益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪生长性能、肠道形态及免疫指标的影响

郑文才 徐静 杨革玲

（广州广牧丰生物技术有限公司，广东广州510663）

益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪生长性能、肠道形态及免疫指标的影响

郑文才 徐静 杨革玲

（广州广牧丰生物技术有限公司，广东广州510663）

本试验旨在研究在饲粮中添加益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪生长性能、肠道形态及免疫指标的影响。试验选用80头28日龄、初始体重为（7.5±0.5）kg的健康“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪，随机分为2个组，分别饲喂基础饲粮（对照组）和在基础饲粮中添加2000mg/kg益生菌和有机酸复合制剂的试验饲粮（试验组），每组5个重复，每个重复8头仔猪。正式试验期为42天。结果表明：与对照组相比，饲粮中添加益生菌和有机酸复合制剂1）可显著降低仔猪料重比（P＜0.05）及腹泻率（P＜0.05）；2）极显著提高仔猪空肠绒毛高度（P＜0.01），显著提高十二指肠、空肠、回肠绒毛高度/隐窝深度比值（P＜0.05）；3）极显著提高仔猪胸腺指数（P＜0.01），显著提高脾脏指数（P＜0.05）、血清IgG含量（P＜0.05）及回肠黏膜SIgA含量（P＜0.05）。结果提示，饲粮中添加益生菌和有机酸复合制剂可以改善断奶仔猪肠道黏膜形态，提高肠道功能及部分免疫指标，缓解断奶应激引起的仔猪免疫功能下降，从而降低断奶仔猪腹泻率，提高饲料转化率。

微生态制剂；生长性能；肠道形态；免疫指标；断奶仔猪

断奶是养猪生产过程中的重要环节，早期断奶可以提高母猪的生产效率，降低饲养成本。但仔猪在断奶期生长发育不健全，肠道菌群不完善，加上环境、饲料等改变引起断奶应激，猪只常表现为生长迟缓、免疫力低下、腹泻或水肿。抗生素能够有效地解决仔猪断奶应激等问题，但长期添加会造成抗生素在畜禽产品中的残留及耐药性，使患病动物难以治疗，多种抗生素在饲料中已被禁止或限制使用。寻求新的添加剂替代抗生素的使用已迫在眉睫。

目前酸化剂和益生菌在仔猪上的单一使用已很广泛。酸化剂具有调控动物肠道微生物平衡、增殖有益菌、抑制有害菌、降低肠道pH、提高消化酶活性、提高营养物质消化率、减慢胃排空速度、提高动物抗应激和免疫力等方面的功能。益生菌制剂含有活的微生物，影响肠道菌群的定植和组成，对宿主的消化和免疫有刺激作用。肠道菌群的定植影响肠道的局部免疫功能和全身免疫功能，研究发现许多菌种能产生免疫刺激作用。益生菌对免疫系统的有益作用是其替代抗生素的基础，可改善动物的健康状况，增强对致病因子的抵抗力。酸化剂和益生菌的联合使用可能产生互作效应。本试验的目的是评定益生菌、有机酸等组成的新型复合饲料添加剂在断奶仔猪上的应用效果，为抗生素替代品的研发和应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用的添加剂由益生菌和有机酸按一定的比例混合而成的复合制剂（商品名：牧喜多），由广州广牧丰生物技术有限公司提供。

1.2 试验设计与动物

试验选用80头28日龄、初始体重为（7.5± 0.5）kg的健康“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪，按体重相近、公母各占1/2的原则，随机分为2个组，分别饲喂基础饲粮（对照组）和在基础饲粮中添加2000mg/kg益生菌和有机酸复合制剂的试验饲粮（试验组），每组5个重复，每个重复8头仔猪。试验期为42天。

1.3 基础饲粮

基础饲粮为玉米型饲粮，参考NRC（1998）5～10kg、10～20kg断奶仔猪营养需要，做适当调整，采用玉米-豆粕型常规饲粮。试验分为2个阶段，分别为试验的第1-14天和第15-42天，基础饲粮组成及营养水平见表1。试验组用益生菌和有机酸复合制剂替代等量玉米构成试验饲粮。

