人乳头瘤病毒分型检测对宫颈病变患者的诊断价值

张肖青， 徐惠群

上海市徐汇区大华医院妇科，上海　200237



·论著·

人乳头瘤病毒分型检测对宫颈病变患者的诊断价值

张肖青， 徐惠群*

上海市徐汇区大华医院妇科，上海200237

[摘要]目的： 探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型检测在宫颈病变患者诊断中的价值。方法： 选择2013年8月—2015年1月在徐汇大华医院门诊行宫颈癌筛查的妇女，年龄均大于25岁，行宫颈液基薄层细胞学检测(TCT)、核酸扩增荧光PCR检测HPV。患者分为两组：HPV 01(16、35、52、53、58)，HPV 02(18、31、33、45、56)，共计182例。所有患者进行阴道镜下异常转化区定位活检、病理检查，其中15例行宫颈环形电切术 (LEEP )，取其病变较严重者为最终病理诊断。结果： 以病变程度≥ CINⅡ为病理学阳性，以病变程度≤ CINⅠ为病理学阴性，HPV用于筛查≥ CINⅡ病变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为：93.33%、84.43%、35%、99.3%。HPV 01组阳性25例，HPV 02组阳性15例，阴性组142例。15例宫颈上皮内瘤变≥ CINⅡ病变的患者中，TCT检测阳性率为53.33%(8/15)，HPV阳性率为93.33%(14/15)。结论： 对于宫颈病变≥ CIN Ⅱ风险更高的患者，TCT联合HPV检测有利于提高其临床检出率。

[关键词]薄层细胞检测； 人乳头瘤病毒；宫颈病变

人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)检测是宫颈癌初级筛查的重要辅助手段[1]。Berkowitz[2]研究认为，HPV检测可作为宫颈癌初级筛查的独立指标之一。Torre 等[3]研究发现，50%的宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia, CIN)Ⅲ及70%的宫颈癌与HPV 16和(或)HPV 18感染相关。因此，本研究采用PCR技术对宫颈病变患者行HPV基因分型检测，并与阴道镜活检及术后病理结果进行比较，探讨HPV分型检测在宫颈癌前病变和宫颈癌筛查中的潜在价值。

1资料与方法

1.1一般资料选取 2013年8月—2015年1月在我院妇科门诊根据病史、体征疑诊为宫颈病变的25～65岁患者182例作为研究对象，具体症状及体征包括：宫颈接触性出血、阴道分泌物异常反复治疗效果欠佳等，对所有患者进行宫颈筛查。本研究通过医院医学伦理委员会审核，所有患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2HPV分型及分组取患者血标本，采用HPV核酸扩增荧光检测试剂盒(广东凯普生物有限公司)进行HPV分型，根据检测结果分为两组：HPV 01组、HPV 02组。HPV 01组包含HPV 16、35、52、53、58；HPV 02组包含HPV 18、31、33、45、56。

1.3宫颈液基薄层细胞检测 (TCT)及病理学检查采用美国新柏氏薄层液基细胞学技术，细胞学诊断采用TBS (2001)分类法；病理检查：182例均行阴道镜检查及组织病理学检查，其中15例行宫颈环形电切术。阴道镜宫颈活检组织病理及利普(LEEP)术后组织病理 ，取其病变较严重者为最终病理诊断。

1.4统计学处理采用SPSS 19.0软件包，计数资料采用率表示，两组间的比较采用χ2检验，检验水准(α)为0.05。

2结果

2.1患者基线资料2013年8月—2015年1月共入选宫颈病变患者182例，年龄25～65岁，平均年龄(41.65±6.98)岁。

2.2HPV检测结果在对142例HPV01、02为阴性的患者中经阴道镜和宫颈组织病理学检查，筛选出1例为≥CINⅡ。在宫颈细胞学阴性的病例中，HPV感染阳性率为15.56%(26/167)，HPV联合细胞学筛查中15例被病理证实≥ CINⅡ，其中HPV 01和细胞学共阳性9例，HPV 01为阳性而细胞学为阴性7例；HPV 02与细胞学共阳性为5例，而HPV 02阳性和细胞学为阴性10例。以临床上病理学≥CINⅡ为阳性，计算出HPV用于临床宫颈癌早癌筛选的特异性84.43%，灵敏度为93.33%，阴性预测值99.3%，阳性预测值35%(表1)。

