痰Xpert MTB/RIF检查对涂阴肺结核的诊断价值

陕西省结核病防治院(西安710100)　石海萍　高　华



痰Xpert MTB/RIF检查对涂阴肺结核的诊断价值

陕西省结核病防治院(西安710100)石海萍高华

摘要目的：探讨痰Xpert MTB/RIF检查对涂阴肺结核快速诊断中的应用价值。方法：研究组选取在我院确诊的涂阴肺结核90例，对照组选取我院同一时期住院期间诊断为肺部其他疾病患者40例，对两组患者均行痰Xpert MTB/RIF、痰结核菌快速培养(BACTEC960)及血结核抗体检查，比较不同方法在涂阴肺结核患者中的阳性率及痰Xpert MTB/RIF在涂阴肺结核与对照组的敏感性。结果：涂阴肺结核组痰Xpert MTB/RIF、痰结核菌快速培养、血结核抗体的敏感性分别为80%，45.6%， 25.6%；痰Xpert MTB/RIF与其他二者相比有明显差异(P<0.01)；特异性分别为45%、97.5%、95%。结论:痰Xpert MTB/RIF检查在涂阴肺结核诊断中具有快速、敏感性及特异性高的优点。

主题词结核，肺/诊断分子生物学@痰Xpert MTB/RIF@ 痰结核菌快速培养

据统计2012年全球有结核病新发患者860万例[1]，根据全国第五次结核病流行病学抽样调查报告估算，我国15岁以上人群的活动性结核病患者人数499万例[2]， 全球约三分之一的人群感染过结核分枝杆菌，其中十分之一可发展为活动性结核病[3]，控制结核病的主要环节为控制传染源，治愈现症肺结核患者，所以快速准确诊断是控制结核病的关键所在，但是菌涂阴肺结核往往因痰涂片阴性，而痰结核菌培养方法敏感性较低、检测周期长等问题，给临床上诊断带来巨大的困难，往往造成延迟诊断、误诊及漏诊。使涂阴肺结核得不到及时诊断及治疗。痰Xpert MTB/RIF检测技术是一种新型的分子生物学快速诊断技术，具有快速、敏感、准确等优点，本研究旨在通过研究探讨痰Xpert MTB/RIF检查技术在涂阴结核病中的快速诊断中的价值。

资料与方法

1研究对象选择2013年5月至2014年10月在本院确诊的涂阴肺结核患者90例，其他肺部疾病组(肺炎、肺癌、肺间质纤维化、矽肺)40例，其中男63例，女67例；年龄19～76岁，平均42.3岁。诊断均符合：涂阴肺结核病例指不同时间(晨痰，夜间痰，即时痰)痰涂片抗酸染色3次为阴性，并通过临床症状、影像学、免疫学检查 及诊断性抗结核治疗疗效观察、最终临床确诊为涂阴结核。

2检查方法对所有入选的所有患者行痰Xpert MTB/RIF、痰结核菌快速培养、血结核抗体检查，分别计算痰Xpert MTB/RIF、痰结核菌快速培养、血结核抗体在涂阴肺结核诊断中的敏感性、特异性、判断各自在涂阴肺结核中的诊断价值。

3检测方法入选病例痰结核菌快速培养均按照国家标准进行检测(Bacth960培养基)；痰Expert MTB/RIF检测：将清晨深部痰标本(按5ml)与含有氢氧化钠及异丙醇的处理液安常规比例2∶1进行混合，(如痰液中混有脓球，则按照3∶1的比例)震荡，室温静置15min后将混合液转移至一次性多室塑料反应盒中，置于Gene Xpert仪器中检查，120min自动报告阳性、阴性及利福平耐药情况。

4统计学方法本研究采用SPSS13.0 分析软件进行分析，组间比较采用卡方检验，以P<0.05为有显著性差异，P<0.01为有极显著性差异。

结果

1痰Expert MTB/RIF在不同组别的检测情况见表1。痰Xpert MTB/RIF在涂阴肺结核组阳性率为80.0%，在肺部其他疾病的阳性率为2.5%，两者相比具有极显著性差异(χ2=28.9，P<0.01)。

