藏药江孜沙棘对急性血瘀证大鼠血液流变学的影响

赵可惠，王静，苏永文，刘宇，张艺

·药理毒理·

藏药江孜沙棘对急性血瘀证大鼠血液流变学的影响

赵可惠，王静，苏永文，刘宇，张艺

目的：考察藏药江孜沙棘对急性血瘀证大鼠血液流变学的影响。方法：60只大鼠随机均匀分为空白对照组，模型对照组，复方丹参滴丸组，江孜沙棘低、中、高剂量组。预防性灌胃给药，每天1次，连续给药8天后，除空白对照组外，其余大鼠均采用颈部皮下注射盐酸肾上腺素复加冰水浴的方法复制大鼠急性血瘀模型；腹主动脉采血，运用SA-6000自动血流变测试仪检测各组大鼠的血液流变学指标。结果：与空白对照组比较，模型对照组大鼠血液流变学指标具有显著性差异（P＜0.01或0.05）；而江孜沙棘低、中、高剂量组均可使急性血瘀证模型大鼠的全血黏度、红细胞聚集指数等指标降至正常水平以下。结论：江孜沙棘可改善急性血瘀证大鼠血液流变学的异常，证明了藏医药经典著作《晶珠本草》中所记载沙棘具有“益血”的功效。

藏药；江孜沙棘；急性血瘀证；血液流变学

江孜沙棘系胡颓子科(Elaeagnacea)沙棘属(Hippophae Linn)植物江孜沙棘H.rhamnoides L.subsp. gyantsensis Rousi的干燥成熟果实。藏药经典著作《晶珠本草》[1]将其分为大、中、小三种，根据本草考证，分别为云南沙棘H.rhamnoides subsp. yunnanensis Rousi、江孜沙棘H.rhamnoides L.subsp. gyantsensis Rousi和西藏沙棘H.tibetana Schlechtend.。《晶珠本草》[1]记载藏药江孜沙棘果大如青稞，硬而干，金黄色，微油润，益血。但是，目前有关江孜沙棘益血的药效学研究尚未见报道。中医理论认为，血瘀证是由各种原因所致的血液瘀滞、血流不畅的证候，其主要病机是心脉痹阻，脉管阻塞。现代药理研究表明，血瘀证存在血液流变学指标的改变（血液黏、浓、凝、聚）[2-4]。本实验通过观察江孜沙棘对急性血瘀证大鼠模型的血液流变学影响，进一步验证其“益血”功效，为本品的临床推广应用提供实验依据。

1 实验材料

1.1 实验动物

SPF级SD大鼠60只，雌雄各半，体重200-250 g。购自成都达硕生物科技有限公司，实验动物生产许可证号为SCXK（川）2013-24。

1.2 实验场地

本次实验在成都中医药大学药学院实验动物观察室进行，实验动物观察许可证号为SYXK（川）2009-124。实验动物观察室内光照、温度、湿度均适宜，通风条件良好，环境相对安静。

1.3 受试药物

江孜沙棘提取物：称取江孜沙棘药材粉末1000 g，加入15倍量水，煎煮二次，每次2 h，滤过，合并滤液，浓缩，制成每毫升含原药材1.0 g的江孜沙棘提取物。复方丹参滴丸（国药准字Z10950111，批号：130915，天士力制药集团股份有限公司）。

1.4 实验仪器

SA-6000自动血流变测试仪，北京赛科希德科技发展有限公司；TDZ5-WS1多管架自动平衡离心机，长沙湘仪离心机仪器有限公司；ELECTRONC BALANCE电子天平，上海浦春计量仪器有限公司；sartorius BSA124S电子天平，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司。

1.5 实验试剂

这个例子或许能够佐证，《图像学》中那些拟人形象方案，里帕即便采纳的是视觉化图像资源，也未必是他个人的实际观察，而更可能去参考文学作品中“艺格敷词式”描述。毕竟，“特征描述法”这种易于再现画面的文字表达手段，不仅适用于古代的那些佚失无存的图像作品，而且适用于当时那些受到热议，却囿于地理距离无法亲往一睹的赫赫名作。

盐酸肾上腺素注射液，国药准字：H12020526，1 mL：1 mg，批号：1412021，天津金耀药业有限公司；氯化钠注射液，国药准字：H51021158，500 mL/瓶，批号：M14110208，四川科伦药业股份有限公司；水合氯醛，批号：20100614，成都市科龙化工试剂厂，用纯水配成10%溶液供大鼠腹腔注射麻醉用；血流变专用清洗液-SAW，标准标号：Q/CPSKX0026-2014，批号：SAW-20141201，北京赛科希德科技发展有限公司；SAWZ-加样针清洗维护液，标准标号：Q/CPSKX0026-2014，批号：SAWZ-20141201，北京赛科希德科技发展有限公司；肝素钠一次性抗凝负压采血管5 mL，批号：20141101，山东奥塞特医疗器械有限公司；一次性使用血样采集针，批号：20141019，山东奥塞特医疗器械有限公司；注射器、灌胃针等。

