关苍术、白术及苍术血中移行成分的比较

李纯璞， 张善玉， 金英今

（1.延边大学药学院，吉林延吉133000；2.延边大学分析测试中心，吉林延吉133000）



关苍术、白术及苍术血中移行成分的比较

李纯璞1， 张善玉1， 金英今2*

（1.延边大学药学院，吉林延吉133000；2.延边大学分析测试中心，吉林延吉133000）

摘要:目的 比较关苍术、白术及苍术的血中移行成分。方法 HPLC法比较空白血清、含药血清和甲醇提取液的色谱峰，确定灌服关苍术、白术、苍术提取物后大鼠血中移行成分。结果 以240 nm为紫外检测波长时，关苍术和白术药材中有3个相似成分进入血液；以340 nm为紫外检测波长时，有1个相似成分。结论 关苍术的血中移行成分和白术比较接近，而与苍术有较大差异。

关键词:关苍术；白术；苍术；血中移行成分；HPLC

dol:10.3969/j.issn.1001-1528.2016.02.032

KEY W 0RDS: Atractylodes jaPonica；AtractylodismacrocePhalae；Atractylodes Lancea；constituents absorbed into b1ood；HPLC

中药化学成分由于理化性质各异，造成其吸收部位或速率不同，各成分以原型或代谢物进入体内的方式也不一致，而且给药后血清成分并非固定不变，随时间可能发生变化，因此有必要建立血清药物化学动态图谱，用于反映中药化学成分群在体内的动态变化规律及其与药物原型成分之间的相关性。从某种意义上来说，中药血清动态图谱的研究是未来从中药中寻找活性物质的主要途径之一［1］。

关苍术、白术和苍术均为菊科苍术属植物，其中苍术和白术为临床常用中药，收载于《中国药典》［2］，而关苍术因其挥发性成分含有量低而在我国被视作苍术和白术的伪品，但日本和韩国却将其作为白术用于临床，另外朝鲜族民间也经常把关苍术分为块根和节状根，分别作为白术和苍术使用［3-4］。无论中药中含有多少种成分，只有进入血液者才有可能成为有效成分（外用药及直接作用于胃肠道的药物除外）。通过分析口服给药后血中移行成分，确定中药及复方的体内直接作用物质，将成为快速、准确地确定中药药效物质基础的有效途径［5-7］，其常用研究方法为在建立中药色谱指纹图谱的基础上，采用血清药物化学方法，通过对比药材各提取部位、给药（含药血清）及未给药供试动物血清（空白血清）的色谱指纹图谱，筛选中药的活性成分及其作用机理［8-10］。本实验拟采用中药血清药物化学的方法，对关苍术、白术和苍术等提取物进行初步研究，比较其含药血清中的移行成分峰，探索这3味中药是否具有相同的药效物质基础，为朝鲜族民族药材—关苍术的药效物质基础研究及其临床应用奠定基础。

1 仪器与试药

1.1 药材 关苍术药材于2010年采自吉林省汪清县，经延边大学药学院生药学教研室吕惠子副教授鉴定为菊科植物关苍术Atractylodes jaPonica Koidz. ex Kitam.的块根；白术和苍术药材购自延吉药店，经吕惠子副教授分别鉴定为菊科植物白术AtractylodesmacrocePhala Koidz.和苍术Atractylodes Lancea（Thunb.）DC.的干燥根茎。将三者用高速万能粉碎机粉碎，置于阴凉干燥处备用。

1.2 仪器与试剂 LC-10ATVP高效液相色谱仪（日本岛津公司）；KQ5200DE数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；XYJ80-2电动离心机（金坛市恒丰仪器厂）；高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。乙腈为色谱纯；水为去离子水；其他试剂为分析纯。

1.3 实验动物 成年SD大鼠均为雄性，体质量（200±10）g，由延边大学实验动物中心提供，许可证号SCXK（吉）2011-0007。先适应性饲养几天，每日更换水和饲料，并保证良好的卫生环境。

2 实验方法

2.1 灌胃液的制备 精密称取粉碎后的关苍术、白术和苍术粉末适量，分别加甲醇回流提取，提取液减压浓缩，残渣加适量蒸馏水溶解，制成混悬液（1.0 g/mL），即得。

