王 倩,占松鹤,李少炎,何长生,周迎春,王 军,陈 曦(.安徽省动物疫病预防与控制中心,安徽合肥 30065;.望江县动物疫病预防与控制中心,安徽望江4600)
安徽省2015年规模猪场高致病性蓝耳病定点监测与分析
王 倩1,占松鹤1,李少炎1,何长生2,周迎春2,王 军2,陈 曦2
(1.安徽省动物疫病预防与控制中心,安徽合肥 230065;
2.望江县动物疫病预防与控制中心,安徽望江246200)
摘 要:[目的]掌握安徽省规模猪场高致病性蓝耳病的感染状况和免疫抗体水平。[方法]采用抗体阻断ELISA、荧光RT-PCR方法检测了24个猪场的588份血清样本和28个场点的790份组织样品。[结果]高致病性蓝耳病个体抗体免疫合格率为78.1%,群体免疫合格率为75.0%;中型猪场的平均免疫抗体合格率为87.1%、小型猪场为63.9%。高致病性蓝耳病病毒核酸个体阳性率为28.7%,群体阳性率为75.0%;中型猪场、小型猪场和生猪屠宰场的高致病性蓝耳病病毒核酸个体阳性率分别为41.7%、19.5%和6%。[结论]2015年安徽省规模猪场的高致病性蓝耳病抗体免疫合格率较高,但存在带毒现象,建议加强疫病的免疫和综合防控。
关键词:高致病性蓝耳病;定点监测;免疫抗体水平;病毒核酸
高致病性蓝耳病(HP-PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异毒株(HP-PRRSV)引起的一种急性、高死亡率传染病,是我国一类动物传染病[1]。按照《2015年国家动物疫病定点监测工作实施方案》要求,调查组分别在养殖环节、屠宰环节设立定点监测点,开展HP-PRRSV感染状况和免疫抗体水平监测,探索建立完善的动物疫病监测预警体系和动物疫病定点监测机制。
1.1监测点设置
选定安徽省全椒县、望江县和霍邱县的6个中型生猪养殖场(存栏100~1 000头)和6个小型生猪养殖场(存栏30~100头)、金安区和临泉县各2个生猪屠宰场、28个固定监测点,于2015年上半年和下半年各开展一次HP-PRRS定点监测和流行病学调查工作。
1.2采样种类和采样数量
选取的猪场均为在采样前一个月左右接受过HP-PRRS疫苗免疫的健康猪群。在规模猪场采集血清和对应扁桃体样品,在屠宰场采集淋巴结样品。在28个固定监测点现场采集血清和扁桃体样品各588份、淋巴结202份。
1.3仪器和试剂
HP-PRRS荧光RT-PCR检测试剂盒(批号:20150415)购自哈尔滨动物生物制品国家工程研究中心有限公司;PRRS抗体检测ELISA试剂盒(批号:99-40959 E681)购自美国爱德士公司;其他仪器:磁珠纯化仪(KingFisher Flex)、荧光定量PCR仪(ABI StepOne Plus)、酶标仪(TECAN SUNRISE REMOTE)、96通道全自动洗板机(ELX405R)等。
1.4检测方法
采用PRRS间接ELISA实验方法(GB/T 18090-2008)和PRRS RTPCR实验方法,均按照试剂盒说明书进行操作。
1.5判定标准
抗体阻断ELISA:S/P≥0.4抗体阳性即判定为免疫合格。荧光RT-PCR:Ct值≤30并出现特定的扩增曲线即判定为HP-PRRS病原学阳性。
2.1血清学监测
2015年共检测24个猪场的588份血清。检测合格459份,个体免疫合格率为78.1%;18个场免疫合格,群体免疫合格率为75.0%。其中,2015年上半年和下半年的平均免疫抗体合格率分别为86.7%和69.4%;免疫抗体合格率达到70%的场点数分别为10个和8个;群免疫合格率分别为83.3%和66.7%(表1)。12个中型猪场和12个小型猪场的HP-PRRS免疫抗体平均合格率分别为87.1%和63.9%(表2)。
表1 2015年HP-PRRS定点监测免疫抗体检测结果
表2 2015年不同规模猪场HP-PRRS免疫抗体合格率
2.2病原学检测
2015年共监测28个场点的790份病原学样品。在19个猪场和2个屠宰场的227份样品中检出HP-PRRSV核酸,个体阳性率为28.7%,群阳性率为75.0%。其中,2015年上半年和下半年HPPRRSV核酸群阳性率分别为86%、64.3%,个体阳性率分别为34.8%、23.9%(表3)。
表3 2015年HP-PRRSV核酸检测结果
12个中型猪场、12个小型猪场和4个生猪屠宰场样本HP-PRRSV核酸阳性率分别为41.7%、19.5%和6%。其中上半年检测发现阳性屠宰场1个、阳性中型养猪场5个、阳性小型养猪场6个,个体阳性率分别为12.7%、45.9%和17.3%;下半年检测发现阳性屠宰场1个、阳性中型养猪场5个、阳性小型养猪场3个,个体阳性率分别为6%、36.2%和21.2%(表4)。
表4 不同类型监测点HP-PRRS病毒核酸检测结果
从免疫抗体检测情况看,被检测的猪场总体上基本达到了农业部规定的70%的群体合格率标准。但从监测时间上看,上半年和下半年的抗体水平不一致。究其原因,可能是上半年生猪补栏集中,免疫也较为集中,下半年由于生猪接近出栏,免疫抗体有所降低。另外,中型规模猪场由于其饲养环境、管理均好于小规模猪场,免疫措施相对到位,所以免疫抗体也相应较高。
从HP-PRRSV核酸检测情况看,猪场的HPPRRS带毒现象较为普遍。洪伟彬[2]等对广东省HP-PRRS的流行病学调查显示,广东省10个地市的样品总阳性率为28.9%;黄长春[3]对福建省泉州市2010—2012年HP-PRRS的病原学调查发现,该地区的猪场病原阳性率为31.94%。本次定点检测发现,HP-PRRSV的核酸阳性率平均为28.7%,说明HP-PRRSV在安徽省普遍存在,且有流行的趋势。HP-PRRS相对于普通PRRS而言,可感染不同年龄的猪,引起的发病率和病死率均较高[4]。免疫不确实或外部条件发生改变引起的应激反应,极易诱发该病的发生,在临床上应引起高度重视。
