诺信生物化工有限公司；96%福美双（Thiram,，TC），淄博华王化工有限公司；99%多菌灵原药（Carbendazim，TC），上海开蒙环境工程有限公司；95%百菌清原药（Chlorothalonil，TC），邹平德睿商贸有限公司；98%苯醚甲环唑原药（Difenoconazole，TC），石家庄伊宏化工有限公司。

1.2实验方法

1.2.1实验药剂筛选与浓度确定

将16种药剂分别用少量有机溶剂进行溶解，然后加入无菌水，按照实验需要均配制成质量浓度为1000mg/L母液备用，然后依次稀释不同的浓度。氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素的质量浓度为10、2、0.4、0.08、0.016mg/L；吡唑醚菌酯、烯酰吗啉、苯醚甲环唑、烯肟菌酯的质量浓度为40、8、1.6、0.32、0.064mg/L；咪鲜胺、多抗霉素、甲基硫菌灵、枯草芽孢杆菌的质量浓度为50、10、2、0.4、0.08mg/L；福美双、多菌灵、异菌脲、甲霜灵、百菌清的质量浓度为80、16、3.2、0.64、0.128mg/L。

1.2.2单剂室内毒力测定

测定16种药剂的室内毒力采用菌丝生长速率法[6]。将灭菌后的PDA培养基自然降到60～70℃，按上面浓度加入计算好的固定药量，使带药培养基含有不同药量，至完全冷却后，接种直径为5mm的番茄晚疫病菌饼，空白对照加等量无菌水，3次重复。接种后平板放到培养箱中（25℃）培养，72小时后测量生长菌落直径采用十字交叉法，然后计算抑菌率，用DPS评价系统分析，从而得出毒力回归方程、相关系数和EC50值[7-10]。

抑菌率（%）=（对照培养基中菌落直径-含药培养基中菌落直径）/对照培养基中菌落直径×100%

1.2.3杀菌剂复配对番茄晚疫病药效测定

复配毒力测定实验用Horsfall法，在测定单剂毒力的基础上，选择机制作用不同的杀菌剂混配[11]，试验中对番茄晚疫病菌抑菌效果最好的氰霜唑分别和咯菌腈、生物农药氨基寡糖素、吡唑醚菌酯、烯酰吗啉混配进行联合毒力测定。每种混剂按5∶1、3∶1、1∶1、1∶3、1∶5进行混配，且复配剂质量浓度梯度均为10、2、0.4、0.08、0.016mg/L，以加等体积无菌水为空白对照，3次重复。实验与计算方法均同单剂室内毒力测定。

1.2.4数据处理

根据Wadley方法判断混剂是否有增效作用[11]。按菌丝生长抑制率计算单剂和混剂的EC50值，再用Wadley公式计算混剂的SR，Wadley法计算如下：

EC50（th）=（a+b）/（a/EC50A+b/EC50B)

增效系数（SR）=EC50（th）/EC50（ob）

EC50（ob）代表实际EC50，EC50(th)代表理论EC50，A、B为单剂，a、b为两者在混剂中的质量比。SR=0.5-1.5为相加作用；SR＞1.5为增效作用；SR＜0.5为拮抗作用。

1.2.540%咯菌腈·氰霜唑对番茄晚疫病的温室药效试验

试验于吉林农业大学试验温室内进行，肥力水平均匀一致、栽培管理为中等水平[12]。实验过程中将加工后的质量分数为40%咯菌腈·氰霜唑悬浮剂按照150、100、50g.a.i./hm2三种剂量进行喷施，试验共设计8个处理，3次重复，共24个小区。本试验共施药两次间隔为7天，第二次施药10天后调查番茄晚疫病病况。取样采用对角线5点法，记下总株数、各病级数与病株数，计算出病情指数与防治效果。

分级标准与计算公式如下：

0级，无病斑；1级，病斑面积占整个叶面积5%以下；2级，病斑面积占整个叶面积6%～10%；3级，病斑面积占整个叶面积11%～20%；4级，病斑面积占整个叶面积21%～50%；5级，病斑面积占整个叶面积50%以上。

病情指数=[∑（各级病株数×相对级值数）/（最高级值×调查总株数）]×100%

防治效果=[（空白对照区病情指数-处理区病情指数）/空白对照区病情指数]×100%

2　结果与分析

2.116种杀菌剂对番茄晚疫病的EC50值测定结果

从试验结果（见表1）可知：在16种杀菌剂中，吡唑醚菌酯和烯酰吗啉对番茄晚疫病有较好的抑制效果，EC50值分别为0.74、0.92mg/L，生物农药中氨基寡糖素表现出良好的抑菌效果，EC50值为0.46mg/L，拟除虫菊酯类杀虫剂中咯菌腈表现出较好的抑菌活性，EC50值为0.37mg/L，磺胺咪唑类杀菌剂中氰霜唑EC50值为0.21mg/L，对番茄晚疫病菌具有最高的抑菌活性，为混剂复配提供了有效依据。

表1　16种杀菌剂对番茄晚疫病的室内毒力

2.2氰霜唑与其它四种杀菌剂混配对番茄晚疫病菌的试验效果

2.2.1咯菌腈与氰霜唑混配的试验结果

咯菌腈与氰霜唑药剂复配后的结果见表2。从表可知，当咯菌腈和氰霜唑混剂比例为5∶1、3∶1和1∶3时，增效系数为0.92、0.94 和0.92，SR在0.5～1.5之间，为相加作用；两药剂混剂比例为1∶5 和1∶1时，增效系数为1.53和3.38，抑菌效果较好，表现出增效作用。尤其当两药剂质量比为1∶1时，抑菌效果最强。