2.2 血清供试液的制备 取SD大鼠8只，随机分为空白对照组、关苍术、白术和苍术给药组，药物组给予相应的灌胃液，2 mL/只，2次/d；空白组给予同体积去离子水，连续给药3 d。于最后一次给药1 h后，摘除眼球取血，3 000 r/min离心10 min，取适量置于离心管中，按血清-甲醇（1∶4）加入甲醇，摇匀，离心，取上清液，蒸干后少量甲醇溶解，0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。

2.3 色谱条件 BondaPakTMC18分析柱（5 μm， 4.6 mm×250 mm）；柱温25℃；体积流量1.0 mL/min；进样量20 μL；检测波长240、340 nm（3种药材的提取液及含药血清通过紫外分光光度仪，在200～500 nm范围内扫描，结果分别在240 nm和340 nm处出现最大吸收）。流动相为水（A）-乙腈（B），梯度洗脱（240 nm时，0～8 min，40％～50％B；8～28 min，50％～75％B；28～40 min，75％～90％B；40～60 min，90％～100％B；60～80 min，100％～40％B。340 nm时，0～10 min，40％～50％B；10～15 min，50％B；15～40 min，50％～65％B；40～50 min，65％～95％B；50～60 min，95％～100％B），将240和340 nm检测波长分别简称为色谱条件Ⅰ和Ⅱ。

3 实验结果

3.1 按照色谱条件Ⅰ，分别将药材、空白血清、含药血清供试液进行HPLC分析，得到相应的色谱图，见图1。

a.关苍术含药血清 b.关苍术药材 c.白术含药血清 d.白术药材 e.苍术含药血清 f.苍术药材 n.空白血清a.A.jaPonica medicated serum b.A.jaPonica samP1e c.A.macrocePhalae medicated serum d.A.macrocePhalae samP1e e.A.lancea medicated serum f.A.lancea samP1e n.b1ank serum图1　色谱条件I下的HP L C色谱图Flg.1 HPLC chromatogram s（I）

与空白血清色谱图比较，关苍术含药血清色谱图中发现8个新的移行成分峰.其中，1、3、6、7 号4个峰在关苍术药材的色谱图中有相对保留时间接近的对应峰，即被吸收入血的关苍术原型成分，而2、4、5及8号4个峰为新产生的代谢产物；白术含药血清色谱图中出现3个移行成分峰，其中4号峰为白术原型成分，1、5号峰为代谢产物；苍术含药血清色谱图中出现5个移行成分峰，其中5、6号峰为苍术原型成分，2、3及4号峰为代谢产物。

比较关苍术、白术和苍术含药血清的色谱图发现，白术和关苍术有3对相对保留时间接近的峰，即关苍术的3号峰和白术的4号峰、关苍术的7号峰和白术的5号峰、关苍术的9号峰和白术的6号峰，均是药材色谱图中有对应峰的峰。

3.2 按照色谱条件Ⅱ，分别将药材、空白血清、含药血清供试液进行HPLC分析，得到相应的色谱图，见图2。

a.关苍术含药血清 b.关苍术药材 c.白术含药血清 d.白术药材 e.苍术含药血清 f.苍术药材 n.空白血清a.A.jaPonica medicated serum b.A.jaPonica samP1e c.A.macrocePhalae medicated serum d.A.macrocePhalae samP1e e.A.lancea medicated serum f.A.lancea samP1e n.b1ank serum图2　色谱条件Ⅱ下的HP L C色谱图Flg.1 HPLC chromatogram s（Ⅱ）

与空白血清色谱图比较，关苍术含药血清色谱图中发现两个新的移行成分峰，均在关苍术药材的色谱图中有相对保留时间接近的对应峰，即被吸收入血的关苍术原型成分；白术含药血清色谱图中出现3个移行成分峰，其中3号峰为白术原型成分，1、2号峰为代谢产物；苍术含药血清色谱图中出现5个移行成分峰，其中4、5号峰为苍术原型成分，1、2及3号峰为代谢产物。比较关苍术、白术和苍术含药血清色谱图发现，三者各有相对保留时间接近的峰（关苍术1号、白术2号和苍术3号峰），关苍术和白术含药血清色谱图中有1对相对保留时间相近的峰（关苍术的2号峰和白术的3号峰）。

