金蚕胶囊质量标准的研究

李春花　张新宏　孙　琛

(河北省衡水市食品药品检验检测中心业办室，河北　衡水　053000)

制剂与质量控制

金蚕胶囊质量标准的研究

李春花张新宏1孙琛1

(河北省衡水市食品药品检验检测中心业办室，河北衡水053000)

【摘要】目的建立金蚕胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对金蚕胶囊中僵蚕、薏苡仁、柴胡、太子参进行鉴别；采用高效液相色谱法对金蚕胶囊中黄芪的有效成分黄芪甲苷的含量进行测定。结果薄层色谱中斑点清晰,易于观察。黄芪甲苷的进样量在60～900 ng范围内呈良好的线性关系(r=0.999 7)，平均回收率为98.42%，标准编差(RSD)=0.7%。结论薄层色谱法操作简便，分离效果好，专一性强；高效液相法色谱重复性好，稳定性高，准确可行，能有效地控制金蚕胶囊的质量。

【关键词】质量控制；中成药；胶囊；色谱法，薄层；色谱法，高压液相

金蚕胶囊是河北省衡水市中医院院内制剂，主要由黄芪、僵蚕、黄连、薏苡仁、太子参、柴胡、丹参等中药组成，该制剂应用广泛，具有益气养阴、活血祛痰的功效，主要用于气血两虚、痰瘀互结所致的口干、口渴、尿频、尿多、消瘦等症状，以及2型糖尿病的治疗。现行标准只是对黄芪、黄连、丹参进行了薄层鉴别，不能全面控制该制剂的质量。为了更好地控制药品质量，使临床用药安全有效，本试验采用薄层色谱法[1]及高效液相色谱法[1]进行质量标准的研究，结果如下。

1仪器与试药

1.1仪器E2695高效液相色谱仪，美国Waters公司；ELSD 2000ES型蒸发光散射检测器，美国Alltech公司；AG135型电子天平，瑞士梅特勒-托利多公司；硅胶G薄层析，青岛海洋化工有限公司；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为分析纯。1.2试药僵蚕对照药材，河北省衡水市食品药品检验检测中心标本室；薏苡仁对照药材(批号：121254-200301)、柴胡对照药材(批号：120992-201108)、太子参对照药材(批号：121004-200604)、黄芪甲苷对照品(批号：110781-200613)，中国药品生物制品检定所；金蚕胶囊(冀药制字Z20051525，批号：20130108、20130312、20130520)，河北省衡水市中医院制剂室。

2方法与结果

2.1薄层鉴别

2.1.1僵蚕取本品3 g，研细，加甲醇10 mL，超声处理10 min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取僵蚕对照药材粉末0.5 g，加甲醇5 mL超声处理5 min，上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法吸取上述溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。结果见封3，图1。

2.1.2薏苡仁取本品3 g，加石油醚(60～90 ℃)10 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(60～90℃)1 mL使其溶解，作为供试品溶液。另取薏苡仁对照药材0.5 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法吸取上述溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯-醋酸(10∶3∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。结果见封3，图2。

2.1.3柴胡取本品3 g，加甲醇20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 mL溶解，用水饱和的正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次(20 mL，10 mL)，洗液弃去，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20 mL，弃去洗液，分取正丁醇液，浓缩至干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取柴胡对照药材0.5 g，加甲醇10 mL同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法吸取上述溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以50%香草醛硫酸溶液-甲醇-冰醋酸(1∶25∶25)的混合溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见封3，图3。

2.1.4太子参取本品2 g，加70%乙醇15 mL，温浸30 min，滤过，滤液浓缩至0.5 mL，作为供试品溶液。另取太子参对照药材0.2 g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法吸取上述溶液5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-17%氢氧化铵(4∶4∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮丙酮试液，加热3 min。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果见封3，图4

2.2含量测定

2.2.1色谱条件色谱柱：Shim-pack VP-ODS C18(4.6×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈-水(32∶68)；检测器：蒸发光散射检测器；流速：1.0 mL/min；理论板数按黄芪甲苷计算不低于4 000。