2 实验方法

2.1 动物分组及给药

动物适应性喂养4 d后，将雌雄各半的60只SD大鼠，按性别和体重随机分为6组：空白对照组；模型对照组；复方丹参滴丸0.1 g．kg-1剂量组（约相当于临床用量的10倍）；江孜沙棘提取物4.5、9.0、 18.0 g．kg-1剂量组（相当于临床拟用量的5、10、20倍）；每组10只[5-6]。按照18 mL．kg-1体重灌胃（ig）给药，江孜沙棘提取物各剂量组分别ig给予相应浓度药物；空白对照组和模型对照组ig给予等量生理盐水。连续给药8 d，每天1次，每3天称量一次体体重。

2.2 动物造模

预防性连续给药8 d，在末次给药后30 min，除空白对照组外，其余各组采用盐酸注射肾上腺素加冰水浴的方法复制急性大鼠血瘀模型，具体处理方法如下，大鼠颈背部皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg．kg-1，注射2 h后，将大鼠均浸入0-2 ℃冰水中冰浴5 min，取出后用毛巾擦干大鼠毛皮上的水，放置电热片旁烤干，2 h后再次颈背部皮下注射盐酸肾上腺素0.8 mg．kg-1，禁食不禁水20 h[4]。

2.3 血液流变学指标检测

次晨动物造模20 h后，应用10%水合氯醛3 mL．kg-1腹腔注射麻醉后，用一次性抗凝负压采血管腹主动脉采血，采血后轻轻震摇采血管，使血液与负压管内肝素钠抗凝剂充分混匀。血样采集后，室温下静止20 min，采用SA-6000自动血流变测试仪分别测定低切1 / S，5 / S，中切30 / S，高切200 / S四个切变率下的全血粘度、血浆粘度、相对粘度、红细胞聚集指数、卡松粘度等血液流变学指标。

2.4 统计学处理

3 藏药江孜沙棘血液流变学实验结果

3.1 江孜沙棘提取物对急性大鼠血液黏度的影响

表1 江孜沙棘对全血粘度于血浆粘度的影响(±S, n=8)

表1 江孜沙棘对全血粘度于血浆粘度的影响(±S, n=8)

注：和模型组比较，**p＜0．01，*p＜0．05

组别全血粘度（s-1）1 5 30200血浆粘度（s-1）空白对照组103.86±10.3533.70±3.1813.53±1.487.84±0.914.61±1.74模型对照组122.90±11.45*38.26±3.74*15.27±1.51*8.51±0.932.95±0.28*复方丹参滴丸组51.57±7.11**19.13±2.27**9.28±0.88**5.94±0.824.03±0.22**江孜沙棘低剂量65.05±8.11**23.29±2.36**10.76±0.97**6.90±0.673.03±0.32江孜沙棘中剂量77.59±10.63**27.64±3.44**12.17±1.13**7.84±0.683.21±0.38江孜沙棘高剂量80.02±9.41**28.41±281**13.25±1.088.36±0.613.13±0.36

3.2 江孜沙棘提取物对急性大鼠血液流变学指数的影响

表2 江孜沙棘对血液流变学指数的影响 (±S , n= 8)

表2 江孜沙棘对血液流变学指数的影响 (±S , n= 8)

注：和模型组比较，**p＜0．01，*p＜0．05

卡松粘度空白对照组1.95±0.8225.49±9.9713.29±0.905.00±0.49模型对照组2.91±0.42*42.19±7.02*14.53±1.33*5.16±0.74复方丹参滴丸组1.47±0.14**12.79±1.24**8.77±1.17**4.38±0.56*江孜沙棘低剂量2.30±0.3321.71±3.67*9.48±1.29*4.90±0.56江孜沙棘中剂量2.32±0.4822.89±5.22**9.87±0.79**5.43±0.38江孜沙棘高剂量2.70±0.3225.86±4.46**9.56±0.62**5.84±0.43*组别全血高切相对指数全血低切相对指数红细胞聚集指数

从表2可知，模型对照组与空白对照组比较，模型对照组全血高切相对指数、全血低切相对指数与红细胞聚集指数均明显高于空白对照组,差异具有显著性,说明本次实验的大鼠急性血瘀模型造模成功；复方丹参滴丸组的全血高切相对指数、全血低切相对指数、红细胞聚集指数、与卡松粘度均低于模型对照组，差异明显，具有显著性；江孜沙棘低剂量组、江孜沙棘中剂量组、江孜沙棘高剂量组的全血低切相对指数、红细胞聚集指数均明低于模型对照组，差异显著，而给药组的全血高切相对指数和卡松粘度与模型对照组比较偏高或无统计学差异。说明复方丹参滴丸与江孜沙棘均具有一定的活血化瘀作用。其中复方丹参滴丸能明显改善瘀血状况非常明显，能使瘀血证大鼠血液流变学指数低于正常状态，与模型对照组和空白对照组比较，均具有显著差异；江孜沙棘组能明显改善瘀血状况明显，能使血瘀证大鼠全血粘度低于正常状态，与模型对照组合空白对照组比较，均具有显著差异。

