外周血中CD19+CD5+B细胞和白细胞介素-10对系统性红斑狼疮患者病情的影响

鄂维建，赵玲莉，李玉玲

（青海大学附属医院检验科，青海西宁810001）



外周血中CD19+CD5+B细胞和白细胞介素-10对系统性红斑狼疮患者病情的影响

鄂维建，赵玲莉，李玉玲

（青海大学附属医院检验科，青海西宁810001）

摘要：目的探讨外周血中CD19+CD5+B细胞和白细胞介素-10（IL-10）对系统性红斑狼疮（SLE）患者病情发生、发展的影响，为其临床研究提供参考依据。方法选择65例稳定期SLE患者及65例活动期SLE患者，同时选择70例健康人群作为对照组，采用流式细胞术检测外周血中CD19+CD5+B细胞数量，采用酶联免疫吸附法检测IL-10水平。比较3组的差异，并分析上述指标与SLE活动度评分（SLEDAI）及补体的相关性。结果活动组及稳定组CD19+CD5+B细胞数量、白蛋白、C3、C4均低于对照组，IL-10、红细胞沉降率（ESR）高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），活动组CD19+CD5+B细胞数量、白蛋白、C3、C4低于稳定组，SLEDAI评分、IL-10、ESR高于稳定组，差异有统计学意义（P＜0.05）。CD19+CD5+B细胞数量与SLEDAI评分呈负相关，IL-10与SLEDAI评分呈正相关（P＜0.05）。随着SLEDAI评分的增加，CD19+CD5+B细胞数量呈下降趋势，而IL-10水平呈上升趋势，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论SLE患者外周血CD19+CD5+B细胞数量降低，而IL-10水平升高，随着病情活动程度的增加，外周血CD19+CD5+B细胞及IL-10水平变化更明显，可以作为评价SLE活动性的指标。

关键词：B细胞；白细胞介素-10；系统性红斑狼疮

临床上，系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）主要表现为多系统或器官病变和血清中出现多种自身抗体，是一种原因尚未明确的自身免疫性疾病［1］。研究发现，SLE的发生、发展与B细胞的异常增殖及活化相关，其中以CD19+CD5+B细胞影响最大［2］。其不仅可以通过多种自然抗体参与免疫应答并维持免疫平衡，而且通过分泌白细胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）抑制炎症反应的进展。在该背景下，本研究探讨外周血中CD19+CD5+B细胞和IL-10对SLE患者病情发生、发展的影响，为临床研究提供参考依据。

1　资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年6月-2015年8月200例65例稳定期SLE患者及65例活动期SLE患者。其中，稳定组男性33例，女性32例；年龄22～67岁，平均（48.32±5.11）岁。活动组男性34例，女性31例；年龄20～68岁，平均（48.41±5.21）岁。同时选择70例健康人群作为对照组。其中，男性36例，女性34例，年龄20～67岁，平均年龄（48.36±4.78）岁。3组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。纳入标准：①活动期患者均有不同程度的发烧、脱发、关节疼痛与肿胀、蛋白尿、低蛋白血症、浮肿等临床表现，部分患者存在心包炎、心内膜炎等症状；②稳定期患者无新近出现或近期加重的临床症状。排除标准：既往有心肺、肝肾功能不全，感染性疾病、肿瘤性疾病、类风湿关节炎、急性风湿热、原发性肾小球疾病等。所有患者签署知情同意书。

1.2 实验方法

记录患者信息，空腹抽取静脉血，3 000 r/min离心5 min，采用流式细胞仪（美国Becton Dickinson公司）检测外周血中CD19+CD5+B细胞数量，采用酶联免疫吸附法检测IL-10水平（试剂盒购自上海康斯尔泰生物科技有限公司），采用散射比浊法测定补体C3、C4水平（试剂盒购自杭州联科生物技术有限公司），正常值：C3：0.79～1.52 g/L，C4：0.16～0.38 g/L；采用魏氏法测定红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR），正常值≤20 mm/1 h。系统性红斑狼疮活动度评分（systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI）对SLE病情的判断：0～4分为基本无活动；5～9分为轻度活动；10～14分为中度活动；≥15分为重度活动。

