中药复方锦黄口服液体外抑菌及防治仔猪腹泻的试验效果

李仁阁,胡宏伟,张成虎

兰州市畜牧兽医研究所,甘肃 兰州 730050

中药复方锦黄口服液体外抑菌及防治仔猪腹泻的试验效果

李仁阁,胡宏伟,张成虎

兰州市畜牧兽医研究所,甘肃 兰州 730050

试验通过分组，观察复方中药制剂锦黄口服液预防和治疗仔猪腹泻的临床效果，以及对引起仔猪腹泻常见病原菌的抑菌效果。结果表明：“锦黄散”对猪致病性大肠杆菌、魏氏梭菌表现为不敏感，而对空肠弯曲菌、克雷伯氏菌、仔猪痢疾密螺旋体和坏死杆菌均表现为低敏。锦黄口服液对吮乳仔猪的治愈率为88.57%，总有效率为92.90%，预防保护率为100%，与黄栀口服液、甲磺酸左氧氟沙星注射液相比，临床治疗效果显著。

仔猪腹泻；锦黄口服液；试验效果

仔猪腹泻是一种典型的多因素性疾病。引起仔猪腹泻的病因复杂，长期以来仔猪腹泻是引起仔猪生长受阻和仔猪高死亡率的重要原因，给养猪业带来巨大的经济损失。由于该病的传染性与非传染性因素相互影响又互为因果，给预防和治疗带来诸多难度。兽医临床长期大量使用抗生素类药物导致致病菌耐药性产生，疗效愈来愈差，同时扰乱了仔猪胃肠道菌群的平衡，影响仔猪的生长发育，药物残留对公共卫生和食品安全造成威胁。应用高效、安全、不易产生耐药性和低残留药物成为防治仔猪腹泻亟需解决的问题。

本文利用中草药无污染、无残留、不易产生耐药性、不污染动物源性食品的特点，针对仔猪腹泻，以“清热燥湿、收敛止泻、健脾消食”为防治原则和选择药物原则，研制出以党参、黄连、诃子、白芍等为主要成分的锦黄口服液及其散剂，临床试验表明，锦黄口服液能有效的治疗仔猪腹泻，对引起仔猪腹泻的常见病原菌也有一定的抑制作用。

1 试验材料

1.1 试验药物

中药复方制剂锦黄口服液(兰州市畜牧兽医研究所自制)

1.2 对照药品

黄栀口服液(河南和牧动物制药有限公司)；甲磺酸左氧氟沙星氯化钠注射液(北京华润双鹤药业股份有限公司)；阿莫西林粉(潍坊普力美动物药业有限公司)。

1.3 菌株

由兰州市百源基因技术有限公司提供，试验前在斜面培养基上接种复活。

1.4 培养基

伊红美蓝琼脂培养基、沙门氏菌显色培养基、TSC平板、FTG培养基、SS平板、麦康凯培养基、营养琼脂平板、改良CCDA培养基、哥伦比亚血琼脂平板、血琼脂平板上(含多粘菌素B，10%脱纤维羊血或胎牛血清)、脑心浸液血琼脂培养基(含新生霉素200 μg/mL和万古霉素7.5 μg/mL)、水解酪蛋白(Mueller-Hinton)培养基，以上培养基均购自(兰州市百源基因技术有限公司)。

1.5 试验动物

选择甘肃省兰州市某大型猪场8～28日龄的患腹泻的吮乳仔猪，28～31日龄体重相近的断奶仔猪和选择28日龄、体重相近的健康断奶仔猪。

2 试验方法

2.1 菌液的制备

将猪致病性大肠杆菌、魏氏梭菌、克雷伯氏菌、空肠弯曲菌、仔猪痢疾密螺旋体、坏死杆菌分别接种于水解酪蛋白琼脂平板37℃恒温培养箱中培养24 h，挑选单个菌落接种于肉汤培养基，37℃恒温培养箱中培养16～18 h后，菌种浓度相当于1×108CFU/mL；用肉汤培养基作稀释液稀释1000倍，使稀释后的菌液浓度约为1×105CFU/mL，4℃冰箱保存备用。

2.2 培养基的制备

称取胰酪陈大豆酵母浸膏肉汤培养基，溶于蒸馏水，分装于试管中，高压灭菌后置于4℃冰箱备用。称取水解酪蛋白琼脂培养基，溶于蒸馏水，高压灭菌后分别倾注于12个无菌90 mm平皿中，待凝固后4℃冰箱保存备用。

2.3 涂菌

吸取100 μL1×105CFU/mL的各菌液于90 mm水解酪蛋白琼脂平板培养基上，涂布均匀，待菌液干燥后备用。

2.4 打孔

选取孔径4 mm的打孔器(已灭菌)，在涂菌液平板上打孔，每板打3个孔，每孔加复方中草药水煎剂50 μL，每种菌做3个重复板。37℃恒温培养箱培养24 h后，用游标卡尺测量抑菌圈直径，判断药液猪致病性大肠杆菌、魏氏梭菌、克雷伯氏菌、空肠弯曲菌、仔猪痢疾密螺旋体、坏死杆菌的抑菌效果。抑菌圈直径d>20 mm为极敏，15