从不同类型的采样点与病毒阳性率的关系来看,养殖场的HP-PRRSV核酸检出率高于屠宰场,中型猪场高于小型猪场。许平[5]对江苏省响水县HP-PRRS的调查发现,规模猪场的阳性率为68.89%、屠宰场为58.82%。分析其中原因:大中型养殖场的养猪密度比小型养猪场大、养殖数量较多,不同圈舍的猪在调运、转圈等过程中增加了直接接触或间接接触的机会,从而增大了接触传染的机会。而送到屠宰场的一般为成年猪,并且已通过有关检疫部门的初步检测,所以病毒核酸检出阳性率较低。
2015年安徽省定点监测点的HP-PRRS抗体免疫合格率较高,但小型养殖场抗体合格率偏低,是该病发生的高风险猪群;猪场存在HP-PRRSV带毒现象,应加强免疫和防控。
参考文献:
[1] 中华人民共和国农业部. 中华人民共和国农业部公告第1125号[EB/OL].(2008-12-23)[2016-02-26]. http://www.moa. gov.cn/zwllm/tzgg/gg/200812/t20081223_1194404.htm.
[2] 洪伟彬,李永福,叶毅飞,等.广东省高致病性猪蓝耳病流行病学调查[J]. 黑龙江畜牧兽医,2014(1):69-70.
[3] 黄长春. 泉州市2010-2012年猪繁殖与呼吸综合征的病原学调查[J]. 福建畜牧兽医,2015,37(6):8-11.
[4] 吾际舟. 高致病性蓝耳病的研究进展[J]. 中国猪业,2007 (8):4-6.
[5] 许平. 江苏省响水县高致病性猪蓝耳病流行病学调查及防控措施探讨[J].中兽医学杂志,2015(10):19-20.
(责任编辑:朱迪国)
Analysis on Sentinel Surveillance of High Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome in Scale Pig Farms of Anhui Province in 2015
Wang Qian1,Zhan Songhe1,Li Shaoyan1,He Changsheng2,Zhou Yingchun2,Wang Jun2, Chen Xi2
(1. Anhui Animal Disease Prevention and Control Center,Hefei,Anhui 230032;
2. Wangjiang Animal Disease Prevention and Control Center,Wangjiang,Anhui 246200)
Abstract:[Objective] In order to understand the HP-PRRSV infection and immune antibody level in scale pig farms of Anhui province. [Methods] 588 samples of serum from 24 pig farms and 790 samples of tissues from 28 sites were tested by blocking ELISA and RT-PCR. [Results] The qualifi ed rate of HP-PRRS individual immunity was 78.1% and the qualifi ed rate of the group immunity was 75.0%.The average qualifi ed rate of the medium-sized pig farms was 87.1% and that of the small pig farms was 63.9%. The positive rate of HP-PRRSV nucleic acid was 28.7% and the positive rate of the group was 75.0%. The positive rate of the medium-sized pig farms,small pig farms and abattoirs were 41.7%,19.5% and 6% respectively. [Conclusion]The results indicated that the qualifi ed rate of HP-PRRS in scale pig farms of Anhui Province in 2015 was relatively high,but HP-PRRSV still existed in Anhui province. It was recommended to strengthen immunization,prevention and control of HP-PRRS.
Key words:high pathogenicity porcine reproductive and respiratory syndrome;sentinel surveillance;immune antibody level;viral nucleic acid
中图分类号:S851.3
文献标识码:B
文章编号:1005-944X(2016)05-0005-03
DOI:10.3969/j.issn.1005-944X.2016.05.002