表2　咯菌腈与氰霜唑混配的试验结果

2.2.2氨基寡糖素与氰霜唑混配的试验效果

表3　氨基寡糖素和氰霜唑混配试验结果

氨基寡糖素与氰霜唑药剂复配的实验结果见表3。从表可知，当氨基寡糖素和氰霜唑混剂比例为1∶1、1∶3、1∶5时，其增效系数为1.26、1.01、0.51，SR在0.5～1.5之间，为相加作用；两药剂混剂比例为5:1和3:1时，增效系数为2.95和1.77，SR＞1.5，抑菌效果较好，表现出增效作用。尤其当两药剂质量比为5∶1时，抑菌效果最强。

2.2.3吡唑醚菌酯和氰霜唑混配的试验结果

吡唑醚菌酯与氰霜唑复配的实验结果见表4。从表可知，当吡唑醚菌酯和氰霜唑混剂比例为5∶1、1∶1、1∶3、1∶5时，其增效系数为0.71、0.71、0.74、1.00,SR在0.5～1.5之间，为相加作用；两药剂混剂比例为3∶1时，增效系数为2.26，SR＞1.5，抑菌效果较好，表现出增效作用。

表4　吡唑醚菌酯和氰霜唑混配试验结果

2.2.4烯酰吗啉和氰霜唑混配试验结果

烯酰吗啉与氰霜唑复配的实验结果见表5。从表可知，当烯酰吗啉和氰霜唑混剂比例为5∶1、3∶1、1∶3、1∶5时，其增效系数为1.24、1.29、1.08、0.86,SR在0.5～1.5之间，为相加作用；两药剂混剂比例为1∶1时，增效系数为1.65，SR＞1.5，抑菌效果较好，表现出增效作用。

表5　烯酰吗啉和氰霜唑混配试验结果

2.3咯菌腈与氰霜唑温室药效试验结果

温室药效试验结果（见表6）。质量分数为40%咯菌腈·氰霜唑对番茄晚疫病有很好的防治效果，50、100、150g.a.i./hm2三种剂量下，防效分别为86.91%、93.66%、90.08%，与单剂相比防效显著，其中以100g.a.i./hm2剂量下对番茄晚疫病的防治效果最好。

表6　咯菌腈与氰霜唑温室药效试验结果

3　结果与讨论

氰霜唑能够较好抑制疫霉菌不同阶段的生长，例如孢子囊的形成、萌发、游动孢子的释放、移动以及菌丝的生长等。氰霜唑用量要求低，对人及其他动物物具有较低毒性［13］。

试验结果表明：氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰吗啉对番茄晚疫病菌菌丝生长的抑制中浓度分别是0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，表明氰霜唑、咯菌腈、氨基寡糖素、吡唑醚菌酯和烯酰吗啉均具有良好的抑制效果。将氰霜唑与其他四种杀菌剂进行混配试验，结果表明,四种混配药剂中咯菌腈与氰霜唑质量比为1∶1时，其增效系数最高，抑菌效果更好。

农药混配使用是目前生产上普通采用的药剂混用方式，具有使用方便和灵活、易于操作等优点，而且还能够避免混剂有效成分因相互作用而失效的可能性。对番茄晚疫病的温室防效试验中咯菌腈和氰霜唑质量比为1∶1时，其防效较好，当用量为100g.a.i./hm2时，对番茄晚疫病的防效为93.66%，优于对照药剂，为防治番茄晚疫病提供更多的用药参考，可在日常农业生产中广泛使用。

参考文献

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●园林花卉●

Toxicity Determination and Greenhouse efficacy of several Fungicides to phytophthora infestans ZHANG Xue1,WANG Xiao-mei2,LU Zhong-bin1,WANG Yan1,HOU Zhi-guang1,ZHAO Xiao-feng1,WANG Xin-hong1,ZHANG Hao1

(1.College of Resource and Environmental Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China）（2.College of Agronomy,Jilin Agricultural University, Changchun 130118,China)

Abstract:The study aims to test sixteen effective fungicides and screens out the proportioning ratio for controlling on phytophthora infestans through indoor screening.The results showed that the EC50 value of cyazofamid、fludioxonil、chitosam-oligosacchrins、pyrazole kresoxim、dimethomorph were 0.21、0.37、0.46、0.65、0.74mg/L，had obviously inhibitory activity.The mixture of fludioxonil and cyazofamid is the most obvious synergism at the ratio of 1∶1 with EC50 value of 3.38,exhibiting obvious synergic effect.The greenhouse efficacy of the mixture at 100g.a.i/hm2was best against phytophthora infestans with the method of greenhouse was spraying,which laid a foundation for better controlling phytophthora infestans.

Key words:phytophthora infestans;fungicide;toxicity test

作者简介：10.16627/j.cnki.cn22-1215/s.2016.05.030

通讯作者：张浩，吉林洮南人，教授，博士，硕士生导师，主要从事农药环境毒理研究。

基金项目：长春市国际科技合作计划（13GH06）。