2.5 临床治疗试验

2.5.1 吮乳仔猪临床治疗试验 选择自然患腹泻的吮乳仔猪120头，随机分为试验组70头和对照组50头，分别使用锦黄口服液及对照药物进行治疗。试验组70头灌服锦黄口服液5 mL (含生药5g) ∕次，2次∕d，连用3 d；对照组25头灌服黄栀口服液，5 mL (含生药5 g) ∕次，2次∕d，连用3 d；对照组25头肌内注射甲磺酸左氧氟沙星注射液，1 mL(0.03 g)/kg，2次∕d，连用3 d。

2.5.2 断奶仔猪临床治疗试验 选择自然患腹泻的断奶仔猪40头，随机分为试验组20头和对照组20头，分别使用锦黄口服液和对照药物进行治疗。试验组20头灌服锦黄口服液，10 mL (含生药10g)∕次，2次∕d，连用3 d；对照组10头灌服黄栀口服液，10 mL (含生药20 g)∕次，2次∕d，连用3 d。对照组10头肌内注射甲磺酸左氧氟沙星注射液，1 mL(0.02 g)/kg，2次/d，连用3 d。

2.6 临床疗效判定标准

2.6.1 痊愈 经治疗，患病仔猪精神正常，吃奶或吃食正常，粪便成形、软硬适中、颜色及气味正常，临床症状完全消失，恢复正常。

2.6.2 有效 经治疗，患病仔猪精神状态好转，食欲增强，粪便性状好转、其中水分明显减少，临床症状缓解。

2.6.3 无效 经治疗，患病仔猪精神、食欲无好转，粪便性状无好转、病情加重或改用其他药物治疗，甚至死亡。

2.7 统计方法

采用统计软件SPSS 19.0进行统计分析。

3 结果

3.1 锦黄口服液的体外抑菌作用

由表1可以看出，由黄连、地锦草、广藿香、苍术所组成的中草药复方水煎剂对猪致病性大肠杆菌几乎没有抑菌作用，表现为不敏感，而对空肠弯曲菌、魏氏梭菌、克雷伯氏菌、仔猪痢疾密螺旋体和坏死杆菌均表现一定的抑菌作用，为低敏。见下图。

表1 锦黄口服液的体外抑菌效果

3.2 锦黄口服液对吮乳仔猪临床治疗试验效果

锦黄口服液对吮乳仔猪腹泻的治愈率和总有效率分别为88.57%和92.90%，明显高于对照组，差异显著(\%P\%<0.05)，说明锦黄口服液对吮乳猪腹泻有较好的治疗作用。结果见表2。

3.3 锦黄口服液对断奶仔猪腹泻临床治疗试验效果

锦黄口服液对断奶仔猪腹泻的总有效率和治愈率分别为90.00%和95.00%，显著高于对照组(\%P\%<0.05)，黄栀口服液与甲磺酸左氧氟沙星注射液无显著性差异。说明锦黄口服液对断奶猪腹泻有较好的治疗作用，效果显著。结果见表3。

表2 锦黄口服液治疗吮乳仔猪腹泻疗效

注：同一列数据右肩标小写字母表示差异显著 (\%P\%<0.05)。

表3 锦黄口服液对断奶仔猪腹泻治疗效果

注：同一列数据右肩标大写字母表示差异显著(\%P\%<0.05)。

4 讨论

本文成功研制的锦黄口服液尽管对引起仔猪腹泻的几种常见病原菌有一定的抑菌作用，但体外抑菌试验对中草药的抗菌作用只能是一种参考性的方法，其实际临床应用效果还必须通过动物体内试验加以比较、验证，从而进一步阐明其抑菌机理。

锦黄口服液在治疗和预防仔猪腹泻中具有良好的效果，由于其毒副作用小，因此在规模集约标准化养殖场用锦黄口服液进行仔猪腹泻早期发病的治疗，可有效抵御细菌性因素引起的仔猪腹泻。同时克服单纯应用抗生素类药物带来的耐药性、猪肠道菌群的紊乱等弊病，有很好的开发应用发前景。

Effects of Traditional Chinese Medicine Compound Jinhuang Oral Liquid on Antibacterial in Vitro and Treatment of Diarrhea in Piglets

LI Ren-ge1, HU Hong-wei1, ZHANG Cheng-hu1

(InstituteofAnimalHusbandryandVeterinaryofLanzhou,LanzhouGansu730050China)

This paper aimed to investigate the effects of the Jinhuang oral liquid on preventing and treating diarrhea, and inhibiting the common pathogenic bacteria of diarrhea in piglets. The results showed that the Jinhuang oral liquid is not sensitive to E. coli and clostridium westergren, but is less sensitive to jejunum bending bacteria, klebsiella, diarrhea treponema of piglet and necrosis bacillus. The cure rate of Jinhuang oral liquid against piglet diarrhea is 88.57%, total validity is 92.90%, and the preventive rate is 100 %. The clinical effect is remarkable compared with Huangzhi oral liquid and mesylate levofloxacin.

Diarrhea piglet; Jinhuang oral liquid; test results

2016-04-11

甘肃省农业科技创新项目(GNCX-2014-1)。

李仁阁(1982- )，男，山东临沂人，硕士，兽医师，主要从事畜牧兽医工作。

S 853.2

A

1004-6704(2016)06-0039-04