表1　PCR检测与组织病理学检查结果的关系

HPV 01：HPV 16、35、52、53、58)，HPV02：HPV 18、31、33、45、56，其中5例同时合并HPV 01阳性计入HPV 02

2.3TCT、HPV检测和组织病理学结果的关系TCT结果为正常或炎症者共计167例，其中HPV 01、HPV 02阳性者分别为14和9例，经过宫颈活检证实为病变程度≥ CINⅡ者分别为4和3例(表2)。本研究中HPV 01、HPV 02阳性者和HPV阴性者分别为25、15和142例，发生≥ CINⅡ病变者则分别为9、5、1例，3组人群的患癌风险比较，差异有统计学意义(P<0.01)。在细胞学结果≥ ASCUS的14例患者中，≥ CINⅡ病变发生率为57.14%(8/14)。在HPV阳性的病例中，≥ CINⅡ病变发生率为35%(14/40)。HPV 01组阳性，细胞学阴性病理学阳性发生率28.57%(4/14)，HPV 02组为33.33%(3/9)。具体数据见表2。

表2　PCR检测、细胞学与病理学结果的相关性分析

3讨论

3.1HPV感染的临床意义持续性HPV感染是发生CIN及宫颈癌的重要条件。近期的一份随机对照试验比较了细胞学检测和HPV检测之间的差异，对所有病例进行随访2.5年，结果发现对于浸润性宫颈癌两组检出率接近，而随着随访时间的延长(3.5年和5.5年)，发现HPV阴性浸润性宫颈癌的累积发生率明显低于细胞学阴性患者，结果提示HPV检测浸润性宫颈癌较细胞学检测能够提高60%～70%，并肯定了HPV检测长期随访的有效性[4]。本研究对C INⅡ的检出率为8.24%，与既往研究[4-5]报道的9.16%～14.5%接近。

3.2细胞学阴性HPV阳性患者的筛选作用本研究表明HPV具有更高的敏感性，而细胞学检测更具有特异性，由于HPV的检测较细胞学检测更易被患者接受，明显提高患者的依从性，可以减少CINⅡ的漏诊率。Petry等[6]对HPV阳性和细胞学阴性的患者随访27个月，年龄不小于30岁，发现HPV阳性和细胞学阴性的患者诊断出子宫颈癌的患者具有分期早，淋巴结转移较少等特点[7]。2012年美国阴道镜及宫颈病理协会对该类患者的筛查中做了随访建议，对于超过30岁的女性建议1年后予HPV和细胞学检查，如果HPV16/18检测为阴性，1年后建议复查HPV和细胞学检测，如果HPV16/18检测为阳性建议性阴道镜检查[5]。故对于细胞学为阴性和HPV阳性的患者应进行进一步筛选，建议不降低宫颈癌的漏诊率。

3.3HPV不同分型对宫颈癌筛选的临床意义HPV不同分型对不同地区人群的诊断率和漏诊率存在差异，就我国而言，在辽宁、广东和台湾等地HPV33、58和52的感染率明显高于HPV18，故对于HPV16/18分型是否同样适合国内HPV阳性和细胞学阴性的患者需要进一步研究[8]。本研究不仅包含HPV16、18，还涵盖其他型别，HPV01组阳性细胞学阴性病理学阳性发生率28.57%，HPV02组为33.33%，避免了宫颈高级别病变的漏诊。对于可能出现过度诊断与治疗的问题，目前随着宫颈癌致癌作用相关的生物标志物的出现，p16 与 Ki-67 双染试剂盒的应用，可给临床提供更好的分流方案。对于p16和Ki-67两种染色均为阳性，可能存在上皮高级别内瘤变的可能性，而HPV阳性和细胞学阴性同样存在上皮高级别内瘤变的风险，故两者均需要行阴道镜检查排除上皮高级别内瘤变的可能[9]。

综上所述，对于宫颈病变≥CIN Ⅱ风险更高的患者，TCT联合HPV检测有利于提高其临床检出率。

参考文献

[1]Rodrí guez-Carunchio L, Soveral I, Steenbergen RD, et al. HPV-negative carcinoma of the uterine cervix: a distinct type of cervical cancer with poor prognosis[J].BJOG,2015,122(1):119- 127.

