461例高胆红素血症新生儿尿液及母乳人巨细胞病毒DNA结果的回顾性分析*

李文瑞，叶敏南，彭　琪，钟瑞芬，马　强，陆小梅，黎四平△

(1.东莞市儿科研究所，广东东莞 523320；2.东莞市第八人民医院检验科，广东东莞 523320)



·论著·

461例高胆红素血症新生儿尿液及母乳人巨细胞病毒DNA结果的回顾性分析*

李文瑞1，叶敏南2，彭琪1，钟瑞芬2，马强1，陆小梅1，黎四平2△

(1.东莞市儿科研究所，广东东莞 523320；2.东莞市第八人民医院检验科，广东东莞 523320)

摘要:目的回顾性分析高胆红素血症新生儿尿液及母乳中人巨细胞病毒(HCMV)DNA结果，并探讨HCMV-DNA检测在新生儿高胆红素血症中的筛查意义。方法收集2014年1月至2014年12月在东莞市第八人民医院住院的461例母乳喂养的高胆红素血症新生儿作为观察组，另收集东莞市第八人民医院同期的450例健康新生儿作为对照组。采用FQ-PCR检测其母乳及新生儿HCMV-DNA水平，记录其检测结果。结果观察组尿液HCMV-DNA阳性239例，占51.8%，对照组尿液HCMV-DNA阳性为89例，占19.8%，两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。观察组母乳HCMV-DNA阳性367例，占79.6%，对照组母乳HCMV-DNA阳性137例，占30.4%，两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论HCMV母乳感染是新生儿HCMV感染的重要途径，母乳及尿液HCMV-DNA检测对高胆红素血症的诊断具有重要意义。

关键词:高胆红素血症；人巨细胞病毒；婴儿

人类巨细胞病毒(HCMV)是一种属于具有双链DNA的疱疹类病毒，该病毒在人类的感染非常普遍，尤其是婴幼儿、孕妇等免疫力低下的人群更常见[1]，有文献报道发达国家的感染率为30%～70%，我国人群的感染率在80%以上[2]。HCMV感染大多数表现为无症状的隐形或者潜伏感染，该病毒是孕妇围生期感染的重要病原微生物之一，它可通过胎盘、血液或者母乳等途径直接传播给婴儿，导致胎儿畸形、流产、早产等，严重感染者可致死亡[3]。因此，HCMV感染的早期诊断及预防变得尤其重要。本研究采用荧光定量PCR检测高胆红素血症新生儿尿液及母乳HCMV水平，为HCMV感染的诊断及治疗提供依据，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料收集2014年1月至2014年12月在东莞市第八人民医院住院的461例母乳喂养的高胆红素血症新生儿作为观察组，其中男287例、女174例，日龄1～30 d，平均16.5 d。另收集东莞市第八人民医院同期的450例健康新生儿作为对照组，其中男267例、女183例，日龄1～28 d，平均15.7 d。观察组患儿均符合高胆红素血症诊断标准，观察组及对照组均进行尿及母乳HCMV-DNA检查。

1.2方法

1.2.1标本采集入院第2天留患儿取新鲜尿液约2 mL于无菌干燥管中。清洁乳头，采集用自我挤压法，挤出约3 mL乳汁入无菌管中，立即送检。

1.2.2标本检测采用荧光定量PCR法检测尿及母乳HCMV-DNA，PCR仪采用罗氏cobas z 480PCR仪；采用中山大学达安基因股份有限公司生产的试剂进行检测，所有操作均严格按照仪器及试剂操作说明书进行。

1.2.3结果判读PCR反应结束后，电脑自动分析计算检测结果。HCMV-DNA载量以基因copy/mL表示，HCMV-DNA>500 copy/mL为阳性。

1.3统计学处理采用SPSS17.0 统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

观察组461例新生儿高胆红素血症尿液HCMV-DNA阳性239例，占51.8%；对照组尿液HCMV-DNA阳性为89例，占19.8%，两者比较差异有统计学意义(P<0.01)，见表1。观察组450例高胆红素血症母乳HCMV-DNA阳性367例，占79.6%，对照组母乳HCMV-DNA阳性137例，占30.4%，两者比较差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表1　　两组新生儿尿液HCMV-DNA检测结果的比较

-:该项无数据。

表2　　两组新生儿母乳HCMV-DNA检测结果的比较

-:该项无数据。

3讨论

HCMV是一类在自然界广泛存在的疱疹病毒，它具有严格种属特异性。由于人是HCMV的唯一宿主[4]，因此人类感染HCMV非常普通，有文献报道西方发达国家的感染率为30%～70% ，一些发展中国家感染率更高，中国人群的感染率约在80%以上。HCMV感染一般表现为潜伏感染且无症状。它是引起先天性及围生期感染的重要病原微生物之一[5]，它可通过胎盘、血液或母乳直接传播给婴儿，导致流产、胎儿畸形、早产、注意力不集中及生长发育迟缓等症状[6]。大部分新生儿高胆红素血症也是由于HCMV引起，它是指足月新生儿血清总胆红素超过220.6 μmol/L(12.9 mg/L)，早产儿血清总胆红素超过255 μmol/L(15.0 mg/L)，足月儿发病率大概为60%，早产儿的发病率大概为80%。大部分黄疸患儿通过处理会自行消退，但是由于胆红素具有毒性，少数患儿出现严重的高胆红素血病，甚至胆红素脑病。研究表明足月新生儿总胆红素值超过428 μmol/L(25 mg/L)，就可能会发生胆红素脑病，轻者引起神经损害导致脑瘫，重者导致死亡。如果血清总胆红素值未达到高胆红素血症，但是合并窒息、高碳酸血症、低蛋白血症也可能导致胆红素脑病，而且由于中枢听觉神经对胆红素的毒性反应敏感，因此高胆红素血症也可能会引起感音神经性听力损伤等[7]，从而严重影响胎儿的健康。