表1 基础饲粮组成及营养水平

1.4 饲养管理

每个重复的仔猪在同一圈舍内，预试3天后进入正式试验。自由饮水和采食，每日08：00和16：00饲喂两次。试验期间不对猪只使用任何抗生素类药物，准确记录猪只的腹泻和健康状况，每日打扫圈舍卫生。

1.5 样品采集与处理

于试验第43天，每个重复选1头接近平均体重的仔猪，空腹，前腔静脉采血10 mL，制备血清，用于IgG的测定。采血后将猪完全放血屠宰，分别剪去十二指肠、空肠及回肠中段肠管（3 cm），用生理盐水冲洗内容物，将肠道组织置于10%甲醛磷酸缓冲液中固定，用于测定肠黏膜形态结构。取空肠和回肠中段20 cm，沿纵轴剪开肠道，用冰的PBS溶液冲洗外壁和内容物，用玻璃刮下粘膜，放入3 mL EP管中，-80℃保存，用于肠黏膜SIgA的测定。采集肝脏、胸腺及脾脏用于免疫器官指数的测定。

1.6 测定指标与方法

1.6.1 生长性能

试验期间准确记录每天每栏采食量，并分别在试验第1、15、29和43天早上对仔猪进行空腹称重，计算试验第1-14天、第15-28天、第29-42天和第1-42天平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.6.2 腹泻总评分

试验期间每天08：00和20：00记录腹泻情况，并进行评分。腹泻评分由同一个人观察记录，计算试验第1-14天、第15-28天、第29-42天和第1-42天的腹泻总评分。评分依据如下：0分，无腹泻；1分，每栏腹泻猪头数小于该栏总头数的20%；2分，每栏腹泻猪头数为该栏猪总头数的20%～40%；3分，每栏腹泻猪头数大于该栏猪总头数的40%。

腹泻总评分=每个组早晚腹泻评分总数/重复数。

1.6.3 肠道黏膜形态结构测定

固定后的肠道组织样品经脱水以石蜡包埋，连续切片（5μm），以苏木精-伊红（HE）对切片进行染色。用显微镜观察肠道黏膜结构，并以Motic Med 6.0图像软件分析。每张切片测定10根完整绒毛的绒毛高度和隐窝深度，选择5张切片计算每个组织的平均值。

1.6.4 免疫器官指数

分别采集仔猪的肝脏、胸腺和脾脏，称量湿重，计算免疫器官指数。

免疫器官指数（g/kg）=器官湿重（g）/活体重（kg）

1.6.5 血清、粪便和肠黏膜抗体含量测定

血清IgG含量采用比色法测定，检测仪器为日本日立7160全自动生化仪；肠黏膜SIgA含量采用放射免疫分析法测定，试剂盒购自北京华英生物技术研究所，检测仪器为r-911全自动放免计数仪。

1.7 数据统计与分析

试验数据采用Excel 2010进行整理，采用SAS 8.1软件的t检验进行2个组间试验数据的分析，P＜0.05时为差异显著，P＜0.01时为差异极显著。

2 结果

2.1 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪生长性能及腹泻总评分的影响

由表2可见，与对照组相比，饲粮中添加2000 mg/kg益生菌和有机酸复合制剂显著提高了试验第15-28天仔猪平均日增重（P＜0.05），显著降低了试验第1-14天、15-28天、1-42天仔猪腹泻总评分及1-42天仔猪料重比（P＜0.05），极显著降低了试验第1-14天仔猪料重比（P＜0.01）。

表2 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪生长性能及腹泻总评分的影响

2.2 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪肠道形态的影响

由表3可见，与对照组相比，饲粮中添加2000 mg/kg益生菌和有机酸复合制剂显著提高了仔猪十二指肠、空肠及回肠绒隐比（P＜0.05），极显著提高了空肠绒毛高度（P＜0.01），对回肠绒毛高度有提高的趋势（P=0.07）。

