山东省2014—2015年主要猪病的监测

夏焱春，张玉玉，曾 昊，张梅洁，焦安琪，杨 杰，郭立辉，任素芳，陈 智，孙文博，于 江，陈 蕾，杜以军，李 俊，吴家强1，（1.山东大学生命科学院，山东济南 250100；2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东济南 250100；.山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东济南 250100）



山东省2014
—2015年主要猪病的监测

夏焱春1，3，张玉玉2，3，曾 昊3，张梅洁3，焦安琪3，杨 杰3，郭立辉2，3，任素芳2，3，陈 智2，3，孙文博2，3，于 江2，3，陈 蕾2，3，杜以军2，3，李 俊2，3，吴家强1，2，3
（1.山东大学生命科学院，山东济南 250100；2.山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东济南 250100；
3.山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东济南 250100）

摘 要：为给猪病防控措施的制定提供参考，2014—2015年对山东省主要猪群疫病进行了抗原抗体检测，分析其感染状况与流行趋势。结果显示：2014—2015年间，猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）抗原阳性率由48.10%降低到40.56%，而其抗体阳性率由74.88%提高到84.39%。伪狂犬病（PR）抗原阳性率由4.07%提高到10.86%，期间的野毒（gE）抗体阳性率和免疫（gB）抗体阳性率基本一致。猪瘟（CFS）抗原阳性率由25.80%降低到12.61%，而其抗体阳性率由56.46%提高到71.54%。除CFS在2014年第二季度高发外，PRRS和PR的发生无明显季节性，三者的抗原阳性率与抗体阳性率大致呈负相关。猪流行性腹泻（PED）抗原阳性率由65.48%提高到77.73%，其在2014年第三季度高发，而在2015年全年高发。传染性胃肠炎（TGE）仅为零星发生。猪链球菌（SS）的抗原阳性率变化不大，平均为9%左右。副猪嗜血杆菌（HPS）抗原阳性率由30.42%降低到20.22%。总之，山东省PRRS 和CFS等疫病的抗原感染率呈下降趋势，抗体阳性率呈上升趋势，说明山东省的主要猪病得到一定程度地控制。同时，依据生猪养殖业中存在的问题，提出了相应的防控对策。

关键词：猪病；抗原；抗体；流行趋势；对比分析

注：夏焱春、张玉玉并列第一作者

山东省是畜牧业大省，2014年的肉类总产量为764.16万吨，占全国的9.11%。随着山东省养猪业的迅速发展及规模化、集约化程度的不断提高，生猪疫病的发生及其对养猪生产的危害呈现日益加重的趋势，主要表现为多病原混合感染、继发感染，免疫抑制性疾病的危害加重等[1-2]。在各猪场的多重感染中，最为常见的混合感染为“PRRS +PCV2”或“PRRS +PCV2+HPS”，给猪场疫病综合防控造成很大压力[3-4]。

本研究针对山东省猪群主要流行病进行了流行病学调查、分析，并根据调查分析结果提出了相应的防控对策。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1样品。病料和血清样品采集于2014—2015年鲁东、鲁中、鲁南、鲁西、鲁北等地区规模化养猪场，基本覆盖了山东省的生猪主产区。其中，病料为被动送检样品，采自临床疑似发病猪群；血清为主动采集样品，采自外观健康的免疫猪群。

1.1.2主要试剂。Prime Script® One Step RT-PCR kit、DNA Marker DL2000购自Takara宝生物工程有限公司；RNA提取试剂盒Trizol购自Invitrogen公司；CSFV、PRRSV、PRV的 ELISA抗体检测试剂盒购自IDEXX公司。

1.2方法

1.2.1抗原检测。在病料中加入PBS研磨稀释，对病毒抗原根据RNA提取试剂盒说明书提取RNA，并以此RNA为模板进行RT-PCR扩增[5-7]；对细菌抗原按照经典方法提取基因组DNA，然后进行特异性PCR扩展[8]。扩增完成后，取PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测观察。

1.2.2血清学检测。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测山东省各地血清样品中的PRRSV、PRV、CSFV抗体。严格按照ELISA试剂盒说明书操作。

