卵巢癌组织中ABCF2、ABCG2阳性表达及意义

宋静，赵云霞，田永杰( 茌平县人民医院，山东茌平500； 山东大学附属省立医院)



卵巢癌组织中ABCF2、ABCG2阳性表达及意义

宋静1，赵云霞1，田永杰2(1 茌平县人民医院，山东茌平252100；2 山东大学附属省立医院)

摘要：目的探讨ABCF2、ABCG2在卵巢癌组织中的阳性表达及其与化疗耐药的关系。方法选择卵巢癌患者94例，均行肿瘤细胞灭活术配合紫杉醇类与铂类联合化疗，并对化疗耐药情况进行随访。采用免疫组化SP法观察卵巢癌组织中ABCF2和ABCG2表达，观察其阳性表达与卵巢癌患者临床病理特征的关系。采用Logistic回归分析对化疗耐药的相关因素进行分析。结果卵巢癌组织中ABCF2阳性表达与肿瘤病理类型和肿瘤分级无关(P均>0.05)，与肿瘤分期、化疗耐药情况有关(P均<0.05)。卵巢癌组织中ABCG2阳性表达与肿瘤病理类型、肿瘤分期、肿瘤分级无关(P均>0.05)，与化疗耐药情况有关(P<0.05)。Logistic回归分析显示，ABCF2和ABCG2阳性表达是卵巢癌患者发生化疗耐药的独立危险因素(OR分别为1.067和1.132，P均<0.05)。结论肿瘤组织ABCF2和ABCG2阳性表达可能是卵巢癌患者发生化疗耐药重要原因。

关键词：卵巢癌；三磷酸腺苷结合盒转运蛋白；化疗耐药

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤，病死率居女性生殖系统恶性肿瘤首位[1]。因早期无明显临床症状或体征，大多数患者确诊时已进展为晚期，出现淋巴结广泛转移，手术难以彻底切除，预后较差[2]。目前，临床上对晚期卵巢癌患者一线治疗方案是肿瘤细胞灭活术配合紫杉醇类与铂类联合化疗，多数患者可缓解，但复发率高，化疗耐药是导致复发的主要原因[3]。三磷酸腺苷结合盒转运蛋白(ABC)是一种跨膜蛋白超家族，参与多种分子的跨膜转运，能够将细胞内药物排出[4]。ABCF2是ABC蛋白家族的一员，主要在细胞核内表达，可能是引起肿瘤化疗耐药的重要诱导基因[5]。ABCG2亦是ABC蛋白家族的一员，主要在细胞膜和细胞质内表达，可能与肿瘤转移、复发及侵袭有关[6]。本研究对卵巢癌组织中ABCF2、ABCG2阳性表达进行检测，并分析其与化疗耐药的关系。

1资料与方法

1.1临床资料选择2005年1～12月茌平县人民

医院收治的卵巢癌患者94例，年龄(54.3±7.2)岁，均经组织病理学检查明确诊断。病理类型：浆液性腺癌71例、透明细胞癌23例；WHO组织分级：G1级4例、G2级27例、G3级40例，透明细胞癌不进行分级；国际妇产科联盟(FIGO)肿瘤分期：Ⅰ期25例，Ⅱ期7例，Ⅲ期54例，Ⅳ期8例。

1.2卵巢癌组织ABCF2、ABCG2表达检测采用免疫组化SP法。取卵巢癌组织，甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。切片脱蜡、水化，PBS冲洗；微波(ABCF2)或水浴(ABCG2)修复，PBS冲洗；3%过氧化氢阻断18 min，PBS冲洗；10%山羊血清封闭10 min，滴加一抗(鼠抗人ABCF2单克隆抗体和兔抗人ABCG2多克隆抗体，稀释浓度分别为1∶75和1∶250)，阴性对照采用PBS替代一抗，于4 ℃冰箱过夜。次日取出，室温下放置25 min，PBS冲洗3次，每次3 min；滴加二抗(抗鼠和兔二步法抗体)，孵育18 min，二氨基联苯显色，进行封片观察。评价标准：ABCF2阳性表达定位于细胞核，呈棕褐色团块状或颗粒状物质；ABCG2阳性表达定位于细胞膜或细胞质，呈棕褐色团块状或颗粒状物质。收集图片，采用LeicaQwin显微图像处理系统对图像数据进行分析，用积分光密度(IOD)值表示ABCF2和ABCG2阳性表达情况。同时，分析不同病理类型、肿瘤分期、组织分级卵巢癌患者ABCF2和ABCG2阳性表达情况。