2.3 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪免疫器官指数的影响

表3 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪肠道形态的影响

表4 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪免疫器官指数的影响

由表4可见，与对照组相比，饲粮中添加2000 mg/kg益生菌和有机酸复合制剂显著提高了仔猪脾脏指数（P＜0.05），极显著提高了仔猪胸腺指数（P＜0.01）。

2.4 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪血清、粪便和肠黏膜抗体含量的影响

由表5可见，与对照组相比，饲粮中添加2000 mg/kg益生菌和有机酸复合制剂显著提高了仔猪血清IgG含量（P＜0.05）及回肠黏膜SIgA含量（P＜0.05），对空肠黏膜SIgA含量（P=0.06）有提高的趋势。

表5 益生菌和有机酸复合制剂对断奶仔猪血清IgG、肠黏膜SIgA含量的影响

3 讨论

仔猪生理机能发育不完善，消化酶分泌不足，胃中产酸力不足，肠道菌群不健全，断奶会导致仔猪生长缓慢、食欲降低、消化不良、抗病力下降和腹泻等症状。饲粮中添加有机酸降低了肠道pH，抑制有害微生物生长，为乳酸杆菌等有益菌创造了适宜的生存繁殖环境；同时，益生菌在体内分解有机物的过程中又产生大量的有机酸，进一步降低胃肠道pH，抑制有害菌的生长和促进有益菌的增殖]。本研究结果表明，饲粮中添加有机酸与益生菌的复合制剂能够显著降低断奶仔猪腹泻率，提高饲料转化率，与陈代文等（2005）研究结果一致。

肠绒毛是小肠上皮和固有层共同向肠腔突出形成的细小突起，可使肠腔的面积扩大约10倍，极大地增加了营养物质的吸收面积。一般情况下，隐窝基部的细胞不断地分化并向绒毛端部迁移，形成具有吸收能力的肠上皮细胞以补充绒毛正常脱落的肠上皮。仔猪断奶后，肠道黏膜萎缩，肠黏膜上皮绒毛变短，隐窝变深，肠绒毛成熟细胞数量减少。绒毛变短，隐窝变深会减少营养物质的吸收，降低动物的生产性能。本试验研究发现，饲粮中添加益生菌和有机酸的复合制剂显著提高十二指肠、空肠、回肠绒隐比及空肠绒毛高度。说明益生菌和有机酸复合制剂为肠道细胞提供了较好的保护作用。

仔猪的中枢免疫器官包括骨髓和胸腺，外周免疫器官主要包括脾脏、淋巴结。脾脏内约含40%的T细胞和60%的B细胞，在体液免疫中起重要的作用。动物免疫器官的重量及其指数是评价机体免疫状态的常用指标，免疫器官重量的增加是生长发育快的表现，而免疫器官指数的提高则意味着免疫系统成熟较快。SIgA是外分泌液中存在的一种主要的抗体，主要由肠黏膜固有层中的IgA浆细胞分泌，是参与粘膜局部免疫的主要抗体，通过与相应病原体结合，阻止病原体黏附到细胞表面，从而在局部抗感染中发挥重要作用。此外，黏膜固有层中存在较多的IgG分泌细胞，由IgG分泌细胞合成的IgG抗体能够阻止相应抗原穿透黏膜进入组织中。本试验研究发现，饲粮中添加益生菌和有机酸的复合制剂显著提高脾脏指数及胸腺指数，显著提高血清IgG含量及回肠黏膜SIgA含量，对空肠黏膜SIgA含量有提高趋势，表明益生菌和有机酸的复合制剂能够促进免疫器官的发育而改善仔猪的免疫功能。

4 结论

4.1 益生菌和有机酸的复合制剂可以改善肠道黏膜形态，提高肠道功能，从而降低断奶仔猪腹泻率，提高饲料转化率。

4.2 益生菌和有机酸的复合制剂可以提高断奶仔猪机体的部分免疫指标，缓解断奶应激引起的仔猪免疫功能下降。

（略）

S828

A

1005-8613（2016）12-0025-04

2016-10-26