银杏叶黄酮联合奥扎格雷钠对急性脑梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3的影响

李季泓

(辽宁中医药大学附属医院药学部，沈阳110032)



银杏叶黄酮联合奥扎格雷钠对急性脑梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3的影响

李季泓

(辽宁中医药大学附属医院药学部，沈阳110032)

摘要：目的探讨银杏叶黄酮联合奥扎格雷钠对急性脑梗死患者血清HIF-1α、TNF-α及Caspase-3水平的影响及其意义。方法选取急性脑梗死的患者180例,随机分为2组,各90例，对照组行常规疗法治疗，实验组在对照组治疗基础上加用银杏叶黄酮注射液，检测2组临床疗效、神经功能缺损评分及血清HIF-1α、TNF-α、Caspase-3水平，进而对2种疗法进行对比分析。结果实验组总有效率78.9%，明显优于对照组的56.7%(P<0.05)；神经功能缺损评分明显低于对照组(P<0.05);血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平低于对照组(P<0.05)。结论银杏叶黄酮治疗急性脑梗死,能有效改善神经功能缺损评分,明显改善临床症状。

关键词：银杏叶黄酮；急性脑梗死；神经功能缺损；HIF-1α；TNF-α；Caspase-3

脑梗死(CI),又称为缺血性脑卒中(CIS)，是由于各种原因所致脑部血液供应障碍，导致局部脑组织缺血、缺氧性坏死，而引起神经功能缺损的一类临床综合征[1-4]。属中医学“中风”范畴，治宜益气活血、祛瘀通络[5]。银杏叶黄酮，亦称银杏叶提取物，具有增加脑血管流量、降低脑血管阻力、改善血液循环以及保护脑组织细胞的药理作用。研究[6-7]发现，低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、血清肿瘤坏死因子(TNF-α)在急性脑梗死早期具有重要意义。本研究通过观察急性脑梗死患者经银杏叶黄酮治疗后其血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平的变化，以探讨其治疗机制。

1资料与方法

1．1一般资料选择2014年6月—2015年2月于我院神经内科以急性脑梗死为诊断而收入院的患者180例，采用随机数字表法随机分为实验组和对照组,各90例。均符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南》(2010年)[8]中诊断标准:1)初次发作的脑梗死患者；2)发病24 h内接受治疗；3)CT或核磁共振等影像检查确诊为急性脑梗死患者，意识清醒同意并自愿参与本实验者。2组一般资料比较无统计学意义(P>0.05)，见表1。

项 目实验组对照组平均年龄/岁67.63±9.2465.41±9.07平均病程/h16.23±2.5814.91±2.07男性/n(%)58(64.4)54(60.0)女性/n(%)32(35.6)36(40.0)收缩压/mmHg152.58±21.09156.22±20.53舒张压/mmHg112.45±14.13116.77±13.29高血压/n(%)12(13.3)14(15.6)冠心病/n(%)15(16.7)17(18.9)糖尿病/n(%)11(12.2)13(14.4)

1.2治疗方法

1.2.1对照组严格按《急性脑梗死的欧洲治疗指南》[9]，予以常规治疗，注射用奥扎格雷钠(海南碧凯药业有限公司,国药准字H20054803，批号：20100816)80 mg，250 mL氯化钠注射液稀释，2次/d

静脉滴注；小牛血去蛋白提取物注射液(长春天诚药业有限公司，国药准字H20003820，批号：20110711)800 mg，250 mL氯化钠注射液稀释，1次/d静脉滴注；阿司匹林肠溶片(江苏恩华药业股份有限公司，国药准字H32026548，批号：20100820)100 mg，每晚1次口服，共治疗2周。

1.2.2实验组在常规治疗基础上加用银杏叶提取物注射液(悦康药业集团有限公司，国药准字H20070226，批号：20121016)20 mL，以5%葡萄糖注射液250 mL稀释，1次/d静脉滴注，共治疗2周。

1.3观察指标及方法观察2组治疗前后临床疗效、神经功能缺损评分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α水平变化。血清指标采集:所有研究对象均在治疗前、后，空腹8 h后从肘静脉抽取静脉血3 mL，置于真空采血管中，4 ℃低温环境下静置1 h后以3 000r/min，离心20 min，分离血清，行双抗体夹心ELISA法检测血清中HIF-1α、Caspase-3、TNF-α浓度水平。

1.4疗效标准参照1995年全国脑血管病学术会议制定的标准判定[10]，显效：神经功能缺损评分减少90%以上；有效：神经功能缺损评分减少45%～90%；进步：神经功能缺损评分减少18%～45%；不进步：神经功能缺损评分减少17%～0%；恶化:神经功能缺损评分增加18%以上；死亡。神经功能缺损评分：参照1996年全国第四届脑血管病会议制定的评分方法进行2组神经功能缺损评分，最低为0分，最高为45分。

2结果

2.1治疗2周后2组临床疗效结果比较见表2。

表2　治疗2周后2组临床疗效结果比较(n=90)　例(%)

注：与对照组比较，#P<0.05

2.22组治疗前后神经功能缺损评分比较见表3。

±s,n=90)

注：与治疗前比较，#P<0.05，##P<0.01；与对照组比较，△P<0.05

2.3治疗2周后2组血清各指标变化比较见表4。

3讨论

急性脑梗死是一种具有高发病率、高病死率、高致残率的临床常见病，且由于人口老龄化的加剧、饮食结构等因素的变化，其好发人群逐渐年轻化。传统

±s,n=90)