2　结果

2.12014—2015年主要猪病的抗原抗体检测结果

2.1.1PRRS检测结果。2014年，检测PRRS疑似病料765份，检出阳性病料368份，阳性率为48.10%；检测血清抗体2 416份，检出抗体阳性1809份，阳性率为74.88%。2015年，检测PRRS疑似病料1 149份，检出阳性病料466份，阳性率为40.56%；检测血清抗体2 889份，检出阳性2 438份，阳性率为84.39%。抗原感染率呈下降趋势，抗体阳性率呈上升趋势。

2.1.2PR检测结果。2014年，检测PR野毒感染疑似病料418份，检出阳性17份，阳性率为4.07%；检测血清抗体2 420份，野毒（gE）抗体阳性率为32.88%（622/1892），免疫（gB）抗体阳性率为71.40%（383/528）。2015年，检测PR野毒疑似病料709份，检出阳性77份，阳性率为10.86%，显著高于2014年；检测血清抗体4 451份，野毒（gE）抗体阳性率为31.33%（1 101/3 514），免疫（gB）抗体阳性率为69.16%（648/937），与2014年的gE、gB抗体阳性率基本一致。

2.1.3CFS检测结果。2014年，检测CFS疑似病料624份，检出阳性病料161份，阳性率为25.80%，明显高于2013年（14.15% ）；检测血清抗体1 323份，检出抗体阳性747份，阳性率为56.46%，与2013年基本一致（56.24%）。2015年，检测疑似CFS病料690份，检出阳性87份，阳性率为12.61%，显著低于2014年；检测血清抗体2 899份，检出抗体阳性2 074份，阳性率高达71.54%，达到免疫合格水平（70%以上），显著高于2013年与2014年。

2.1.4PED、TGE检测结果。2014年，检测PED疑似病料197份，检出阳性129份，阳性率为65.48% ；检测TGE疑似病料86份，阳性率为5.81%。2015年检测PED疑似病料220份，检出阳性171份，阳性率为77.73%，高于2014年；检测TGE疑似病料76份，检出阳性2份，阳性率为2.63%，低于2014年。

2.1.5细菌性疾病检测结果。2014年，从多个猪场送检的162份疑似样品中分离到15株SS，分离率为9.26%，以血清2型为主；从92份疑似样品中分离到28株HPS，分离率为30.43%，以血清4型和5型为主，还检测出血清1型、12型和13型。2015年，从157份疑似样品分离到14株SS，分离率为8.92%，以血清2型为主；从89份疑似样品中分离到18株HPS，分离率为20.22%，以血清4型和5型为主，还检测出血清1型、13型和14型。药敏试验结果表明，2014—2015年的SS、HPS分离株均对头孢类抗生素高度敏感，可作为防治该两种疫病的首选药物；多数分离株对链霉素、卡那霉素、庆大霉素、红霉素、新霉素、林可霉素、复方新诺明等抗生素有一定的耐药性。

图1　2014年和2015年主要猪病抗原阳性率对比

图2　2014年和2015年主要猪病抗体阳性率对比

2.2各季度抗原抗体阳性率变化情况

2.2.1PRRS。2014年，除第一季度外，PRRS抗原阳性率均较高，而第一、二季度的抗体阳性率明显高于第三、四季度。2015年第一、四季度抗原阳性率明显高于第二、三季度，而抗体阳性率除第三季度稍低外，其他季度均较高。由图3可见，抗原阳性率与抗体阳性率大致呈负相关。

图3　PRRS抗原抗体阳性率动态变化

2.2.2PR。由图4可见，PRV野毒（gE）抗原阳性率在2014—2015年各季度一直维持在较低水平；PRV野毒（gE）抗体在2014年第一季度和2015年第一、二季度阳性率较高，而PRV免疫（gB）抗体，除2014年第四季度外，其他季度阳性率均较高。