表1　痰Expert MTB/RIF在不同组别的检测情况

2血结核抗体、痰Expert MTB/RIF、痰结核菌快速培养在涂阴肺结核诊断中比较见表2。涂阴肺结核组痰Expert MTB/RIF阳性率明显高于血结核抗体及痰结核菌快速培养(χ2=24.8，P<0.05)。痰Expert MTB/RIF与血结核抗体特异性分别为97.5%、75%，两者有显著性差异(P<0.05)，痰Expert MTB/RIF与痰结核菌快速培养特异性无显著性差异(P>0.05)。

表2　不同检查在涂阴肺结核检测情况比较

讨论

涂阴肺结核是指经痰涂片抗酸染色至少3次为阴性的肺结核患者[4]。一直以来,结核病的诊断主要依靠痰涂片抗酸染色,但由于痰涂片对标本的含菌量要求高,据相关报道，痰涂片的阳性率仅为19.9%～35%[5]，导致其诊断结核病的敏感度较低,在肺结核中约有50%～70%的患者属于涂阴结核菌(MTB)。由于缺乏细菌学诊断依据，菌阴肺结核的诊断远比菌阳肺结核困难，临床上不可避免地存在着误诊，本研究中入选病例130例、诊断为肺部其他疾病40例、另90例病例通过临床症状、影像学、免疫学检查 诊断性抗结核治疗疗效观察、最终临床确诊为涂阴结核。

MTB/RIF检测技术是一种新型的分子生物学快速诊断技术，MTB/RIF检测诊断系统运用半槽式(Hemi-nested)RT-PCR及荧光探针报告(Beacontechnology),特异性扩增并检测结核分枝杆菌特有并与利福平耐药密切相关的rpoB基因片段。以PCR循环阈值反映标本中的结核分枝杆菌载量,进行半定量分析[6]，可以在120min内报告结果，操作简便易行。通过本研究发现：将肺部其他疾病作为对照，痰MTB/RIF对涂阴肺结核诊断的敏感性和特异性分别为80.0%、特异性97.5%；痰结核菌快速培养对涂阴肺结核诊断的敏感性和特异性分别25.6%、95.0%，痰MTB/RIF与痰结核菌快速培养二者敏感性方面比较具有明显差异；血结核抗体对涂阴肺结核诊断的敏感性和特异性分别为45.6%、25%，痰MTB/RIF与血结核抗体在敏感性方面比较具有显著性差异，痰MTB/RIF对涂阴肺结核诊断在敏感性和特异性方面明显优于血结核抗体和痰结核菌快速培养，可以使得大部分涂阴肺结核患者治疗开始时间提前到检测当天，部分培养肺结核患者的治疗时间也大大提前。对肺结核的早期治疗提供了良好的依据，也对控制传染源，降低发病率开辟了新的途径。

综上所述，痰Expert MTB/RIF检查在涂阴肺结核诊断中具有同时快速、敏感性和特异性较高的优点，在临床中极大地缩短了涂菌阴肺结核的诊断时间，提前了肺结核的开始治疗时间。

参考文献

[1] World Health Organization.Global tuberculosis report 2013 [M].Geneva:WHO,2013:47.

[2] 全国结核病流行病学抽调技术指导组，全国结核病流行病学抽调办公室. 2010全国肺结核患病率现况调查[J].中华结核呼吸杂志，2012，35(9):665-668.

[3] Jin J,Sun L,Jiao W,et al.SLCllAl(Formerly NRAMPl) geng polymorphisms associated with pediatric tuberculosis in China[J].Clin Infect Dis,2009,48(6):733-738.

[4] 中华医学会.临床医学指南(结核分册)[M].北京：人民卫生出版社，2005：64-86.

[5] 邢国胜，马忠慧.耐药肺结核166例耐药性分析[J].陕西医学杂志，2009，38(6)：757-758.

[6] 蔡闯.分枝杆菌及多重耐药性的快速检测:MTB/RIF实验及检测诊断系统[J]. 解放军医学杂志，2012，37(10)：23-25.

(收稿：2015-04-10)

【中图分类号】R521

【文献标识码】A

doi：10.3969/j.issn.1000-7377.2016.01.007