注：与治疗前比较，#P<0.05，##P<0.01；与对照组比较，△P<0.05

医学将急性脑梗死归属于“中风”范畴，治疗当以益气活血、祛瘀通络为主要治疗大法[11-13]。银杏叶提取物注射液是近年来新兴的药物，提取自白果科植物白果的干燥叶，其主要有效成分为银杏叶黄酮。现在临床主要将之应用于治疗冠心病、心绞痛、脑动脉硬化以及高血压等心脑血管疾病。据现有文献报道，银杏叶黄酮具有多种药理作用，不仅能增加脑血流量、改善脑部组织血液循环、扩张冠状动脉，还能抑制血小板聚集、抗衰老、提高免疫力的功能[14]。临床虽有将银杏叶黄酮用于治疗急性脑梗死的文献报道，但并没有从HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等血清指标的角度进行分析研究。因此，本研究通过对急性脑梗死患者应用银杏叶提取物注射液，进一步探究其对患者神经功能缺损评分、HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指标的影响，以明确其临床疗效，并得出相关结论。

本研究结果发现，银杏叶黄酮能有效改善急性脑梗死患者神经功能缺损症状，提高治疗率。实验组经2周治疗后，其有效率明显优于对照组，病死率明显低于对照组。其原因可能是银杏叶黄酮能有效增加受损脑部组织的血流量，改善其缺血程度，以及还能抑制血小板聚集，防治血栓形成、缺血加剧，从而降低神经功能缺损评分，提高治疗有效率，降低病死率。亦有学者研究[15]证明，银杏叶黄酮具有降低血液黏稠度、清除自由基、改善脑功能的作用，在急性脑梗死发生早期即及时有效的清除了大量的自由基，在一定程度上防治神经功能缺损症状的加剧，这一结论也可能是实验组患者有效率、神经功能缺损评分优于对照组的原因。

本研究结果发现，银杏叶黄酮能有效调节急性脑梗死患者血清HIF-1α、Caspase-3、TNF-α等指标水平。HIF-1α是在人体缺氧的条件下而产生的一种转录调节因子，在正常氧气充足条件下并不表达，只有当机体组织发生缺氧时，才会被诱导激活并发挥其特有的生理作用，是人体在缺氧条件下维持内环境稳态的主要物质。研究[16]发现，HIF-1α主要通过调节缺氧反应性基因表达的分子通路而发挥其生理作用，据现有文献统计，HIF-1α的下游基因多达百余种，在缺氧发生时不仅可以促进红细胞、血管的生成，还能调节糖代谢、维持人体微环境稳态。但其发挥作用的具体机制目前仍未十分清楚，各家观点亦不十分相同。在本研究中治疗前2组HIF-1α水平均较高，其原因可能与脑组织突发梗死急剧缺氧、缺血促进其大量表达有关，而治疗结束后实验组明显低于对照组，其原因可能是实验组在应用银杏叶黄酮后，病变部脑组织的血流量增加，其缺血、缺氧程度得到有效改善，因此血清HIF-1α水平也随之恢复。Caspase-3是一种能够促使细胞凋亡的蛋白酶，在急性脑梗死发生时具有促进病变区神经元凋亡的重要作用。人体在正常生理条件下，Caspase-3以没有活性的酶原形式存在，并不发挥其生理作用，只有被细胞开始凋亡的信号激活后，才会活化并发挥其加速诱导细胞凋亡的作用。研究发现，急性脑梗死患者在应用Caspase-3抑制剂后，能够明显减轻病变区脑组织缺血神经元的损伤，且通过抑制Caspase-3表达亦可减轻脑缺血的损伤程度，降低致残率。在本研究中，2组在新发病时Caspase-3皆高度表达，而治疗结束后实验组患者血清Caspase-3水平明显低于对照组，这一结果可能与实验组在应用银杏叶黄酮后体内Caspase-3表达受到相应抑制有关，结合“抑制Caspase-3表达亦可减轻脑缺血的损伤程度”的结论，本研究中实验组疗效及神经功能缺损评分低的结果能够得以解释。TNF-α是一种早期炎性因子，主要由单核-巨噬细胞活化产生，在脑梗死急性期可加重患者脑缺血局部组织的损害，实验组患者经治疗后其血清TNF-α水平明显低于对照组，其原因可能与银杏叶黄酮调节免疫的功能有关，但其具体抗炎、调节免疫的机制目前尚不十分清楚。

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Ginkgo biloba flavonoids combined with ozagrel in acute cerebral infarction patients of serum HIF-1α, TNF-α and Caspase-3

LI Jihong

(Department of pharmacy, Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110032,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate the ginkgo biloba flavonoids combined with ozagrel in acute cerebral infarction patients of serumHIF-1α,TNF-α and Caspase-3.MethodsThe 180 acute cerebral infarction patients were selected and divided into control group treated by clinical routine therapy and experiment group treated by ginkgo biloba flavone injection,the clinical efficacy of the two groups of patients,neurological impairment score and serumHIF-1α,TNF-α and Caspase-3 level.The clinical effect were compared by SPSS 17.0.ResultsCompared with control group,the efficiency were higher(P<0.05).Compared with control group,the neurologic impairment score were lower(P<0.05).Compared with control group,the serum HIF-1α,TNF-α and Caspase-3 level were lower(P<0.05).ConclusionFlavonoids from the leaves of Ginkgo biloba on acute cerebral infarction patients better clinical curative effect,and can effectively improve symptoms in patients with neurological deficit,for the clinical treatment of cerebral infarction with important significance.

Keywords：Ginkgo biloba flavone;acute cerebral infarction;neurological function defect;HIF-1α;TNF-α;Caspase-3

(收稿日期:2015-06-10)

文章编号：2095-6258(2016)01-0091-04

中图分类号：R255.2

文献标志码：A

作者简介：李季泓(1970-),女,大学本科,副主任药师,主要从事药物提取与分离研究。

基金项目：“十一五”国家科技支撑计划(2007BA120B076)。

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2016.01.029