[2]Berkowitz RP. 2012 updated consensus guidelines for the management of abnormal cervical cancer screening tests and cancer precursors[J].Obstet Gynecol,2013,122(2 Pt 1):393.

[3]Torre LA, Bray F, Siegel RL, et al. Global cancer statistics, 2012[J].CA Cancer J Clin,2015, 65(2):87-108.

[4]Ronco G, Dillner J, Elfström KM, et al. Efficacy of HPV-based screening for prevention of invasive cervical cancer: follow-up of four European randomised controlled trials[J]. Lancet, 2014, 383(9916):524-532.

[5]Massad LS, Einstein MH, Huh WK, et al. 2012 updated consensus guidelines for the management of abnormal cervical cancer screening tests and cancer precursors[J].Obstet Gynecol, 2013,121(4):829-846.

[6]Petry KU, Schmidt D, Scherbring S, et al. Triaging Pap cytology negative, HPV positive cervical cancer screening results with p16/Ki-67 Dual-stained cytology[J].Gynecol Oncol, 2011, 121(3):505-509.

[7]Castle PE, Stoler MH, Wright TC Jr, et al. Performance of carcinogenic human papillomavirus (HPV) testing and HPV16 or HPV18 genotyping for cervical cancer screening of women aged 25 years and older: a subanalysis of the ATHENA study[J].Lancet Oncol,2011, 12(9): 880-890.

[8]Brotherton JM, Macartney KK, Miyagi E, et al. Human Papillomavirus (HPV) Vaccination Safety Assessment: The Methods Matter[J].Intern Med,2015,54(19):2531.

[9]Dijkstra MG, Snijders PJ, Arbyn M, et al. Cervical cancer screening: on the way to a shift from cytology to full molecular screening[J].Ann Oncol,2014,25(5):927-935.

[本文编辑]叶婷，贾泽军

Diagnostic value of human papillomavirus genotyping for the cervical lesions

ZHANG Xiao-qing, XU Hui-qun*

Department of Gynecology, Dahua Hospital of Shanghai Municipality, Shanghai 200237, China

[Abstract]Objective： Type of human papillomavirus (HPV) points detection value in the diagnosis of cervical lesions.Methods： Selection in August 2013 - January 2015 in xuhui dahua outpatient women cervical cancer screening, age less than 25 years old, a cerical liquid thin-layer cytology test (TCT), fluorescence PCR detection of HPV for nucleic acid amplification, divided into two groups, HPV01,35,52,53,58 (16);A total of 298 cases of HPV02,31,33,45,56 (18).There are indications of selected 182 patients with abnormal transformation zone positioning biopsy under colposcope, pathological examination, including 15 routine cervical Loop electricity cut method (Loop electrosurgieal excision procedure, LEEP), take its pathological changes is more serious for the final pathologic diagnosis.Results： In this study based on acuity CIN lesions Ⅱ for pathology is positive, with the lesion degree CIN I for pathology or less negative, HPV is used for screening or greater CIN Ⅱ lesion degree of sensitivity, specific, positive predictive value and negative predictive value, respectively, 93.33%, 84.43%, 35%, 99, 3 %.Positive HPV01 group 25 cases, positive HPV02 group 15 cases (with 5 positive HPV01 group) at the same time, the negative group 142 cases.In CIN or Ⅱ lesions (a total of 15 cases), 9, 5, and 1 case respectively, compared the risk of cancer, difference of three groups was statistically significant (χ2= 93.98, P< 0.01).For cervical intraepithelial neoplasia acuity CIN Ⅱ lesions of 15 cases, TCT testing positive rate was 53.33% (8/15), HPV detection positive rate was 93.33% (14/15).Conclusions： TCT joint HPV detection, can identify patients with cervical lesions of higher risk CINII or, more should pay attention to the role of HPV clinically.

[Key Words]thin-layer cytology test; human papillomavirus; cervical lesions

[中图分类号]R 373.9

[文献标志码]A

[作者简介]张肖青，主治医师. E-mail: 2562471549@qq.com*通信作者(Corresponding author). Tel: 021-64535555, E-mail: drxuhuiqun@gmail.com

[收稿日期]2015-12-20[接受日期]2016-03-22