4 讨论

急性大鼠血瘀模型是目前常用的动物模型，先给大鼠颈部皮下注射外源性盐酸肾上腺素，然后冰水浴5 min，引起大鼠产生应激性反应，使体内血管收缩，动脉血压上升，交感神经系统发生变，血液黏度升高及红细胞聚集性增强，血液流变学指标发生变化，造成急性大鼠血瘀模型。研究表明，许多疾病的病理过程均与血液流变学指标的改变有关，应用此模型，可以从血液流变性方面反映藏药江孜沙棘提取物的作用特点[4]。

SD大鼠造模之后，全血粘度、全血高切相对指数、全血低切相对指数显著增高，红细胞聚集指数也明显增强，说明大鼠急性血瘀模型造模成功。给药组与模型对照组比较，江孜沙棘组的全血粘度、全血低切相对指数、红细胞凝聚指数等指标明显下降（P＜0.01或P＜0.05），表明江孜沙棘对SD大鼠急性血瘀模型的血液流变学异常具有明显的改善作用。与阳性对照组对比，江孜沙棘低剂量部分血液流变学指标无明显差异（P＞0.05），江孜沙棘中剂量、江孜沙棘高剂量血液流变学指标存在明显差异（P＜0.05），表明江孜沙棘对SD大鼠急性血瘀模型的血液流变学异常的改善作用弱于复方丹参滴丸。

实验结果表明，藏药江孜沙棘具有藏医院经典著作《晶珠本草》记载的“益血”功效。随着江孜沙棘剂量的增大，活血化瘀作用反而降低，这可能是随着剂量的加大，导致药物浓度过大，药物在大鼠胃内分布不均匀，吸收不完全导致。其“益血”功效的最佳剂量有待进一步研究。

[1] 帝玛尔•丹增彭措.晶珠本草[M].上海：上海科技出版社,2012.

[2] 姚旭.赤芍和川芎在血瘀证大鼠上的应用[D].东北农业大学,2013.

[3] 李伟霞,黄美艳,唐于平,等.大鼠急性血瘀模型造模方法的研究与评价[J].中国药理学通报,2011,27(12)：1761.

[4] 刘剑刚,徐凤芹,史大卓,等.川芎赤芍提取物不同配比的活血化瘀作用研究[J].中药新药与临床药理,2005,16(5)：315.

[5] 朱诗塔,李新中,文晓丽,等.大黄不同炮制品活血化瘀作用的比较研究[J].药学实践杂志,2010,28(5)：354.

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（责任编辑：陈思敏）

Effects of Tibetan medicine Jiangzishaji on hemorheological changes in rats with acute blood stasis

/ZHAO Ke-hui, WANG Jing, SU Yong-wen, LIU Yu, ZHANG Yi//(College of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective:The main objective is to observe the effects of Jiangzishaji on hemorheology of rat with acute blood stasis.Method:Sixty rat were divided randomly into blank control group, model control group, compound Danshen dripping pills group, low dose group, middle dose group and high dose group of Jiangzishaji. The rats were orally administered with drugs once a day for 8 days. After the eighth day, the acute blood stasis was induced by subcutaneous injection of adrenaline hydrochloride and ice-water for rats except blank control group. Then blood was collected from abdominal aorta of rats and blood rheology index was detected using SA-6000 automatic blood rheology test apparatus.Result:Compared with blank control group, the hemorheological parameters of model group was significantly different (P＜0.01 or 0.05). However, the low, middle and high dose Jiangzishaji decreased the viscosity of whole blood and erythrocyte aggregation and other index of rats with acute blood stasis to less than normal.Conclusion:Jiangzishaji treat the abnormal hemorheology in rats with acute blood stasis and prove that Jiangzishaji has "beneficial blood" effect recorded in the Tibetan medical classics "Jing-Zhu Materia Medica".

Tibetan medicine; Jiangzishaji; acute blood stasis; hemorheology

R 285.5

A

1674-926X(2016)05-010-03

国家自然科学基金项目（81473428）

成都中医药大学民族医药学院，四川 成都 611137

赵可惠，在读硕士研究生，主要从事民族医学研究 Email：ccp182@163.com

张艺，研究员，博士生导师。主要从事民族药药效物质基础研究 Email：1175332408@qq.com。

2015-10-13