图4　PR抗原抗体阳性率动态变化

2.2.3CFS。由图5可知，2014和2015年，CSF抗原阳性率在第二季度最高，推测第二季度是CFS的易发季节。2014年第一、三季度的CFS抗体阳性率高于第二、四季度，与抗原阳性率结果相反。2015年各季度抗体阳性率均较高，而抗原阳性率低于2014年。横向对比发现，CFS抗原阳性率与抗体阳性率大致呈负相关。

图5　CSF抗原抗体阳性率动态变化

2.2.4PED与TGE。由图6可知，2014年，仅第三季度的PED阳性率较高，2015年全年阳性率普遍较高，表明在2015年PED已成为危害仔猪的重要疫病。TGE仅在2014年第四季度检测出5例，2015年第三季度检测出2例，表明TGE已不是引起仔猪腹泻的主要病因。

图6　PED和TGE抗原阳性率动态变化

2.2.5细菌性疾病。由图7可知，2014年第一季度及2015年第一、二季度的SS抗原阳性率较低，推测第一季度是SS的低发季节。而2014年第二、四季度及2015年第一季度的HPS抗原阳性率较高，表明HPS已成为猪群全年常见的细菌性疾病。

图7　细菌性疾病抗原阳性率动态变化

3　讨论

从目前情况看，2015年相对2014年，PRRS 和CFS等疫病的抗原感染率呈下降趋势，抗体阳性率呈上升趋势，说明山东省规模化猪场根据疫病流行动态采取的部分防控措施有效，使得主要疫病得到一定程度地控制。

但是，目前山东省生猪养殖业还存在一些问题：猪群中混合感染和继发感染现象十分普遍，主要是PRRSV、PCV-2的病毒性混合感染，以及HPS、SS、支原体、胸膜肺炎放线杆菌等引起的细菌性继发感染[1]。寒冷季节猪群呼吸道疾病严重，主要表现为发热、呼吸困难、咳嗽、腹式呼吸、食欲下降和消瘦等。除了病原性因素外，猪舍条件恶劣、气温急剧变化、饲养密度过大等因素也可诱发猪群呼吸道疾病的发生[2-3]。目前，猪免疫抑制性疾病危害加大。现已发现很多因素会引发猪的免疫抑制，其中临床普遍认可的两大免疫抑制性疾病为PRRS、PCV-2。猪群产生免疫抑制后，自身非特异性免疫水平下降，并持续处于亚健康状态，导致后续的免疫效果不理想或者免疫失败，进而不能对猪群产生有效的保护力[4]。

在生猪疫病形势愈加复杂的现今，如何保障养猪业的持续健康发展，最大限度地降低因疾病造成的经济损失，是猪病研究者的工作重点。而养猪场本身也应当实行健康养殖，增强猪的体质和天然免疫力。

提议山东省应采取“养重于防，防重于治”的综合措施。首先要精心饲养和科学管理，给猪群提供洁净的饮水、均衡的营养饲料和适宜的环境，这是猪群健康养殖的基础[9-10]。其次要建立健全生物安全体系，严格隔离、消毒和防疫。一要制定合理的消毒程序，将消毒工作程序化、规范化；二要严格实行自繁自养、全进全出的生产制度，在必须引种时，应执行严格、科学的隔离和检疫措施，坚决杜绝将新的病原进入猪场；三要制订科学的免疫程序，进行合理地药物保健，依据疫病的现状，合理控制主要疫病，避免盲目性和重复性免疫[11]。

参考文献：

[1]杜以军，吴家强，刘纪玉，等. 当前山东省猪群疫病的流行特点及防控对策[J]. 中国猪业，2014（1）：37-39.

[2]赵兴，赵起超. 规模化养猪中的流行病预防措施[J]. 农家科技旬刊，2015.

[3]甘孟侯. 目前我国猪传染病的流行特点及防治对策[J]. 兽医导刊，2010（7）：28-29.

[4]陈焕春. 当前我国猪病流行动态与防治对策[J]. 兽医导刊，2011（11）：12-14.

[5]张金强，吴家强，孟斌，等. 多重RT-PCR检测PRRSV和CSFV及PRRSV ORF5基因遗传变异分析[J]. 中国兽医学报，2011，31（5）：633-637.

