右美托咪定对LPS诱导急性肺损伤的保护作用

雷振营

(开封市祥符区第一人民医院 麻醉科，河南 开封 475000)

右美托咪定对LPS诱导急性肺损伤的保护作用

雷振营

(开封市祥符区第一人民医院 麻醉科，河南 开封 475000)

[摘要]目的探讨右美托咪定(DEX)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤的保护作用。方法随机将实验动物分为生理盐水对照组、LPS模型组、DEX治疗组， LPS组以尾静脉注射LPS复制急性肺损伤模型，颈动脉采血测定动脉血氧分压(PaO2)、PH、碱剩余(BE),支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞百分比及白蛋白浓度,并进行比色法测定肺组织过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法检测血浆IL-6、TNF-α水平。结果与对照组相比，LPS组与DEX组大鼠PaO2、PH、BE值明显降低(P<0.05)，BALF中中性粒细胞百分比及蛋白浓度明显降低(P<0.01)，肺组织MPO活性及血浆IL-6、TNF-α水平均明显升高(P<0.01),同时DEX明显升高了LPS组大鼠PaO2、PH、BE值(P<0.01)，部分逆转LPS组升高的BALF中中性粒细胞百分比(P<0.01)和蛋白浓度(P<0.01)，抑制了LPS组肺组织MPO活性(P<0.01)及血浆TNF-α、IL-6水平(P<0.01)。结论 DEX对LPS诱导的急性肺损伤具有一定的保护作用，可能与减少肺组织中性粒细胞浸润及促炎细胞因子释放进而减轻血管通透性有关。

[关键词]右美托咪定；急性肺损伤；肺保护；MPO活性

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的早期阶段，为临床常见的危重症[1]。ALI常需要机械通气治疗，由于胸廓损伤疼痛明显，故镇痛镇静是诊疗方案的重要组成部分，能减少患者应激反应，稳定患者的血流动力学状态，改善患者预后。右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)为α受体激动剂, 其良好的抑制交感、辅助镇痛、抗炎性反应等作用被认同及应用，但对DEX在急性肺损伤中的应用还未有系统研究，本文对此做了初步探讨。

1材料和方法

1.1动物及分组6～8 周雄性Wistar大鼠39只,随机编号1～39，实验动物由河南大学实验动物中心提供，动物合格证号：医动字第410118号，符合动物实验室三级标准。实验前12 h禁食，随机分为生理盐水对照组(NS组，1～13号)、脂多糖(LPS)模型组(L组，14～26号)、右美托咪定治疗组(L+D组，27～39号)，每组13只。

1.2模型制备及处理参照葛东建等[1]的方法，L组以尾静脉(留置静脉针)注射脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)5 mg/kg制备ALI模型，NS组给予等体积生理盐水，L+D组在制作模型前连续腹腔注射右美托咪定25 μg·kg-1，4 h推注13次，末次注射后30 min注射LPS。各组在模型制作后6 h进行相关指标测定。

1.3方法

1.3.1血气分析暴露右颈总动脉，抽取0.5 mL血进行血气分析检测[动脉血氧分压(PaO2)、pH、碱剩余(BE)]。

1.3.2支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞百分比及白蛋白浓度测定抽取动脉血后，开胸并用预冷的PBS(5 mL)灌洗左肺3次，BALF回收率达90%以上，回收的BALF经4℃离心(14 000 r/min，30 min)后按照相关资料[2]采用Bradford法测定595 nm处样本蛋白浓度；另取1 mL灌洗液用于显微镜下计数板上进行细胞分类计数。

1.3.3比色法测定肺组织过氧化物酶(MPO)活性准确称量各待检大鼠肺组织，用0.9%生理盐水按1∶9制成10%匀浆，匀浆液直接分为两部分：一部分根据Bradford’s方法，用蛋白定量分析试剂盒测上清液中蛋白浓度；另一部分用市售MPO检测试剂盒，按照说明书操作对肺脏组织中MPO活性进行检测。

1.3.4ELISA法检测血浆IL-6、TNF-α水平采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)进行血浆TNF-α、IL-6水平测定,严格按照说明书操作。