近年来分子生物学技术越来越广泛地应用于临床检测，它具有快速、灵敏、特异等特点，PCR技术是目前诊断HCMV感染的最敏感方法。本研究采用的荧光定量PCR技术检测461例母乳喂养的新生儿高胆红素血症患儿，其中尿液HCMV-DNA 阳性239例，占51.8%，高胆红素血症新生儿母乳HCMV-DNA阳性367例，占79.6%，与国内文献报道相同[8]。本研究中，观察组450例健康新生儿，尿液HCMV-DNA阳性为89例，占19.8%，其母乳HCMV-DNA阳性137例，占30.4%，高胆红素血症患儿尿液及母乳HCMV-DNA感染率与健康新生儿比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。研究表明，母乳HCMV感染率较高，因此摄入带病毒的母乳是新生儿感染HCMV的重要途径。

综上所述，荧光定量PCR技术能快速、灵敏及特异地检出HCMV感染， HCMV母乳感染是新生儿HCMV感染的重要途径，母乳及尿液HCMV-DNA检测对高胆红素血症的诊断具有重要意义。

参考文献

[1]朱建康，李耀军．住院患儿血清巨细胞病毒核酸与IgM抗体检测比较研究[J]．国际检验医学杂志，2014，9(24)：3437-3438．

[2]翁玉英，倪琛，林秀凤，等．不同标本巨细胞病毒检测在诊断小儿人巨细胞病毒感染中的应用[J]．分子诊断与治疗杂志，2014，6(6)：410-414．

[3]王淑贞，王静，张琳．尿、乳汁HCMV定量检测在婴幼儿HCMV感染诊治中的意义[J]．放射免疫学杂志，2013，26(3)：361-362．

[4]李娇，马洪刚，单风平．实验室2种检测小儿巨细胞病毒方法的比较[J]．微生物学杂志，2013，33(1)：100-103．

[5]张钰雯，徐天勇．荧光定量PCR技术在孕妇和新生儿巨细胞病毒感染检测中的应用[J]．中国现代药物应用，2013，7(15)：34-35．

[6]徐学勤，杨洁．母亲巨细胞病毒DNA检测与新生儿感染的相关性研究[J]．中国妇幼健康研究，2014，25(4)：569-571．

[7] 张紫香.新生儿高胆红素血症对听力的影响[D].广州:广州医科大学,2010.

[8]赵巍松，刘伶，杨飞．母乳及婴儿血液、尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿HCMV感染中的应用[J]．中国实验诊断学，2013，17(6)：1059-1061．

Retrospectively analyzed the result of HCMV-DNA of breast milk and urine of neonatal hyperbilirubinemia in 461 cases*

LiWenrui1,YeMinnan2,PengQi1,ZhongRuifen1,MaQiang1,LuXiaomei1,LiSiping2△

(1.DongguanInstituteofPediatrics,Dongguan,Guangdong523320,China;2DepartmentofLaboratory,TheEighthPeople′sHospitalofDongguan,Dongguan,Guangdong523320,China)

Abstract:ObjectiveTo retrospectively analyze the result of HCMV-DNA of breast milk and urine of neonatal hyperbilirubinemia and evaluate the effect on screening neonatal hyperbilirubinemia.MethodsCollected 461 cases of neonatal hyperbilirubinemia from January 2014 to December 2014 in our hospital,which fed with breast milk as observation group,at the same period collected 450 cases of healthy newborn in our hospital as control group.Tested the their level of HCMV- DNA in breast milk and urine with Fluorescent Quantitative PCR,recorded the testing results.Results239 cases with positive HCMV-DNA urine were detected in observation group,accounting for 51.8%.There were 89 cases of positive HCMV-DNA urine in control group,which accounted for 19.8%,the comparative difference was statistically significant(P<0.01).There were 367 cases of positive HCMV-DNA breast milk in observation group,accounting for 79.6%.The positive HCMV-DNA breast milk were detected in 137 cases in control group,which accounted for 30.4%,the comparative difference was statistically significant (P<0.01).ConclusionThe breast milk of HCMV infection was an important way of neonatal HCMV infection,the HCMV-DNA detection of breast milk and urine was of great significance to the diagnosis of neonatal hyperbilirubinemia.

Key words:hyperbilirubinemia;human cytomegalo virus；infants

(收稿日期：2016-01-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.009

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)08-1037-02

基金项目：广东省东莞市科技计划医疗卫生类科研重点项目( 2013108101016)。

作者简介：李文瑞，男，主管检验师，主要从事医学分子生物学方面的研究。△通讯作者，E-mail:lsp020@163.com。