1.3 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，数据资料经正态性检验，两组间的比较用独立样本t检验；多组资料比较用方差分析，如方差分析齐，则用LSD-t检验法进行两两比较；趋势检验用Linear-by-Linear Association线性相关χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1 3组受试者SLE相关指标比较

3组受试者SLEDAI评分、CD19+CD5+B细胞数量、IL-10、白蛋白、C3、C4及ESR比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；两两比较时，活动组及稳定组CD19+CD5+B细胞数量、白蛋白、C3、C4低于对照组，IL-10、ESR高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），活动组CD19+CD5+B细胞数量、白蛋白、C3、C4均低于稳定组，SLEDAI评分、IL-10、ESR高于稳定组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1　3组受试者SLE相关指标比较（±s）

表1　3组受试者SLE相关指标比较（±s）

组别　SLEDAI评分　CD19+CD5+B细胞/％　IL-10/ （mmo/L）　　白蛋白/ （g/L）　C3/ （g/L）　C4/ （g/L）　ESR/ （20 mm/1 h）稳定组（n=65）　7.83±10.23　 6.62±1.55　 15.82±2.53　 36.80±0.23　 0.80±0.23　 0.18±0.04　 24.38±4.43活动组（n=65）　13.91±17.43　 4.68±1.43　 18.03±2.44　 29.47±4.13　 0.47±0.13　 0.08±0.04　 41.03±4.24对照组（n=70）　-　14.45±1.44　 8.81±1.51　 50.92±5.31　 0.92±0.31　 0.32±0.05　 14.45±4.44 F值　4.233　3.981　5.845　2.805　1.994　2.232　4.853 P值　0.000　0.000　0.000　0.001　0.045　0.009　0.000

续表1

2.2 CD19+CD5+B细胞及IL-10与其他指标的相关性

CD19+CD5+B细胞数量与SLEDAI评分呈负相关，IL-10与SLEDAI评分呈正相关（P＜0.05）；与其他指标无关（P＞0.05）。见表2。

表2　其他指标与CD19+CD5+B细胞及IL-10的相关性

2.3 CD19+CD5+B细胞及IL-10趋势分析

随着SLEDAI评分的增高，CD19+CD5+B细胞数量呈降低趋势，而IL-10水平呈上升趋势，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3　CD19+CD5+B细胞及IL-10趋势分析（±s）

表3　CD19+CD5+B细胞及IL-10趋势分析（±s）

组别　　例数　CD19+CD5+B细胞/％　IL-10/（mmo/L）无活动　65　7.62±1.82　16.42±2.34轻度活动　32　6.51±1.87　17.32±1.73中度活动　18　4.41±1.83　18.02±2.23重度活动　15　3.81±1.51　20.92±1.81 F值　6.763　5.176 P值　0.000　0.000

3　讨论

目前，SLE的发病机制尚不明确，但已证实其发生、发展过程与调节性B细胞存在相关性［3］。调节性B细胞通过免疫抑制作用参与自身免疫性疾病的发生过程，是一种不依赖免疫球蛋白，且具有负向免疫调节的亚群，其中CD19+CD5+B细胞数目前公认的调节性B细胞［4］。有研究指出，多种自身免疫性疾病，特别是SLE患者存在调节性B细胞缺陷［5］。

本研究分析发现，活动组及稳定组CD19+CD5+B细胞数量、白蛋白、C3、C4均低于对照组，且活动组CD19+CD5+B细胞数量、白蛋白、C3、C4均低于对照组。可见SLE患者CD19+CD5+B细胞明显减少，在活动期患者中更明显，与杨金华等［6］的研究结果一致，该研究发现，SLE患者与健康对照组外周血CD19+CD5+B细胞百分率分别为（5.7±2.1）％和（19.1±2.9）％，两者比较差异有统计学意义（t=2.431，P=0.005）；SLE患者低活动组与高活动组分别为（6.5±1.9）％和（5.1±2.2）％，两者与健康对照组比较差异有统计学意义（t=13.819，P=0.001和t=16.234，P=0.001）。分析认为SLE患者存在调节性B细胞缺陷，进而引起CD19+CD5+B细胞数量减少，使其抑制免疫应答、维持免疫功能的作用降低，最终导致SLE的发生［7］，因此可以认为CD19+CD5+B细胞参与SLE的发生过程。进一步相关性分析发现，CD19+CD5+B细胞数量与SLEDAI评分呈负相关，随着SLEDAI评分的增加，CD19+CD5+B细胞数量呈降低趋势。可见CD19+CD5+B细胞不仅参与SLE的发生，且与SLE疾病进展及活动度密切相关。