[6]刘洋，李俊，时建立，等. 多重PCR诊断猪细小病毒、伪狂犬病毒和圆环病毒Ⅱ型方法的建立和应用[J]. 家畜生态学报，2010（5）：95-98.

[7]张弥申，陶海英，张玉玉，等. 猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻的鉴别诊断与返饲技术要点[J]. 北方牧业，2013（23）：17-17.

[8]张玉玉，吴家强，任素芳，等. 仔猪多发性关节炎病原菌的分离鉴定及耐药性研究[J]. 西南农业学报，2012，25（2）：680-685.

[9]王景成，周佳萍，Mickeal，等. 浅析养猪生产对环境的污染和防治对策[J]. 饲料工业，2009，30（9）：46-49.

[10]刘志辉. 规模化猪场的精细化管理[J]. 猪业科学，2013 （1）：108-108.

[11]倪娇，隋军锋，焦连国，等. 4种病毒性猪病流行病学调查与分析[J]. 中国兽药杂志，2012，46（6）：8-10.

（责任编辑：朱迪国）

Detection and Comparative Analysis of Main Epidemic Porcine Diseases in Shandong Province from 2014 to 2015

Xia Yanchun1，3， Zhang Yuyu2，3，Zeng Hao3，Zhang Meijie3，Jiao Anqi3，Yang Jie3，Guo Lihui2，3，Ren Sufang2，3，Chen Zhi2，3，Sun Wenbo2，3，Yu Jiang2，3，Chen Lei2，3，Du Yijun2，3，Li Jun2，3，Wu Jiaqiang1，2，3
（1.Academy of Life Sciences，Shandong University，Jinan，Shandondg 250100；2. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Shandong Academy of Agricultural Sciences，Jinan，Shandong 250100；3. Shandong Key Laboratory of Animal Disease Control and Breeding，Jinan，Shandong 250100）

Abstract：In order to provide references for formulating the prevention and control measures，the antigens and antibodies of the main epidemic diseases of swine were detected in Shandong province from 2014 to 2015 and their infection status and epidemic trend were analyzed. The results showed that the antigen positive rate of porcine reproductive and respiratory syndrome （PRRS） decreased from 48.10% to 40.56%，while the antibody positive rate of PRRS increased from 74.88% to 84.39%. The antigen positive rate of pseudorabies （PR） increased from 4.07% to 10.86%， while the antibody positive rate of PR gE and gB in 2015 were basically same as that in 2014. The antigen positive rate of classical swine fever （CFS） decreased from 25.80% to 12.61%，while its antibody positive rate increased from 56.46% to 71.54%. The occurrences of PRRS and PR were not signifi cantly seasonal and the incidence of CFS was high in the second quarter of 2014. The antibody positive rates of PRRS，PR and CFS were negatively correlated with their antigen positive rates. The antigen positive rate of porcine epidemic diarrhea （PED） increased from 65.48% to 77.73%.The quarterly results showed that there was high incidence in the third quarter of 2014 and throughout the whole year of 2015. Transmissible gastroenteritis （TGE） was only sporadic. The antigen positive rates of streptococcus suis （SS） in 2014 and 2015 were about 9% invariably，while the antigen positive rate of haemophilus parasuis （HPS） decreased from 30.42% to 20.22%. In short，the main epidemic porcine diseases ，such as PRRS and CFS， presented a downtrend of antigen infection rates and an uptrend of antibody positive rates from 2014 to 2015 in Shandong province.It indicated that main epidemic porcine diseases were controlled in Shandong province.

Key words：epidemic porcine diseases；antigen；antibody；epidemic trend；comparative analysis

中图分类号：S852.23

文献标识码：B

文章编号：1005-944X（2016）05-0001-05

DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2016.05.001

基金项目：国家自然科学基金面上项目（31572550）；山东省农业重大应用技术创新课题；山东省现代农业产业技术体系；泰山学者特聘专家工程经费；重大科技成果培育计划（2014CGPY04）

通讯作者：吴家强