2.2.2对照品溶液的配制精密称定黄芪甲苷对照品，加甲醇制成60 μg/mL的溶液，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.3供试品溶液的配制取装量差异项下的本品，混匀，研细，取约3 g，精密称定，精密加甲醇50 mL，称定质量，超声处理(功率250 W，频率45 kHz)30 min，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，精取续滤过25 mL，蒸干，残渣加水20 mL，微热溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次20 mL，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次40 mL，弃去氨液，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。

2.2.4阴性对照试验按处方及制备工艺制备不含黄芪的阴性样品，按2.2.3项下方法制备阴性对照溶液。按照2.2.1项下色谱条件，吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10 μL，分别注入液相色谱仪。结果供试品溶液色谱中，在与对照品色谱峰相应的保留时间处有吸收峰，而阴性溶液则在相应的保留时间处无吸收峰。对照品、供试品和阴性对照溶液高效液相色谱图见图5-7。

图5　黄芪甲苷对照品溶液高效液相色谱图

图6　供试品溶液高效液相色谱图

图7　阴性(缺黄芪)溶液高效液相色谱图

2.2.5线性关系精密吸取2.2.2项下对照品溶液1.0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0 μL，分别注入液相色谱仪，按2.2.1项下色谱条件测定黄芪甲苷的吸收峰峰面积，以对照品进样量对数值为横坐标(X)，以峰面积对数值为纵坐标(Y)，绘制标准曲线。结果表明，黄芪甲苷进样量在60～900 ng范围内线性关系良好，回归方程为Y=1.192X+5.826，r=0.999 7。

2.2.6精密度试验精密吸取同一浓度对照品溶液10 μL，重复进样6 次，测定黄芪甲苷的峰面积，结果黄芪甲苷峰面积相对标准偏差(RSD)=0.5%，表明精密度良好。

2.2.7稳定性试验取2.2.2项下对照品溶液，于室温放置0、3、6、9、12、24 h,按2.2.1项下色谱条件进行分析，黄芪甲苷峰面积RSD=1.0%。结果表明，供试品溶液在0～24 h内基本稳定。

2.2.8重复性试验取金蚕胶囊内容物(批号20130520)3 g，精密称定，共6份，按2.2.3项下方法制备供试品溶液，按2.2.2项下方法制备对照品溶液，按2.2.1项下色谱条件测定黄芪甲苷的含量，测得黄芪甲苷含量平均值为每粒含0.064 mg，RSD=0.8%。

2.2.9加样回收实验称取已知黄芪甲苷含量的金蚕胶囊(0.064 mg/粒，装量差异为0.300 5，批号20130520)1.5 g，共6份，精密称定，分别精密加入2.2.2项下对照品溶液(60 μg/mL)2.0、3.0、5.0 mL，按2.2.3项下供试品溶液的制备方法配制加样供试品溶液，吸取加样供试品溶液10 μL，注入液相色谱仪，按2.2.1项下色谱条件测定加样供试品溶液中黄芪甲苷的含量，计算回收率。结果黄芪甲苷平均回收率为98.42%，RSD=0.7%，计算回收率见表1。

表1　黄芪甲苷加样回收率试验结果

2.2.10样品的含量测定取3批样品，按2.2.2项和2.2.3项方法分别制备对照品溶液和供试品溶液，按2.2.1项下色谱条件，精密吸取10 μL，注入液相色谱仪测定，按外标法计算。结果见表2。

表2　3批样品中黄芪甲苷含量测定结果

3讨论

金蚕胶囊为复方制剂，成分复杂，采用薄层色谱法对制剂中的僵蚕、薏苡仁、柴胡、太子参进行鉴别，操作简便，分离效果好，专一性强。采用高效液相法测定制剂中黄芪的有效成分黄芪甲苷的含量，方法重复性好，稳定性高，准确可行，能有效地控制金蚕胶囊的质量，确保临床疗效。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[M].2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录34-35，36-37.

(本文编辑：石康)

doi:10.3969/j.issn.1002-2619.2016.03.035

作者简介：李春花(1967—)，女，副主任药师，学士。从事中药、化学药品的检验工作。

【中图分类号】R283.65；R917.4

【文献标识码】A

【文章编号】1002-2619(2016)03-0433-03

(收稿日期：2014-05-13)

1河北省衡水市食品药品检验检测中心化学室，河北衡水053000