1.3治疗与随访所有患者行肿瘤细胞灭活术。首次肿瘤细胞灭活术后采用紫杉醇类联合铂类方案化疗6～8个疗程。具体方案：紫杉醇175 mg/m2+顺铂60 mg/m2或环磷酰胺1 000 mg/m2+顺铂60 mg/m2，3周为一疗程，每月化疗1次，至少化疗6个疗程。末次化疗后随访，随访截至2014年5月31日。依据美国综合癌症网络关于卵巢癌临床指南中相关定义[7]：化疗敏感指初次化疗完全缓解，停药6个月未出现复发；化疗耐药指初次化疗不能部分缓解，或虽初次化疗有效但化疗结束6个月内复发。所有患者完成6～8个疗程规范化疗，化疗敏感73例，化疗耐药21例。分析化疗敏感、化疗耐药者卵巢癌组织ABCF2和ABCG2阳性表达情况。

1.4统计学方法采用SPSS15.0统计软件。ABCF2和ABCG2阳性表达采用范围和中位数表示，比较采用Wilcoxon秩和检验。采用Logistic回归分析分析患者年龄、病理类型、肿瘤分期、组织分级、ABCF2和ABCG2阳性表达与化疗耐药的关系。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1卵巢癌组织ABCF2、ABCG2阳性表达与患者临床病理特征的关系卵巢癌组织ABCF2阳性表达与病理类型和组织分级无关(P均>0.05)，与肿瘤分期、耐药情况有关(P均<0.05)；卵巢癌组织ABCG2阳性表达与病理类型、肿瘤分期、组织分级无关(P均>0.05)，与化疗耐药有关(P<0.05)。见表1。

表1　卵巢癌组织ABCF2、ABCG2阳性表达与患者临床病理特征的关系

2.2化疗耐药相关因素的Logistic回归分析Logistic回归分析显示，卵巢癌患者年龄、病理类型、肿瘤分期和组织分级与化疗耐药的发生无关(P均>0.05)，而ABCF2、ABCG2阳性表达是化疗耐药的独立影响因素(P均<0.05)。见表2。

表2　卵巢癌患者化疗耐药相关因素的

3讨论

卵巢癌早期缺乏典型的临床症状和体征，患者就诊时大部分已是中晚期，出现淋巴结或其他脏器转移，错过了手术治疗的最佳时期，只能通过化疗改善预后[8]。临床研究发现，卵巢癌患者化疗耐药发生率较高，尤其是卵巢透明细胞癌[9]。目前已有研究从改变治疗手段或改进化疗方法的角度解决卵巢癌患者化疗耐药，并取得了一定效果[10,11]。

ABCF2是ABC家族的重要成员，只含有2个核苷酸结合区，不同于ABC家族的经典结构，缺少穿膜结构，使其不具有跨膜转运功能，可能参与细胞基因翻译起始与延长[12]。有研究指出，ABCF2在某些肿瘤组织中高表达，并且与化疗耐药程度密切相关[13]。本研究发现，卵巢癌组织中ABCF2阳性表达与肿瘤病理类型和组织分级无关，而与肿瘤分期、化疗耐药情况有关。说明ABCF2在卵巢浆液性腺癌和透明细胞癌中的表达无差异，亦与肿瘤不同分级无关，与Nishimura等[14]研究结论不同；ABCF2阳性表达只与肿瘤分期和化疗耐药有关，但ABCF2是否会对肿瘤进展产生影响鲜见报道。ABCG2是ABC家族的一个重要成员，能够通过经典外排途径将细胞内物质排出。有研究指出，ABCG2与细胞内药物外排密切相关，是重要的耐药蛋白[15]；ABCG2与晚期卵巢癌患者铂类和紫杉类为基础的化疗敏感性密切相关[16]。本研究结果显示，卵巢癌组织中ABCG2阳性表达与肿瘤病理类型、肿瘤分期和组织分级无关，而与化疗耐药有关，说明ABCG2阳性表达与肿瘤化疗耐药有关，ABCG2可能通过外排作用将结合的化疗药物排出细胞外，继而产生化疗耐药。本研究结果显示，ABCF2和ABCG2阳性表达是卵巢癌患者发生化疗耐药的独立危险因素，进一步说明卵巢癌患者发生化疗耐药与肿瘤病理类型、组织分级等无关，而与ABCF2和ABCG2阳性表达有关。

综上所述，ABCF2和ABCG2阳性表达可能是卵巢癌患者发生化疗耐药的重要原因，但ABCF2在肿瘤进展中的作用尚需进一步研究。

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(收稿日期：2015-05-07) 2015-10-12)

中图分类号：R737.31

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)08-0065-03

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.08.026

通信作者：田永杰(E-mail： 3219475665@qq.com)