2结果

2.1各组PaO2、pH、BE值变化比较 见表1。

表1　各组PaO2、pH、BE值变化比较

注：与NS组相比，1)P<0.01；与L组相比，2)P<0.05。

2.2BALF中中性粒细胞百分比及蛋白浓度见表2。

表2　各组BALF中中性粒细胞百分比及

注：与NS组相比，1)P<0.01；与L组相比，2)P<0.01。

2.3MPO活性变化、血浆TNF-α、IL-6水平改变见表3。

表3　各组 MPO活性、血浆TNF-α、IL-6水平变化比较

注：与NS组相比，1)P<0.01；与L组相比，2)P<0.01。

3讨论

LPS是内毒素的主要成分，体内应用显示出与人类相近的ALI表现，在动物实验中，常选择LPS复制ALI模型[3]。本实验应用静脉注射LPS模拟人类ALI，是比较严重的肺实质损伤，其发生率占胸部闭合性损伤的30%～75%，其中严重者约占12%[4]，呼吸困难是特征性表现之一，与肺水肿及肺泡壁塌陷导致的肺换气功能损伤有关。本研究结果显示：与对照组相比，LPS组与DEX组大鼠PaO2、pH、BE值明显降低(P<0.05)，同时DEX明显升高了LPS组大鼠PaO2、pH、BE值(P<0.01)，提示Dex能够提高PaO2、pH及BE值，减轻肺泡间隔水肿，表明其具有一定程度的减轻肺水肿、改善肺换气、提高氧分压、纠正酸中毒的作用。

中性粒细胞在ALI发病机制中起重要作用，研究表明，去除中性粒细胞后，ALI减弱[5]。为进一步探讨DEX肺保护作用的机制，笔者测定了BALF中中性粒细胞，并检测中性粒细胞溶酶体的特征酶MPO的活性。本研究发现，DEX部分逆转LPS组升高的BALF中中性粒细胞百分比(P<0.01)和蛋白浓度(P<0.01)，抑制了LPS组肺组织MPO活性(P<0.01)及血浆TNF-α、IL-6水平(P<0.01)。DEX减少BALF中中性粒细胞百分比、降低肺组织MPO活性和血浆TNF-α、IL-6水平，提示其具有降低肺泡毛细血管通透性、抑制炎性细胞生成、迁移的作用。本研究表明DEX组炎性细胞浸润也明显少于对照组,证明DEX在急性肺损伤中可以保护肺泡完整性,减少炎性浸润,使得肺泡通透性降低,缓解了肺水肿的发生。

本文结果显示，右美托咪能有效减轻肺水肿，提高氧分压，对LPS诱导的急性肺损伤具有一定的保护作用，其部分机制与减少肺组织中性粒细胞浸润、促炎细胞因子释放进而减轻血管通透性有关。

参考文献：

[1]葛东建，祁宾，李金玉.右美托咪定预处理对急性肺损伤大鼠的保护作用[J].重庆医学，2013，42(28):3405-3407.

[2]Wang CG, Lu XF, Wei JQ,et al. Activation of the spinal extracellular signal-regulated kinase 5 signaling pathway contributes to morphine physical dependence in rats[J]. Neurosci Lett，2011，494(1):38-43.

[3]Chen H，Bai C，Wang X，et al. The value of the lipopolysaccharide-induced acute lung injury model in respiratory medicine[J]. Expert Rev Respir Med, 2010 ,4(6):773-783.

[4]何鹏.重症肺部创伤救治[M].北京：人民军医出版社，2002：110-111.

[5]Abraham E, Carmody A，Shenkar R，et al. Neutrophils as early immunologic effectors in hemorrhage or endotoxemia-induced acute lung injury[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol，2000，279(6):137-145.

[责任编校：赵唯贤]

收稿日期：2015-07-26

作者简介：雷振营(1981-)，男，河南省开封市人，本科，医师，从事临床麻醉工作。

[中图分类号]R 614

[文献标识码]A

[文章编号]1008-9276(2016)02-0068-02