4 讨论

众所周知，中药的成分复杂，但只有能够进入血液者才是真正的有效成分，在关苍术、白术和苍术中究竟有哪些成分进入了血液?是不是有相同的成分?这是血清药物化学所要解决的问题。从3种药材的提取、血清样品的收集处理以及液相色谱分析条件的设定等相关研究均是在同一条件下进行，所得色谱图中相对保留时间接近的峰有可能是相同或相似的化学成分。实验结果表明，当240 nm为检测波长时，关苍术和白术药材中有3个相似成分进入血液；340 nm为检测波长时，两者有1个相似的成分。但是，苍术在240 nm和340 nm波长下均没有相似的成分进入血液，提示关苍术和白术的血中移行成分比较接近，与苍术有较大差异。

中药血清药物化学研究的最终目的，是通过弄清血清中药物成分的响应以及代谢转化成分的分析，试图找到中药的药效物质基础。本实验初步对关苍术、白术和苍术3种药材进行了血清药物化学研究，将为深入开展三者的有效物质基础及其深层次的应用药物研发奠定了一定的基础。

参考文献:

［1］ 房 方，李 祥，陈建伟.中药血清药物化学的研究进展［J］.亚太传统医药，2009，5（1）: 143-145.

［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典: 2010年版一部［S］.北京:中国医药科技出版社，2010: 95，150-151.

［3］ 李英姬，朴惠善.关苍术的研究进展［J］.中国野生植物资源，2002，21（1）: 12-14.

［4］ 李济禹，崔正植.中国朝医学［M］.延吉:延边人民出版社，2005: 338-350.

［5］ 王喜军.中药血清药物化学的研究动态及发展趋势［J］.中国中药杂志，2006，31（10）: 789-792.

［6］ 杨会锦，尹 华.中药血清药物化学研究进展［J］.中国医院药学杂志，2013，33（5）: 399-402.

［7］ 乌云索德，领 小，包力尔，等.中药血清药物化学研究现状［J］.时珍国医国药，2013，24（8）: 1978-1980.

［8］ 日·田代真一.“血清药理学”和“血清药化学”［J］. TDM研究，1988（5）: 54.

［9］ 贺玉琢.日本汉方药“血清药理学”、“血清药化学”的研究概况［J］.国外医学:中医中药分册，1998，20（5）: 3-7.

［10］ 杨 奎，郭 力，周明眉，等.中药血清药化学与中药血清药理学协同研究方法初探［J］.中药药理与临床，1998，14（4）: 41-44.

［综 述］

Com parlson of the constltuents absorbed lnto blood ln Atractylodes japonica，Atractylodismacrocephalae and Atractylodes Lancea

LIChun-Pu1， ZHANG Shan-yu1， JIN Ying-jin2*
（1.College of Pharmacy，Yanbian University，Yanji133000，China；2.Center of Forecasting and Analysis，Yanbian University，Yanji133000，China）

ABSTRACT:AIM To comPare the constituents absorbed into the b1ood in Atractylodes jaPonica，Atractylodis macrocePhalae and Atractylodes Lancea.METH0DS HPLC was aPP1ied to comParing the difference in chromatogram Peaks of b1ank serum，medicated serum and methano1 extract.Then the constituents absorbed into b1ood in rats were identified after intragastric administration with Atractylodes jaPonica，AtractylodismacrocePhalae and Atractylodes Lancea extracts.RESULTS There were three simi1ar constituents absorbed into the b1ood in Atractylodes jaPonica and AtractylodismacrocePhalae at240 nm，whi1e therewas one at340 nm.C0NCLUSI0N The constituents absorbed into the b1ood in Atractylodes jaPonica are re1ative1y simi1ar to those in AtractylodismacrocePhalae，but obvious1y different from those in Atractylodes Lancea.

*通信作者:金英今（1965—），女（朝鲜族），高级工程师，从事化学制药研究。Te1:（0433）2732207，E-mai1: jinyingjin650118@ 126.com

作者简介:李纯璞（1990—），女，硕士，从事中药质量标准研究。E-mai1: chunPu1iangyuan@163.com

收稿日期:2015-06-13

中图分类号:R284.1

文献标志码:A

文章编号:1001-1528（2016）02-0383-03