IL-10是一种Th2和部分调节性T细胞分泌的多源性细胞因子，可以抑制巨噬细胞的抗原提呈作用，进而刺激B细胞增殖、分化及抗体生成，通过上述过程可以参与炎症反应的发生［8-9］；另外部分调节性B细胞亦可产生IL-10，但该类IL-10具有调节免疫应答的作用，通过抑制免疫反应保护机体免受损伤［10-11］。本研究发现，活动组及稳定组IL-10高于对照组，且活动组IL-10高于对照组；进一步分析发现IL-10与SLEDAI评分呈正相关，随着SLEDAI评分增加，IL-10水平呈上升趋势。可见IL-10水平与SLE疾病发生及活动度相关。

本研究进一步分析未发现CD19+CD5+B细胞与IL-10水平存在相关性。分析认为SLE患者中随着CD19+CD5+B细胞数量降低，其分泌的具有调节功能的IL-10浓度随之下降，因此免疫调节能力降低［12］；而SLE患者升高的IL-10水平可能与炎症反应引起的组织破坏等相关，使参与炎症反应的IL-10水平升高。

综上所述，本研究显示，SLE患者，外周血CD19+CD5+B细胞降低，而IL-10水平升高，上述表现在活动期患者中更明显，随着病情活动程度的增加，外周血CD19+CD5+B细胞及IL-10水平变化更明显，其可以作为评价SLE活动性的指标。

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（童颖丹编辑）

Expression and significance of CD19+CD5+B cells and IL-10 in patients with systemic lupus erythematosus

Wei-jian E，Ling-li Zhao，Yu-ling Li
（Clinical Laboratory，the Affiliated Hospital of Qinghai University，Xining，Qinghai 810001，China）

Abstract:Objective To study the expressions of CD19+CD5+B cells and interleukin 10（IL-10）and their clinical significance in patients with systemic lupus erythematosus（SLE）. Methods In this study 65 SLE-stable patients，65 SLE-active patients and 70 healthy control people were included. CD19+CD5+B cell subsets were detected with flow cytometry. IL-10 level in serum was detected with enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）. The correlations of CD19+CD5+B cell count and serum IL-10 level with SLE disease activity index（SLEDAI）score and complement were analyzed. Results The CD19+CD5+B cell count，albumin，C3 and C4 in the SLE-active group and SLE-stable group were significantly lower than those in the control group（P＜0.05）. The IL-10 and ESR in the SLE-active and stable groups were higher than those in the control group，the differences were statistically significant（P＜0.05）. The CD19+CD5+B cell count，albumin，C3 and C4 in the SLE-active group were significantly lower than those in the SLE-stable group（P＜0.05）. The SLEDAI score，IL-10 and ESR in the SLE-active group were higher than those in the SLE-stable group，the differences were statistically significant（P＜0.05）. The CD19+CD5+B cell count was negatively related with the SLEDAI score，but IL-10 was positively related with the SLEDAI score（P＜0.05）. As the SLEDAI score increased，CD19+CD5+B cell count showed a lowering trend，and IL-10 showed an uptrend.Conclusions CD19+CD5+B cells and IL-10 may participate in the occurrence and development of SLE. The changes of CD19+CD5+B cells and IL-10 in the peripheral blood might contribute to the pathogenesis and correlate with the disease activity of SLE，which can be used as evaluation indexes of SLE activity.

Keywords:B cell；interleukin 10；systemic lupus erythematosus

中图分类号：R593.24

文献标识码：A

DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2016.11.012

文章编号：1005-8982（2016）11-0059-04

收稿日期：2015-11-16